• Forum - Méthode, Protéine, Anticorps

[Biochimie] Purification de protéine pour ELISA

Mais comme l'anticorps A est utilisé 2 fois, j'ai peur que le conjugué ne se fixe aussi aux Ac A coatés à ma plaque mais sur lesquels ma protéine ne s'est pas fixée, et que du coup j'aie à peu près le même signal partout.  [...] Et dans l'autre sens. un tel enchaînement ne risque-t-il pas d'être difficile à reproduire Ne va-t-il pas me faire perdre trop de protéine pour faire un bon dosage.  [...]

mesure de l'expression d'un gene

Merci pour la réponse, on pourrait peut etre faire dans ce cas des dosages d'expression de la protéine par Western ou par tout autre méthode utilisant des anticorps.  [...] Le seul inconvénient, mais qui est déterminant. il faut posséder une anticorps fiable dirigé contre la protéine d'intérêt.  [...]

[Immunologie] Faire divorcer un couple Ag-Ac

- soit à bousiller les cellules fixées de manière à libérer un fragment protéique couplé aux anticorps primaires et secondaires.  [...] Pour des immunoprécipitations, tu peux peut-être arriver à trouver des conditions analogues à celles que tu recherches pour ta méthode, dans le cas où les auteurs souhaitent récupérer la protéine immunoprécipitée sans son anticorps, et sans la dénaturer c'est encore mieux.  [...]

[Biochimie] sérum et anticorps polyclonaux

j'aimerais quantifier et vérifier la taille de ma protéine favorite dans un ensemble d'échantillons par western blot. Jusque là pas de problème. Malheureusement, aucun anticorps commercial n'existe contre cette protéine et aucun article ne rapporte la réalisation d'un tel anticorps.  [...] Etant donné que je travaille sur des plantes, je me demande si (i) il est vraiment nécessaire de purifier (ou au moins enrichir) mon sérum en anticorps dirigés contre ma protéine chérie et (ii) si vous pouvez me suggérer une méthode facile et pas trop longue (et idéalement ne demandant pas des équipements très onéreux) pour purifier/enrichir mon sérum.  [...]

Méthode ELISA !

J'ai trouvé dans un article que la méthode ELISA est utilisée pour purifier certaines protéines comme la Sérum-albumine-Humain.  [...] Vous pouvez m'expliquer comment cette méthode sera utilisée pour purifier ces protéine en utilisant des anticorps monoclonaux.  [...]

[Biotechnologie] marquage radioactif

Pour ce qui est de la manière de purifier les anticorps, je pense qu'on utilise la méthode de radio-immunoessai, qui est une méthode de dosage d'anticorps, d'antigènes ou d'haptènes.  [...] Dans le cas d'un test d'internalisation de protéine radio-marquées, peut-on ensuite utiliser un western Blot, un test ELISA ou une analyse par spectrométrie de masse pour mesurer et quantifier cette internalisation Quelle est la méthode la plus appropriée.  [...]

Petite énigme à vous soumettre...

C'est là que l'expérimentation RMN peut être intéressante. Prenons la méthode RMN par différence de transfert de saturation (STD-NMR). Cette méthode présente l'avantage de caractériser les intéractions protéine - ligand en transférant la résonnance des protons de la protéine sur les ligands capables de s'y lier.  [...] Attention, la RMN se réalise en solution, si tu veux faire une cartographie des groupements mis en jeu, via les données cristallographiques, tu dois faire référence à la méthode CORCEMA, qui via un algorythme établit une carto ligand-récepteur à partir des données cristallo du complexe protéine-ligand.  [...]

[Immunologie] anticorps leucémie

Comment obtenir des anticorps monoclonaux à partir des anticorps polyclonaux Il y a-t-il une méthode générale pour cela ou bien une méthode spécifique pour la leucémie.  [...] Maintenant par biotechnologie il est possible de produire aussi des anticorps monoclonaux chez les plantes, milieu en plein développement.  [...]

Informations sur ce fameux test vih - Page 3

Mais cette méthode que je viens de décrire est ultra-dangereuse, car elle nécessite de manipuler du VIH sauvage, infectieux, et il faut donc des mesures de sécurité élevé (laboratoire P3) pour faire les tests (très chère). Donc les chercheurs ont rusé. Les anticorps détecte les protéines à la surface du virus, donc on a pas besoin du virus en entier, mais juste de ces protéines.  [...] Et hop, on réduit le choix. Et puis après, en continuant de rechercher (c'st leur boulot en même temps), ils ont découvert qu'un anticorps est commun à toute les personnes infectées, reconnaissant ultra-spécifiquement une protéine virale. Et rehop, on tombe sur le test du VIH (déjà expliqué précédemment).  [...]

[Biologie Cellulaire] Co-Immunoprécipitation

2. Tu rajoutes des billes de sepharose ou d'agarose sur lesquelles sont greffées de la protéine A ou G, qui ont la particularité de fixer les anticorps. Ton complexe Antigene Anticorps est donc capté par les billes. tu as donc.  [...] 6. Tu déposes sur gel et fait un Western Blot. Tu révèles avec un anticorps dirigé contre ta protéine B (alors que l'IP a été faite avec un anticorps contre la protéine A). Si tu as une bande au poids attendu pour B, cela signifie que tu as co immunoprécipité B avec A.  [...]