• Forum - Phase aqueuse, Lipides, Méthanol

Solubilite des phospholipides

6. Centrifuger 15 minutes, 500 g. Récupérer la phase organique. Réextraction sur la phase aqueuse des lipides restant avec une solution Chloroforme/méthanol/NaCl (86/14/1, v/v/v).  [...] ils s'extraient dans la phase aqueuse. Chez les plantes, tu n'auras pas ce problème (n'en déplaise à une équipe américaine, je ne crois pas une seconde que les plantes aient des acides sialiques).  [...]

Colorant hydrophile/hydrophobe

Donc si vous avez des idées de pigments pas trop cher, qui sont bien solubles dans l'eau (ou d'autres bien solubles dans les lipides et insolubles dans l'eau) et que l'on peut trouver dans le commerce, ça m'intéresse.  [...] et sinon pour colorer les lipides sur lames d'analyses végétales on utilisait du rouge soudan, vous pensez que c'est utilisable pour pour colorer simplement des gouttelettes lipidiques j'ai vu que comme il n'est pas soluble dans l'eau il est préparé sous forme d'une solution alcoolique, une fois dans un solvant alcoolique si on le mélange a de l'eau ça va aussi se trouver dans la phase aqueuse.  [...]

[Biochimie] séparation des lipides

un melange de 1-palmityl 2-stearyl 3-lauryl glycérol et d'acide phosphatidique en solution dans du benzene est agité avec un méme volume d'eau. Apres séparation des dex phase quel lipide se trouvera en asser forte concentration dabs la phase aqueuse pourquoi.  [...] donc c'est l'acide phosphatidique qu'on trouvera dans la phase aqueuse, mais l'hexan ne seprerai pas le phosphate du glycerole si ce le cas l'acide phosphatidique n'existeré plus.  [...]

[Biologie Moléculaire] solubilité ADN, ARN dans le phénol

L'extraction d'acide nucléique est quelque chose de nouveau pour moi alors je cherche des infos. Aux vues de ce que j'ai trouvé sur le net, avec du phénol acide, il semble assez clair que l'ARn est dans la phase aqueuse et que l'ADN soit dans la phase phénolique (avec des traces dans la phase aqueuse).  [...] Pour l'extraction des ARNs, le P/C/IAA doit être à pH acide (~5), ce qui va dénaturer l'ADN pour se retrouver dans la phase organique et pour ne trouver que les ARN dans la phase aqueuse.  [...]

phenol:chloroforme bizarre?

1- Ajouter phe.chl. isoamyl. à l'achantillon, mélanger, centrifuger. Prélever la phase aqueuse. Y ajouter du chl, centrifuger. Prélever la phase aqueuse. Précipiter l'ADN.  [...] 2- (le bizarre) Ajouter le phe, mélanger, centrifuger, et prelever la phase aqueuse. Ajouter chl.isoamyl. et précipiter (c'est la que ca coince, non).  [...]

demande d'infos!!! extraction de l'ADN

Quand tu as ta sauce d'ADN, tu utilises un alcool (style éthanol) pour précipiter ton ADN (car l'éthanol est hydrophobe). Tu utilises ensuite des ions chargés positivement (NH3+,...) pour rapprocher les différentes molécules d'ADN (qui sont chargée - à cause de leurs phosphates) et ça permet le regroupement des ADN entre eux, ceux qui les rend visibles.   [...] - Après avoir placé le melange contenu cellulaire/phenol, il faut agiter afin que l'ADN puisse se retrouver dans la phase aqueuse que l'on recupère après avoir centrifugé. 2 phases sont visibles. la phase aqueuse au dessus contenant l'ADN, la phase organique contenant l'ARN et l'interphase contenant les protéines.  [...]

[Biotechnologie] Extraction et purification ADN végétal

De plus, ma manipulation n'a rien donné, après le passage au spectro (230 à 320 nm) le résultat est plus que négatif (apparement trop de phénol) et un gel d'électrophorèse ne m'a rien donné non plus.   [...] Nous mélangeons par inversion de phase et nous plaçons notre microtube dans la centrifugeuse à 2000 rpm pendant 10 minutes.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction d'ARN

Le phénol sépare les molécules organiques (donc les protéines) des acides nucléiques. Les molécules hydrophiles se retrouverons dans la phase aqueuse (l'eau) les protéine insoluble seront à l'interphase phneol/eau et le reste dans le phénol.  [...] Désolé mais tu te trompes, le trizole ne permet pas de séparer l'ADN de l'ARN. les protéines ne sont pas dans la phase phénolique mais dans l'anneau dont tu parles à l'interphase avec la phase aqueuse qui contien tous les acides nucléiques.  [...]

[Biologie Moléculaire] les ARNs et extraction

En fait le protocole est fait de manière classique. Extraction au chloroforme d'environ 5 millions de cellules. récupération de la phase aqueuse, centrifugation et lavage et précipitation a l'éthanol. on redissoud le culot dans 10 µL d'eau. on a un rapport de pureté a peu près de 1.  [...] Autre p'tites questions. dans ce TP on n'a pas utilisé de phénol (élimine les protéines). Dans ce cas dans la phase aqueuse on a donc de l'ARN et des protéines, nan Ou alors la dénaturation des protéines par la guanidine fait que les protéines ne sont plus dans la phase supérieure.  [...]

[Biologie Cellulaire] protéines dans la phase organique?

J'aurai voulu savoir si quelqu'un aurait pu m'eclairer sur le fait que les proteines lors d'une extraction au phenol chloroforme migrent dans la phase organique alors qu'elles sont le plus souvent cytosolubles... Ne devraient elles pas se retrouver dans la phase acqueuse.  [...] Moi j'ai fait une extraction éthanol/chloroforme sur un broya de foie et les protéines étaient bien dans la phase supérieur aqueuse.  [...]