• Forum - Méthode, Protéine, Sérum

Méthode de Lowry, Utilisation d'albumine de sérum bovin et d'une autre protéine

Bonjour à tous, c'est sûrement une question stupide, mais je me demandais s'il était possible en utilisant la méthode de Lowry de trouver la concentration molaire d'une protéine autre que l'albumine de sérum bovin (ABS) même si j'ai effectué ma courbe d'étalonnage avec de l'ABS.  [...] Parce que pour calculer la concentration molaire, il faut la masse molaire. Sauf que dans votre extrait, j'imagine qu'il n'y a pas qu'une protéine purifiée, mais des milliers (millions ). Vu que le mélange est hétérogène, impossible de parler de masse molaire.  [...]

ELISA et protéine dénaturée

je travaille sur des protéines recombinantes. Mon problème est que je souhaiterai faire un dosage par ELISA de protéines recombinantes sur lequel serait fixé des tensio actifs style SDS. Est ce que quelqu'un sait par expérience si les molécules de tensio actifs peuvent géner voir empécher la fixation des anticorps sur la protéine. Merci.  [...] es ce que quelqu'un connait des documents ou il explique comment distinguer l'epo naturelle et de synthese grace a la méthode elisa.  [...]

Production des Protéines recombinantes

SVP. je veux savoir la méthode de la production d'une protéine recombinante, par exemple. La sérum albumine humaine.  [...]

[Biochimie] Dilution en cascade

Je doit réaliser une gamme étalon de la protéine standard BSA (Bovin Serum Albumin) pour doser les protéines de mes échantillons avec la méthode.  [...] Mais voila, je voulais faire une dilution en cascade, c'est à dire prendre un volume d'un tube et l'ajouter au tube suivant. Le volume final dans chaque tube doit rester 100 µL.   [...]

[Biochimie] sérum et anticorps polyclonaux

Etant donné que je travaille sur des plantes, je me demande si (i) il est vraiment nécessaire de purifier (ou au moins enrichir) mon sérum en anticorps dirigés contre ma protéine chérie et (ii) si vous pouvez me suggérer une méthode facile et pas trop longue (et idéalement ne demandant pas des équipements très onéreux) pour purifier/enrichir mon sérum.  [...] Au cours de ma thèse, j'ai eu l'occasion de produire une protéine his-taggée et la stratégie que je voudrais mettre en place serait de procéder pareil avec ma protéine, la purifier avec le tag puis l'utiliser pour enrichir mon sérum. Sur le papier, c'est cohérent (je crois) mais comme toujours, il y a un fossé entre le papier et la paillasse.  [...]

Pta

Je viens sur ce forum car j'ai comme projet l'étude de la dégradation des protéines par les bactéries. On pensait utilisé Escherichia coli comme bactérie et la bsa(Albumine de sérum bovin) comme protéine. On était partis sur un dosage par la méthode du biuret avec le réactif de Gornall.  [...] Le problème est que l'on ne sait pas du tout quelle quantité de Bsa mettre dans notre gamme étalon. Si quelqu'un a une idée merci de m'aider.   [...]

Méthode ELISA !

J'ai trouvé dans un article que la méthode ELISA est utilisée pour purifier certaines protéines comme la Sérum-albumine-Humain.  [...] Sache tout d'abord qu'il existe plusieurs types de méthode ELISA (sandwich, double sandwich...). la sérum albumine humaine (SAH) a comme toutes les protéines des domaine structurelle spécifique (épitope).  [...]

[Biochimie] déprotéinisation

Pour déprotéiniser des liquides, il y a aussi l'éthanol. Pour ce qui est de sa spécificité quant à la précipitation des protéines, je ne m'avancerais guère.  [...] La méthode de Kjeldahl est utilisée pour le dosage de l'azote total d'un produit biologique (lait, sérum...). Cet azote n'est pas que dans les protéines. http.//stlbioch.apinc.org/documents/...20Kjeldahl.pdf.  [...]

role de la BSA dans la mesure de la concentration des protéines !!

j'ai lu un article et j'ai tombé sur cette phrase qui dit que la concentration des protéines a été mesuré en utlisant la Bovine serum albumin. j'ai pas compris comment ils ont fait. est ce qu'il y a un nom pour cette méthode parcequ'elle n'est pas mentionnée dans la bibliographie.  [...] En fait, cette méthode sert à quantifier des protéines inconnues en utilisant des protéines avec des concentrations connues à l'instar de la BSA. Avec cette derniére, tu crées une certaine plage de concentrations de sorte de pouvoir trouver la concentration de ta protéine inconnue en extrapolant les D.O.  [...]

[Biologie Cellulaire] isolement de l'aquaporine

L'isolement de protéines contenant des canaux aqueux (les aquaporines) a été difficile,Pourquoi cela a-t-il rendu difficile l'isolement des aquaporines.  [...] Ensuite ce sont des protéines relativement petites si je ne m'abuse (environ la moitié de la taille de la sérum-albumine humaine). Or la différence entre peptide et protéine repose justement sur la taille, la sérum-albumine ayant un temps été considérée comme la plus petite protéine - depuis au moins 2009, on a posé la limite à cent acides aminés (~10kDa).  [...]