• Forum - Méthode, ADN, ARN

[Biologie Moléculaire] Extraction acides nucléiques totaux

Je ne voudrais pas dire de bêtises mais il ne me semble pas avoir entendu parler d'une méthode permettant d'extraire l'ADN et les ARN en même temps.  [...] Merci, je reflechi à la méthode phenol clhoroforme. Tu sais à quel étape sont séparés les ADN de l' ARN Est-ce au moment de l'ajout de l'acetate de sodium.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction d'ARN

Bonjour, cette discussion date donc j'espère que quelqu'un lira quand même. J'utilise la méthode au trizol pour extraire mon ADN de cellules lymphocytaires, et je cherche à comprendre exactement de quel manière se déplace l'ADN, l'ARN et les prot à chaque ajout, mais surtout pourquoi (principalement concernant l'ADN et l'ARN puisque ce sont des molécules similaires).  [...] Désolé mais tu te trompes, le trizole ne permet pas de séparer l'ADN de l'ARN. les protéines ne sont pas dans la phase phénolique mais dans l'anneau dont tu parles à l'interphase avec la phase aqueuse qui contien tous les acides nucléiques.  [...]

[Biologie Moléculaire] Amplification d'ARN

La conversion en ADN par transcription inverse, amplification de l'ADN par PCR puis la transcription en ARN est-elle la démarche la plus pratique.  [...] comme le dit gorben, tu n'as pas d'autre solution. d'autant que la transcription in vitro necessitera l'obtention d'une maniere ou d'une autre une copie ADN a transcrire.  [...]

[Biologie Moléculaire] biologie moléculaire

Bonsoir, en biologie moléculaire nous avons étudié l'extraction de l'ADN, l'ARN et des plasmides. Bon l'ADN c'est facile mais l'ARN et les plasmides ça n'est pas très claire, j'ai fait des recherches sur le net mais ça ne m'a pas vraiment aidé,si il y en a parmi vous qui aimerait bien m'expliquer comment se font ces 2 extractions, je leur en serais très TRES reconnaissante.  [...] Tu lyse tes cellules avec un réactif acide contenant de l'isothyocyanate de guanidium et du phénol. On fait une séparation par centrifugation avec du chloroforme ou du bromochloropropane. Tu obtiens une phase aqueuse (ARN), une interface et une phase organique.  [...]

Pourquoi extraire de l'ARN

Je viens de faire un TP dans lequel nous avons extrait de l'arn par la méthode de Chomczynski et Sacchi (guanidine, thiocyanate, phénol, chloroforme). J'aimerais connaitre les applications de cette technique. Existe t-il des techniques plus efficaces que celle-ci D'autre part, est-il parfois plus intéressant d'extraire de l'arn que de l'adn Merci d'avance.  [...] De plus dans les cellules d'organismes sup, travailler sur l'ADNc (a partir de l'ARN donc) permet d'eviter la presence d'introns.  [...]

[Biologie Moléculaire] Construction Banque ADNc

Une ADN polymérase I vient ensuite remplacer l'ARN par de l'ADN, à partir des cassures. Correct Ou bien dans le cas où la RNAse a détruit la quasi totalité comme dit ci-dessus, la Pol I part des amorces vu qu'il n'y a pas de cassures.  [...] Je vous avoue être embrouillé sur la question car on nous a dit que la RNAse agit par à-coups (là où la méthode chimique à la soude est agressive et détruit tout l'ARN d'un coup) et induit une série de cassures dans l'ARN, mais si c'est à la manière du NaOH, une ADN Pol I véritable (donc pas Klenow) ne conviendrait pas. Ou je me trompe.  [...]

Le scénario de l'origine de la vie enfin déterminé ?

These chambers also suggest a radical solution to a heretofore stubborn problem, one with no other obvious resolution. Modern cells without nuclei are grouped into two domains, the Eubacteria and the Archaebacteria. These ancient lineages share the same energy metabolism and the same genetic code, presumably reflecting a single common ancestor.   [...] D'une manière générale, la méthode proposée par Martin & Russell pour distinguer l'ordre chronologique de l'évolution biochimique de l'inerte au vivant, est en tout point similaire à l'idée que l'ARN est plus ancienne que l'ADN parce que la synthèse de cette dernière nécessite la première. Dans le texte.  [...]

[Biologie Moléculaire] purification de ARNm procaryote

je dois faire une etude du transcriptome d'une bacterie,par la methode rna seq,pour creer ma librairie je dois purifier mes ARNm procaryotes des ARNm eucaryotes et autres ARN,ADN,ma question est donc comment isoler mon ARNm procaryote de restes des ARNs(ARNm eucaryotes,ARNr...).  [...] Par la suite, tu cherches à séparer des ARNm procaryotes d'eucaryotes. Ici c'est une autre histoire. Tu pourrais imaginer des méthodes visant à identifier les protéines fixées sur les ARNm. Par exemple, chez les eucaryotes la maturation de l'ARN fait appel à un épissage qui laisse des traces sur l'ARNm.  [...]

Régénération cellulaire

attention aux raccourcis et autres imprécisions. la transcriptase inverse part d'un ARN, pas d'un ARNt. Ensuite ça n'est absolument pas la seule méthode pour faire rentrer un bout d'ADN dans une cellule, heureusement.  [...] donc le fait d'injecter un gène doit rester une méthode peu utilisable pour les cicatrices et autres réparations de membres... pendant quelques dizaines d'années minimum je pense.  [...]

Expériences en génétique…

Pour faire rentrer le gène on peut utiliser une méthode assez simple qui est un choc de temperature. On place les bactéries dans un millieu tres froid. On ajoute l'ADN, on les place ensuite dans un milieu chaud un tres court instant et ensuite de nouveau au froid.  [...] Et la je ne suis pas vraiment d'accord. en general pour trouver un gene specifique, on utilise plutot une sonde radioactive (adn (ou arn) complementaire du gene à identifier, marqué radioactivement, par exemple, au phosphore 32). Pour cette methode, il faut denaturer l'adn apres la migration, en general, par la soude.  [...]