• Forum - Méthodes, Isolement, ADN, ARN

Isoler un ARNm

Bon alors le mieux c'est de lyser les cellules par les méthodes classiques, avec en plus un inhibiteur des RNases. Après tu fais une centri (10000rmp pendant 10-15 minutes) pour enlever les membrane et les organites. Après le mieux est de faire agir une DNase après avoir fait agir un dénaturant de protéines (SDS, beta-mercapto,  [...] ..) qui enlèvera les protéines liées à l'ADN pour mieux le dégrader. Avec ce que tu récupère (ARN plus ou moins purs), tu peux ensuite faire un gel dénaturant puis hybrider une sonde spécifique de l'ARNm que tu veux purifier (Northern). Tu auras donc une seule bande si ta sonde est assez spécifique et que tu n'as pas perdu ton ARNm en cours de route (normalement non ).  [...]

Rôle de l'EDTA dans dans l'isolement de l'ADN

Je dois faire l'isolement de l'ADN de thymus de veau. Dans la solution A utilisée pour homogénéiser le thymus dans un waring blendor, il y a une certaine quantité de EDTA. Quelqu'un pourrait-il me dire à quoi sert le EDTA dans cette solution Et pourquoi le thymus de veau et non de porc (moins cher à mon avis) par exemple.  [...] Info supplémentaire. en biologie moléculaire, on utilise l'EDTA pour chélater ces mêmes cations lors d'une extraction d'ADN afin de protéger l'ADN des DNAses qui elles aussi sont activent uniquement en présence de cations bivalents.  [...]

[Microbiologie] La fermentation microbiologique

Le biogaz est un gaz pauvre qui contient environ 50% de méthane. Il peut faire l'objet d'une valorisation thermique ou électrique. La valorisation thermique du biogaz permet rarement de couvrir les besoins de chaleur autres que ceux des sites de production.   [...] Ensuite on va chercher à isoler individuellement les levures, en effet il y a de fortes chances que ton échantillon en contienne différentes souches, et celles-ci risquent de pousser à des vitesses différentes et donc certaines peuvent être masquées par d'autres.   [...]

[Biologie Moléculaire] Combien d'enzymes différentes dans le vivant ?

Je pense plutôt que les différences sont dûes à la méthode d'approximation plutôt qu'à une définition non-universellement acceptée sur la notion d' enzymes différentes. Cela dit, il m'est impossible de trouver une publication scientifique où une des méthodes serait expliquée.  [...] La combinaison de différentes méthodes est d'ailleurs de plus en plus populaire et permet d'accéder à des données qu'aucune méthode prise isolément aurait permis d'obtenir.  [...]

Cherche personne compétente en parasito.

voila j'ai pas mal de questions en parasito niveau Master 1 et plutot que de flood le forum, j'aurai aimé savoir si il y avait quelqu'un d'assez compétent (de préférence) pour en discuter via messages privés ou Msn.   [...] Cela concerne les variations antigèniques de Plasmodium falciparum et notamment les méthodes expérimentales et les techniques d'isolement de variant.  [...]

[Génétique] Dm sur la myopathie de Duchenne

- montrez que les connaissances modernes en génie génétique permettent de diagnostiquer la présence de l'allèle muté responsable de la myopathie de Duchenne et pourraient avoir des applications dans le traitement des maladies génétiques.   [...] Je suis désolé d'avoir à vous dire que c'est atroce. Ne sentez vous pas que vous devriez user de methode pour décrire un document.  [...]

Extraction d'ADN

La technique pour l'isolement rapide d'ADN mitochondrial (mt ADN) à partir de cellules d'animaux, est basée sur le procédé sélectif de dénaturation alcaline de BIRNHOIM et DOLY et évite l'utilisation de la centrifugation en gradient de densité dans le CsCl.  [...] En parcourant des matériels et méthodes (de l'équipe de Pierre Taberlet à Grenoble par exemple), ils utilisent le kit Tissue and Blood kit de Qiagen et une PCR pour les ADN mitochondriaux (à partir de biopsie de chèvre).  [...]

[Biologie Moléculaire] concentration

comment puis je estimer une concentration d'une suspension bactérienne de 5x10 6 cells afin de faire l'isolement de l'ADN merci.  [...]

[Microbiologie] environnement

les techniques ARDRA DGGE et RISA sont des méthodes d'empreintes moléculaires sur ADN total, je débute donc je ne comprends pas très bien a quoi cela correspond.  [...] j'ai compris que pour les méthodes RAPD et ERIC on fait un isolement de souches puis on les amplifie par PCR et après on fait un séquencage mais ce que je n'arrive pas à comprendre c'est qu'elle est la différence entre les deux et surtout leurs principes.  [...]

Tous les symptomes d'une légionellose

Le diagnostic de la légionellose s'appuie sur l'existence d'une pneumonie confirmée radiologiquement. Le diagnostic clinique est suivi d'un diagnostic biologique qui peut être réalisé selon différentes méthodes. isolement de la bactérie dans un prélèvement bronchique, présence d'antigènes solubles dans les urines, augmentation des titres d'anticorps par quatre entre deux prélèvements sanguins successifs, immunofluorescence directe positive.  [...] Si vous avez été contaminé par des aérosols contaminés en Légionelle et que les symptômes ressemblent à ceux d'une grippe, ne vous inquiétez pas, c'est que vous n'avez pas de Légionellose. Vous avez seulement ce qu'on appelle une Fièvre de Pontiac. C'est exactement la même chose qu'une grippe, sauf que ce n'est pas contagieux et que l'agent infectieux n'est pas le même. Et donc Ça guérit tout seul.   [...]