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[Biochimie] contamination culture importante

dans le même principe. je viens de relancer une culture de COS-7, j'ai déjà attendu genre 2 mois avant de pouvoir les commander et puis les avoir et là au 4ème passage champignon. est ce qu'un traitement au fongizone peut les sauver ou je repars à zéro en commandant de nouvelles cellules sachant que c'est genre 400€ l'ampoule.  [...] A ta place je les jetterais et je relancerais une nouvelle culture. Cela peut paraitre radical mais même si tu arrives à te débarrasser du champignon, les cellules risquent d'avoir dérivé à cause du traitement. Du coup, tous les résultats qui suivront pourront être faussé et de ce fait impossible à reproduire.  [...]

[Biologie Cellulaire] gros besoin d'aide: toutes mes cellules C2C12 sont mortes!

Là je viens de décongeler une ampoule de vieilles cellules mésenchymateuses que j'ai mises dans 25 ml du coup, mais vu qu'elles sont congelées depuis 2003 à -80°C, et pas à l'azote, j'ai des doutes sur leur état. Et donc, je risque de ne pas être beaucoup plus avancée.  [...] Lorsque je décongèle mes propres ampoules, où je mets environ 2 millions de cellules, je le fait aussi en T25 malgré le nombre énorme de cellules. Cela favorise réellement leur reprise.  [...]

[Biologie Moléculaire] Transfection transitoire

Depuis plusieurs mois, j'utilise un test d'activation transcriptionnel sur lignée cellulaire humaine en transfection transitoire qui fonctionnait parfaitement. Mais voilà, depuis trois mois, plus de résultats.  [...] Il se peut aussi que ta lignée ait dérivée. Alors tu jette tes cellules et tu décongel une nouvelle ampoule.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème DAPI & Cellules

J'ai déjà eu ce genre de problème alors que les cellules étaient négatives au test myco (avec témoin positif et négatif bien sûr). A ce moment là, pour je ne sais qu'elle raison les cellules étaient stressées. elles étaient granuleuses et il y avait quelques débris cellulaires mais sans exagérer non plus (inférieur à 5% de la surface).  [...] J'ai donc pensé que cette sorte de contamination marquée en DAPI pouvait être le noyau de cellules lysées (nécrose par exemple). J'ai décongelé une nouvelle ampoule de ma lignée et je n'ai plus observé ce phénomène.  [...]

[Biologie Cellulaire] Comportement étrange HEK293 EBNA transfectées

La décongélation se passe bien, les cellules arrivent à adhérer, elles se développent bien sans pression de sélection, mais lorsque je rajoute celle-ci quelque chose d'étrange se passe.  [...] J'ai adopté une nouvelle stratégie, vu que faire et défaire c'est toujours travailler, j'ai décongelé une ampoule de HEK 293 non transfectées d'un stock assez ancien (n'ayant pas été passé un trop grand nombre de fois) et je viens de re lancer 10 transfections différentes en parallèle, pour le moment les cellules vont bien même si je constate une efficacité de transformation de l'ordre de 20 % grand maximum avec de la Lipofectamine 2000 ou LTX d'Invitrogen.  [...]

[Zoologie] Physiologie des sparidés

Afin de vérifier des hyppothèses sur l'existance de cellules electrosensible chez les sparidés ou d'un pseudo organe electrorecepteur, évidement loin de l'ampoule de lorentzini qui elle carrectérise les élasmobranches.  [...] Je pense que pour trouver un spécialiste sur les sparidés tu pourrais essayer de trouver des publications sur les sparidés, ensuite tu n'as plus qu'a rechercher si les auteurs ont une adresse mail, ou travaillent dans une station de bio marine.   [...]

[Zoologie] éloigner les frelons

Nous ne pouvons alors plus monter les escaliers et sommes obligés de passer par le sous-sol tellement ils sont nombreux. Etrangement de jour on en voit très peu et nous n'avons pas trouvé de nid sur notre terrain. Que peut-on faire pour les éloigner ou à la limiter comment trouver leur nid L'endroit où nous habitons est dans une vallée entouée de forêts.   [...] J'ai fait récemment l'étonnante expérience que les nouvelles lampes frontales à diodes (qui émettent une lumière bleue) dérangent beaucoup moins les insectes nocturnes qu'un éclairage avec ampoule hallogène (au lieu de se planquer dès que la lumière est sur eux, ils continuent à vaquer à leurs occupations si on ne leur plaque pas la lumière dessus).  [...]

spermatozoïdes attirés par l'ovule

En cherchant sur google, j'ai trouvé qu'ils sont attirés par les sécrétions alcalines de l'utérus. Que sont ces sécrétions alcalines Il y a des champs électriques dans l'utérus Est-ce que c'est le même phénomène que pour les plaies qui génèrent un faible champ électrique, qui permet d'attirer les cellules environnantes là où des soins sont à prodiguer (source.  [...] Une fois dans les trompes utérines, les choses sont un rien différentes. Les cellules sont cilées et la lumière du tube très étroite. Les spermatozoides sont sur un petit tapi roulant qui va les conduire jusqu'a l'ampoule tubaire où ils seront stockés en attendant l'ovule si elle n'est pas deja là.  [...]

[Biologie Cellulaire] Au secours : Pb à la décongélation de cellules

La vitesse de congélation. Avez vous mis immédiatement les cellules au froid après les avoir mises en ampoule, ou avez vous eu un délai. celà peut tout tuer si le DMSO (utilisé en général entre et 1à et 20% dans les freezing media) donnant une forte pression osmotique a été trop longtemps en contact avec les cellules.  [...] Pour l'histoire j'utilise du FBS de Life Technologies ( =Gibco) et cela marche très bien en respectant bien les protocoles. Je me souviens avoir une fois oublié des ampoules 2 bonnes heures en salle de culture avant de les mettre au froid. Lors de la remise en culture, les cellules restaient soit quiescentes, soit étaient mortes, sans jamais adhérer.  [...]

Ya t'il des risques ? Combien de temps les spermatozoïdes vivent dans l'air???

Mais quand même, le spermatozoide n'est pas une entité merveilleuse qui retrouverait une ovule cachée dans le desert. Je vois mal cette petite cellule trouver son chemin toute seule de l'entrée vu vagin jusqu'a l'ampoule tubaire.  [...] Sachant que le cheminement de ces petites cellules sont environ de 300 millions déposé dans le vagin et seuls quelques centaines arrivent dans les trompes et seulement 1 seul pénètre dans l'ovule au niveau de la trompe tubaire comme le dit Piwi.  [...]