• Forum - Mutation, Plasmide, Bactérie

[Biologie Moléculaire] Mutation ponctuelle spontanée d'un insert dans un plasmide?

est-il arrivé a quelqu'un de se retrouver avec une mutation spontanée (un C au lieu d'un T) dans un insert cloné dans un plasmide d'expression Eukariote et amplifié dans JM109.  [...] Merci Hellbly pour votre réponse rapide... vous pensez donc comme moi que si mutation il y a c'est au moment d'une amplificaction en PCR et qu'il est tres improbable qu'un plasmide mute du fait de la machinerie enzymatique de la bactérie n'est-ce pas.  [...]

ADN recombinant et plasmide

Bonsoir, je n'ai pas d'exemple de bactéries, mais j'ai une image où l'on montre une bactérie avec ses propres chromosomes, et on lui introduit un plasmide. Voici l'image diapo numéro 7. http.//www.dil.univ-mrs.fr/~vancan/o...ours2003_4.pdf.  [...] Je ne sais pas pourquoi mais j'ai l'impression que tu crois qu'on peut enlever un plasmide d'une bactérie, le modifier, et le remettre exactement à la même bactérie. Je me trompe C'est possible vu que je ne suis toujours pas couché.  [...]

Biologie moléculaire: quantité de plasmide

Nous devons purifier et analyser 2 plasmides bactériens. Plasmide A et Plasmide B. Le B dérive du A (par mutation).  [...] Tout d'abord, nous avons des cultures de bacteries et on effectue l'extraction des plasmides.  [...]

[Biologie Moléculaire] Colonies de bactéries

Je suis actuellement entrain d'effectuer une modification de BAC par recombinaison homologue dans la bactérie DH10B. Je viens de transformer mes bactéries qui contiennent le BAC avec le plasmide contenant la séquence que je veux insérer dans ce BAC. Après l'electroporation, mes bactéries ont poussées sur un milieu contenant des antibiotiques appropriés montrant que certaines ont bien intégrer le plasmide et que celui ci a du s'intégrer dans le BAC (le plasmide contient une origine de réplication qui ne lui permet pas de se répliquer de façon autonome dans ce type de bactéries).  [...] La strategie est generalement de transformer en meme temps le plasmide a modifier et l'insert, et dans des proportions ou une bacterie sera transformee par un seul plasmide a la fois. Pas mal de mise au point en perspective.  [...]

[Microbiologie] Bactérie et transposon

Je souhaiterai savoir d'où proviennent les transposons. Du génome de la bactérie du plasmide ou d'un plasmide d'une autre bactérie.  [...] Les transposons sont des séquences d'ADN capables de changer de localisation dans le génome. Ils peuvent se trouver au niveau du chromosome ou d'un plasmide mais ils n'apparaissent pas à l'état libre. Ils peuvent être transférés d'une bactérie à l'autre.  [...]

[Biologie Moléculaire] Identification d'un gène déterminé

Donc si je reformule ma question je veux observer si une gène (en l'occurrence le gène bla ici) qui se trouve tout d'abord dans un plasmide peut être recopié par la bactérie dans son patrimoine génétique. Et est-ce possible que cela se produise.  [...] Et si ce n'est pas le cas pour cette bactérie, en plus généralement existe-il des cas particuliers ou certains gènes d'un plasmide peuvent être recopier volontairement dans le patrimoine génétique d'une bactérie.  [...]

isolation d'un plasmide

De plus, lorsqu'on veut transformer une bactérie, vaut il mieux donner un légr choc thermique et une source chimique pour faciliter l'incorporation du plasmide.  [...] .. tu verras que tu as du DNA dans le clone transformé et que tu n'en as pas chez le non transformé... si ce n'est pas le cas, c'est que tu as transformé des bactéries qui ont déjà un plasmide... ce qui ne devrait pas être le cas dans la majorité des utilsations faites en biomol.  [...]

[Biologie Cellulaire] transfert des gènes de résistances

Conjugaison bactérienne, une bactérie va faire un pont avec une autre et le plasmide conjugatif va passer de l'une à l'autre ( celle qui donne le plasmide en garde évidemment une copie ). Or il se peut que ce plasmide soit intégré au chromosome et donc transfert un bout de chromosome qui peut porter de tel géne.  [...] Si la bactérie receveuse intégre cette ADN elle devient résistante grâce au géne acquit. Ou, le plasmide peut fusionner avec un autre plasmide qui comporte un géne de résistance et l'histoire et la même.  [...]

[Biologie Moléculaire] Gène0 AOX1!!

En effet je n'ai pas très bien compris les mécanismes qui menenet à la multiplication des plasmides vecteur de clonage qu'on insère dans une bactérie.  [...] Pour répondre à Log, en complément à ce qu'a dit piwi, dans une bactérie,on peut trouvé une centaine de plasmides...et ce ne sont pas toutes les bactéries qui vont assimiler le vecteurs, pour les sélectionner,il existe ce qu'on appelle le Criblage...je peux m'étaler si tu veux.  [...]

[Biochimie] Problème de transformation

Enfin, quel est le volume de culture dans lequel tu as fait pousser tes bactéries après la transformation est-ce qu'il y avait déjà de la kanamycine dedans et quel volume as-tu utilisé pour étaler sur ta boite.  [...] D'où l'intéret de toujours vérifier que les colonies que tu isoles sont résistantes en raison de la présence du plasmide, et non d'une mutation spontanée. Ceci dit, si tes bactéries 'transparentes' ne poussent pas quand tu les repiques, ca veut dire que c'est des faux positifs.  [...]