• Forum - Méthode, Fragment, ADN

[bio mol] Séquencage. RFLP

1/ Dans la méthode de sanger on insert un fragment d'adn mono brin dans un plasmide. dans ce cas la le plasmide est alors monobrin.  [...] A propos du 1/, je crois que tu te trompes... la méthode de Sanger consiste à séquencer un fragment d'ADN, pas à le cloner. Et elle ne comporte pas à ma connaissance d'étape de ligation.  [...]

Phage display et banque d'ADNc

Le phage-display, c'est une méthode de criblage qui permet de selectionner un fragment d'ADN à partir des propriétés d'intéraction de la protéine qu'il code. Par exemple, dans ton cas, tu cherches un cDNA qui code pour un fragment peptidique reconnu par un anticorps spécifique.  [...] Dans le détail, je pense que tu as quand même des phages qui peuvent porter le même ADNc. Je n'ai jamais fait de banque, c'est à confirmer.   [...]

[Biologie Moléculaire] De la PCR à la méthode Sanger

[Biologie Moléculaire] De la PCR à la méthode Sanger.  [...] Après l'amplification d'un brin matrice par PCR, il y aura des produits PCR, pour un séquençage par la méthode de sanger, ces produits pcr doit être purifiés mais lors de la réaction de sanger, comment on évalue la concentration d'ADN, c'est à dire après la PCR on obtient plusieurs fragments d'ADN alors que par la méthode sanger c'est un seul fragment qui sera séquencer à ma connaissance.  [...]

la taq polymérase????

La PCR est utilisée dans des domaines variés. diagnostic des maladies génétiques, détection des infections virales, médecine prédictive et recherche des empreintes génétiques. Elle pourrait servir à copier en de nombreux exemplaires des fragments d'ADN de mammouth congelés vieux de 40 000 ans ou de restes humains de 7500 ans trouvés dans une tourbière, milieu où la décomposition de la matière organique est très lente.  [...] cette méthode, la PCR est également appelée amplification de fragment d'ADN, car elle permet d'obtenir après plusieurs cycles à température variablement hautes, à cause de dénaturation succééssives, un grand nombre de fragments identiques à celui de départ, ce qui revient au résultat d'un clonage avec moins d'inconvénients.  [...]

[Biologie Moléculaire] distribution de la taille de fragment d'ADN pour un échantillon de petite quantité

Je recherche un protocole ou une méthode permettant de visualiser la taille de fragment d'adn pour un extrait d'ADN de très faible concentration (eg. 1pg-1ng).  [...] Oui effectivement le Tm est un indicateur de la taille. Mais mon soucis est que je vais me retrouver avec une population comprenant des tailles de fragments différentes. Et ce que je recherche c'est d'identifier la taille de chacun des fragments, mais également la proportion de chaque groupe de fragment.  [...]

marqueurs de sélection

Aucune méthode de transformation n'est efficace à 100%. La proportion de cellules transformées dépasse en effet rarement 1‰. Pour sélectionner les cellules transformées, le fragment d'ADN utilisé doit contenir un gène conférant à ces cellules un avantage sélectif dans certaines conditions de culture.  [...] - premièrement je ne comprends pas comment le marqueur permet de se rendre compte que le fragment d'ADN qu'onn a voulu inséré dans l'hôte a bel et bien été inseré.  [...]

[Génétique] Plusieur question?

Oui et non. La séquence nucléotidique est un fragment d'ADN, mais dont normalement on connait justement la séquence, on sait donc ce que c'est.  [...] Un fragment d'ADN, c'est un morceau d'ADN et on n'en sait rien de plus.  [...]

[Biologie Moléculaire] Connaitre séquence génomique....

je peux te conseiller le genome walking. C'est une technique qui permet d'analyser des fragments adjacent de proche en proche. La premiere étapes consiste a construire une banque de fragment tagé. Et apres y a une PCR et une nested a faire, avec une amorce spé de ta sequence connu et une amorce spé du tag.  [...] Tu amplifies ton ADNg une premiere fois, puis tu refais une pcr nichee sur ton produit pcr en utilisant l'oligo specifique de ton fragment d'ADN + l'oligo specifique de ton oligo degenere... Je ne sais pas si je suis tres clair... Un labo voisin de mon labo de these utilisait cette methode pour sequencer de l'ADN inconnu.  [...]

[Biologie Moléculaire] [biologie moleculaire] Le code génétique

1. recherche d'homologie -. 2. clonage du fragment d'ADN cense contenir le gene -. 3. analyse de l'expression de ce gene (deletion, expression etc..).  [...] 1. identification d'un phenotype mutant -. 2. recherche par complementation du fragment d'ADN permettant de restaurer le phenotype sauvage -. 3. analyse de ce fragment d'ADN.  [...]

[Biologie Moléculaire] Réplication de l'ADN chez les eucaryotes SOS

Et on est bien d'accord que ce fragment agit à la fois sur le segment après réplication par son action exonucléase 5'3' de réparation et sur lesegment d'après par son activité à la fois polymérase 5'3' (synthétisation) et exonucléase 3'5' (réparation).  [...] L'ADN polymérase a en plus une activité exonucléase 5'-3' (que n'a pas le fragment de klenow). elle lui sert à retirer l'amorce d'ARN quand elle en rencontre une, pour la remplacer par de l'ADN. Mais ce n'est pas une fonction de réparation.  [...]