• Forum - Méthodes, Extraction, ADN

recherche d'un contact par mail avec un laborantin - Page 2

j'ai l'impression que tu n'as pas bien compris à quoi servait l'électrophorèse. Si tu essaies de faire migrer ton ADN brut d'extraction tu n'obtiendras rien d'intéressant. Il te faut d'abord le découper en morceaux (enfin, c'est une des méthodes possibles) à l'aire d'enzymes qui coupent en certains sites bien particuliers.  [...] Cependant, les méthodes d'aujourd'hui permettent (parfois) de sauter l'étape d'extraction de l'ADN. On passe directement à l'étape de PCR, où les cellules sont lysées et l'ADN libéré lors de la première étape. On peut donc diminuer ce temps à 6H (voir même à 4H en étant -très- pressé).  [...]

de la tache de sang au profil génétique

j'aimerais savoir si quelqu'un peut m'aider à comprendre comment on extrait l'ADN d'une cellule et comment on le purifie pour ensuite utiliser la méthode PCR afin de dresser un profil génétique et identifier un criminel.  [...] Pour extraire l'ADN d'une cellule, il y a plusieurs méthodes, le principe est dans un premier temps d'exploser les parois puis de purifier l'ADN. (ex. trizol puis chlorophorme, EtOH et extraction phénolique...).  [...]

[Génétique] Extraction de l'ADN au Chelex 100

J'étudie actuellement les différentes méthodes d'extraction de l'ADN et je ne parviens pas à comprendre la méthode d'extraction au moyen de la résine Chelex 100. Est-ce-que quelqu'un qui s'y connait plus que moi pourrait me l'expliquer en termes simples.  [...]

ADN mitochondrial

Bonjour, je cherche à discuter avec des biologistes qui travaillent, au Maroc, sur l'ADN mitochondrial.  [...] [QUOTE=zaari]Bonjour, je cherche à discuter avec des biologistes qui travaillent, au Maroc, sur l'ADN mitochondrial. Plus exactement sur les méthodes d'extraction de l'ADN mitochondrial à partir des ossements.  [...]

[Biologie Moléculaire] problème de qPCR sur des échantillons de maïs

je cherche à mettre au point une méthode de quantification en Evagreen d'un champignon dans des échantillons de maïs cultivés en serre, et tout a bien marché (dessin d'amorces spécifiques, quantification d'ADN du champignon pur...) mais dès que j'ai voulu passer les échantillons de maïs, j'ai obtenu des résultats non répétables, avec des pics de fluorescence qui ne correspondent pas au champignon et surtout qui changent d'un jour à l'autre.  [...] Etant donné que lorsque l'on mélange de l'ADN du champignon pur et de l'ADN de maïs pur on n'a aucun problème, j'ai pensé qu'il y avait des composés dans mes échantillons qui inhibaient la qPCR, mais j'ai testé plein de méthodes d'extraction et de purification et rien n'y fait.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction acides nucléiques totaux

La question que j'ai à poser à la communauté futura science est simple. connaissez-vous une méthodes d'extraction pour les acides nucléiques totaux (extraction ADN + ARN) qui fonctionne chez le végétal.  [...] En même temps, certains kits préconisent un traitement à la RNAse pour se débarrasser des traces d'ARN lors d'une extraction ADN. Mais les ARN sont-ils suffisamment nombreux dans ce cas J'avoue que je n'ai pas encore assez d'expérience.  [...]

Extraction d'acides nucléiques

J'aurais voulu connaître succinctement les principes généraux (et pas les protocoles..) des méthodes d'extraction de l'ADN plasmidique, ADN totaux, ADN chromosomique, ARN. Parmis les ARN peut on séparer les ARNr, ARNt et ARNm.  [...] Sinon a partir de la solution (extraction à partir de cellule de mammifere, levures etc..) de départ tu transformes des bacteries pour isoler le plasmide.  [...]

protocole d'extraction d'ADN

oui j'ai essayé mais ce que je trouve c des these de doctorat et la partie qui m'interesse il parle brievement de l'extraction d'ADN on a utulisé pour l'extraction la methode X... et quand je cherche la methode je n'y trouve rien, je vais ressayer encore une fois si je tombe sur quelque chose.  [...] la mon encadrant me demande de lui chercher tous les méthodes d'extraction d'ADN pour les Actinomycetes vu les streptomyces et leur problèmes.  [...]

[Biologie Moléculaire] PCR quantitative

1. Il faut que l'appareil utilisé pour quantifier l'ADN ayant servis à faire la gamme étalon soit extrémement précis, sinon tu feras de la quantification absolue, par rapport à une référence fausse. Donc la précision de ta quantif en qPCR dépendra de la précision de ton étalon.  [...] 2. D'où 2ème problème. il peut arriver que l'efficacité de la PCR soit différente entre la PCR sur la gamme standard et la PCR sur l'échantillon. Notamment si les conditions/méthodes d'extraction d'ADN sont différentes, tu peux avoir des contaminants différents qui vont influer différement sur l'efficacité de PCR, et donc l'utilisation de la gamme standard sera un peu faussée.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction ADN Plasmodium

Je suis doctorant en parasitologie, une partie de mon travail repose sur la PCR de plasmodium. Le problème c'est que j'ai pas trouvé dans la bibliographie un protocole d'extraction d'ADN parasitaire depuis le sang total, j'ai trouvé seulement des méthodes utilisant des kit d'extraction tel que QUIgen.  [...] extraction de l'ADN totatal par l'un de ces deux protocole puis ensuite PCR avec des amorces spécifiques de Plasmodium, ca devrait faire l'affaire.  [...]