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[Biologie Moléculaire] La carte de restriction

disons que nous avons une molécule de l'ADN linéaire de 15 kpb la digestion de celui-ci par trois enzymes nous donne quelque chose comme ça.  [...] Si ton ADN est linéaire et que la digestion par une enzyme (exemple Bam HI) génère deux fragments (de 14 et 1 kpb), ça veut dire qu'il n'y a qu'un seul site pour cette enzyme =) comme un fil qu'on coupe en deux une seule fois. on se retrouve avec deux morceaux.  [...]

[Biologie Moléculaire] TP digestion ADN par enzymes de restriction par électrophorèse sur gel d'agarose

L'importance du fait que ton ADN au départ soit circulaire ou pas est que si tu coupes 1 fois par une enzyme une molécule d'ADN circulaire, tu vas te retrouver avec une seule bande sur ton électrophorèse, car tu auras juste linéarisé. Alors qu'une coupure sur un ADN déjà linéaire donnera deux fragments.  [...] D'accord donc si j'ai bien compris si je n'obtiens pas de fragments, c'est à dire que je reste avec la molécule d'ADN de départ ça veux dire qu'il n'y a pas eu digestion, alors que si je trouve plusieurs fragments qui sont à des positions différentes car migré de manière différente ça veux dire que mon fragment d'ADN initial a été digérer c'est ça.  [...]

Dénaturation de l'adn en pH acides

D'ailleurs en parlant de dénaturation de l'ADN, on parle souvent de digestion par des enzymes de restriction de l'ADN avant des techniques de séquençages comme des Southern blot etc.  [...] heu... ben southern blot c'est le nom de la methode. Le principe de la methode est d'hybrider une sequence d'ADN connue sur un pannel de sequence d'ADN inconnues (banque d'ADN, ADNg coupé par des enzymes de restriction, etc...) pour mettre en evidence la presence ou l'absence de la sequence connue.  [...]

[Biologie Moléculaire] Principe des banque génomique/cDNA

bonjour,je suis en 1ere année de pharmacie et je comprend pas en fait l'utilité... même si je comprend en gros les techniques utilisées.Je vous pose de questions au fur et à mesure.   [...] On ne parle pas de dégradation par des enzymes de restriction, mais de digestion. La différence est quand même notable. avec le terme dégradation je signifie le fait que je pars d'une macromolécule (ADN) pour me retrouver avec des nucléotides à la fin. Alors que le terme digestion signifie que je vais couper à certains endroits pour me retrouver avec des fragments de tailles différentes.  [...]

[Biologie Moléculaire] Enzymes de restriction sur plasmides- Digestion complète et incomplète

La digestion incomplète est une digestion qui n'est pas efficace sur l'ensemble des molécules du substrat. Exemple. la moitié des plasmides sont digérés, l'autre moitié est intécte. Elle se produit quand l'enzyme n'est pas bien dosée, qu'elle n'est pas très active, que la température ou le tampon ne sont pas bien ajustés,  [...] dites moi svp comment peut on trouver le nombre de fragments d'ADN produits lors d'une double digestion du plasmide pCR-gai par les enzymes de restriction HindIII et EcoRI et leurs tailles respectives.  [...]

Différences d'ADN entre les ètres vivant ?

Mais ne serait ce pas possible de procéder à des digestions enzymatiques sur des gènes spécifiques à l'homme Ainsi lors de l'électrophorèse on verrait si des bandes apparaissent. Si oui c'est un homme si non s'en est pas un.  [...] je pense qu'il y a bien trop de point commun entre les grand singes et l'homme pour pouvoir les identifier uniquement grâce a des digestion enzymatique ou alors il faudrait travailler sur les marqueur micro satellite ou attendre que le barcoding soir au point.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction de l'ADN et digestion enzymatique

Je suis actuellement en train de rédiger mon compte rendu de TP concernant une extraction d'ADN et une digestion enzymatique par 3 enzymes (EcoRI, BamHI et HindIII), en faisant le TP, notre professeur ne nous a pas vraiment expliqué, je dirais même qu'il n'a donner aucune information.  [...] Le but de ce TP est faire une carte de restriction et sur une pGlo carte j'ai pu identifier les sites de restrictions de chaque enzyme et faire la carte de restriction mais la chose qui me pose problème, c'est de tracer la courbe étalon à partir des deux électrophorèses.  [...]

électrophorèse sur gel d'agarose

J'ai eu un TP de biotechnologie où on a fait une électrophorèse sur gel d'un plasmide purifié non digéré et d'un plasmide purifié dirigé par deux enzymes de restriction.  [...] J'ai eu les résultats de la digestion et j'observe dans chaque cas 2 bandes. pour le plasmide non digéré j'ai une bande claire puis une bande foncée. et pour le plasmide digéré, j'ai d'abord la bande foncée puis la bande claire.  [...]

Enzymes de restriction

non les enzymes de restrictions coupent l'ADN bactérien, sauf celui de la bactérie qui synthetise naturellement l'enzyme. Cette bactérie peut etre protégée de la digestion soit par méthylation (mais ca ne permet pas de tout expliquer car bcp d'enzymes ne sont pas sensibles a la methylation), soit tout simplement parceque le site n'existe pas dans le génome.  [...] . Cette bactérie peut etre protégée de la digestion soit par méthylation (mais ca ne permet pas de tout expliquer car bcp d'enzymes ne sont pas sensibles a la methylation), soit tout simplement parceque le site n'existe pas dans le génome.  [...]

Solubilité des protéines et role d'un acide biliaire

Les sels biliaires sont des dérivés du cholesterol. Il y a majoritairement les désoxycholates. Ils ont une nature fortement lypophile mais une partie de la molécule est polaire. Ils forment donc des émulsions dont le rôle est une meilleure accessibilité des enzymes lytiques (phospholipases) pour les lipides d'origine alimentaire (notament les triglycérides = les graisses) et sont donc indispensables à la libération des acides gras et donc à la digestion.  [...] Il faut distinguer les détergents forts, type SDS, qui dénaturent les protéines, et les détergents doux, non dénaturants (comme le Triton) qui entourent la protéine en interagissant avec ses parties hydrophobes, dans sa conformation native.   [...]