• Forum - Molécules, ADN, Fragments

[Biologie Moléculaire] élèctrophorèse (ADN)

Ensuite le traitement aux UV a pour conséquence de fragmenter ces molécules d'ADN en fragments plus petits, de façon a ce que plus on expose aux UV, plus on fragmente l'ADN. Du coup a T1, une partie de l'ADN de départ est fragmenté, donc moins de signal, a T2, on a tout cassé, donc plus de barre mais un ensemble de fragments de petite taille qui doit ressembler à une trainée.  [...] Les fragments d'ADN ne restent pas sur le gel d'agarose d'où le fait que tu n'as pas plusieurs barre (sinon ça voudrait dire que les délétions dù aux UV donne des molécules d'ADN de tailles différentes) mais bien qu'une seul qui correspond à ton ADN qui est resté intacte (n'oublie pas que tu n'as pas qu'une seule molécule d'ADN dans un puit mais plusieurs).  [...]

ADN

Donc dans un premier temps de la vie, ces molécules auraient pu à la fois porter l'information génétique et jouer le rôle d'enzymes.  [...] J'ai lu un livre qui parle de cela, et expliquant pour l'ARN aurait une apparition plus resente que l'ADN. Et que la formation de l'ADN ( en tres simplifier ) serait du a une association deux molécules d'ARN ( avec un changement U-. T), et ceci pour une plus grande stabilité.  [...]

Southern blot

L'irradiation aux UV permet de photoponter les molécules d'ADN a la membrane de nitrocellulose. Ceci permet d'eviter de perdre les fragments d'ADN lors des hybirdations.  [...] La neutralisation sert à tamponner (après dénaturatio) étant donné que tu dois hybrider avec une sonde par la suite... Les UV servent à ponter l'ADN comme l'a dit YoYo, cependant cette étape est facultative, et certains sautent cette étapes... (pas moi en tout cas ).  [...]

TPE sur l'ADN aide pour l'électrophorèse :)

L'électrophorèse consiste a faire migrer des fragments d'ADN dans un gel grace à un champs électrique. L'ADN étant chargé négativement les molécules vont se déplacer vers la cathode. Comme le gel, consiste en un maillage, les grandes molécules sont plus retenues que les petites.  [...] à chaque '= bande correspond un fragment d'ADN. En comparant les profils de ta salive et de tes suspects tu peux potentiellement trouvé le coupable. Mais j'avoue de jamais avoir entendu qu'on pouvait utiliser une électrophorèse pour la criminalogie. J'aurai plutot pensé au polymorphisme du génome.  [...]

[Microbiologie] enzyme de restriction

qu'elle est le but d'utilisé une enzyme de restriction qui donne des fragments d'ADN de grande taille (afin de réaliser l'electrophorse en champ pulsè ).  [...] La réponse est presque dans la question. Le but d'une électrophorèse en champ pulsé est justement de séparer des molécules d'ADN de haut poids moléculaire, donc plutôt longue. Utiliser des enzymes de restriction reconnaissant peu de sites de coupure va te permettre d'obtenir des fragments d'ADN de grande taille que tu pourras faire migrer pour étudier le génome sur une large étendue.  [...]

clonage qui ne fonctionne pas ? ratio ?

6.1 vous savez que c'est en quantité de molécules et pas en quantité d'ADN, il faut donc prendre en compte les tailles des fragments.  [...] Perso je ne déphosphoryle jamais et ça marche très bien. La ligation sur la nuit, je le fais dans des cas un peu tordus (ligation simultanée de plusieurs fragments et/ou inserts de grandes tailles, genre 10 kb) et ça aide.  [...]

Question idiote sur le génôme humain

En gros (et vraiment très gros). on tire dans le tas (tas d'ADN) et on séquence les fragments. ensuite avec des programmes, on aligne les fragments et superpose les régions identiques afin de reconstituer la frise.  [...] Le génome dans son entièreté est fractionné au hasard pour obtenir des plus petits morceaux. Comme au départ on a plusieurs molécules d'ADN équivalente, on obtient, après digestion, des fragments dont les séquences peuvent se superposer. Le séquençage est donc redondant.  [...]

[Biologie Moléculaire] TP digestion ADN par enzymes de restriction par électrophorèse sur gel d'agarose

L'importance du fait que ton ADN au départ soit circulaire ou pas est que si tu coupes 1 fois par une enzyme une molécule d'ADN circulaire, tu vas te retrouver avec une seule bande sur ton électrophorèse, car tu auras juste linéarisé. Alors qu'une coupure sur un ADN déjà linéaire donnera deux fragments.  [...] D'accord donc si j'ai bien compris si je n'obtiens pas de fragments, c'est à dire que je reste avec la molécule d'ADN de départ ça veux dire qu'il n'y a pas eu digestion, alors que si je trouve plusieurs fragments qui sont à des positions différentes car migré de manière différente ça veux dire que mon fragment d'ADN initial a été digérer c'est ça.  [...]

replication

La primase synthétise des amorces d'ARN ( fragments d'Okasaki ). L'ADN pol 3 utilise ses fragments pour synthétiser l'ADN (ces fragments lui fournissent l'extrémité 5') et la pol 1 éliminera ces fragments et les remplacera par de l'ADN. Enfin, ces fragments d'ADN (qui remplacent les fragments d'Okasaki) seront lié au reste du brin par une ligase.  [...] Les fragments d'Okazaki sont l'ADN synthétisé à partir des armoces ARN. C'est après le passage de l'ADN-pol-1 qu'en effet la ligase va relier les fragments pour les unifier en un seul brin d'ADN. Les fragments d'Okazaki sont mixtes. ils contiennent encore l'amorce ARN mais surtout la séquence d'ADN complémentaire nouvellement synthétisé par complémentarité.  [...]

Épigénétique

En réalité moléculairement, ils peuvent correspondre à différents événements qui modifient l'ADN. des mutations ponctuelles effectivement, des délétions / duplications de fragments d'ADN, des modifications chromosomiques, etc.  [...] Peu de ces mutations épigénétiques, sont référencées. Les exemples les plus frappants concernent la méthylation de l'ADN chez certaines plantes où une méthylation correspond à un caractère et se transmet de façon mendélienne... Mais avec éventuellement une réversion à une génération.  [...]