• Forum - Mesure, Quantité, Protéines, Rendement

[Biochimie] facteur de purification et rendement

En fait Berzelius à raison de ce poser des questions car sans une mesure autre que la quantité de protéines dans la fraction après purification il sera difficile de calculer le rendement ou l`enrichissement. En fait il manquerait soit une mesure de l`activité totale, spécifique ou enzymatique.  [...] .. la quantité de protéine que vous avez obtenu dans la deuxième fraction peut avoir n`importe quel ratio pyruvate kinase/protéines sans mentionner une différence aussi entre pyruvate kinase actives/protéines dans le cas spécifique de l`unité U.  [...]

[Biotechnologie] Tableau de purification

Je voudrais savoir comment calculer un rendement à partir des informations livrées par le tableau (protéines en mg, activité totale/spécifique, facteur de purification, etc...). En fait je pensais qu'il dépendait uniquement de la quantité de matériel utilisée (qu'on ne connait pas) mais dans certains exercices, il est demandé de le calculer alors.  [...] Autre question. c'est juste pour avoir confirmation. l'activité spécifique correspond au rapport de l'activité totale sur de la quantité de protéines.  [...]

[Biochimie] [TP Séparation de molécules par chromatographie d'exclusion sur colonne] Niveau L1S1

Du coup je dois trouver la quantité de matière (en mol) initiale c'est ça Parce que pour trouver la quantité de protéines dans 1mg de cytochrome c.  [...] Eh bien puisque tu as les mg tu peux déterminer la quantité de matière (un rendement avec la masse ne sert à rien je te l'assure ^^). Après si tu as plus que prévu c'est peut parce que tu as récupéré un autre produit (le cytochrome c doit être élué en second non donc entre deux autres produit) tout est possible erreurs de manipulation ect.  [...]

Vaccin hépatite B - Page 4

2- Optimisation du rendement. c'est en g/l la quantité de protéine fabriquée par litre de fermenteur et par cycle de fabrication (un bioréacteur de 20 000 l peut réaliser 20 cycles/an).  [...] Ces rendements sont souvent de l'ordre de 1,5 à 2 g/l. les meilleurs espoirs s'orientent vers 5 g/l. On dit souvent qu'un bioréacteur de 20 000 l produit assez de protéines pour assurer $ 400 millions de chiffre d'affaires par an, dans le cas d'un monoclonal (le prix de revient d'une telle production est de l'ordre de $ 50 à 60 millions).  [...]

[biochimie] agrégation protéine à 320nm

La fluorescence intrinsèque des protéines est due aux résidus tryptophane et tyrosine. La grand majorité des études est faite avec les tryptophanes, puisque la tyrosine a un rendement quantique de fluorescence plus faible, et souvent elle transfert son énergie aux tryptophanes.  [...] Generalement, les aggrégats se forment suite à des défauts de repliement de protéines qui, au lieu d' enfouir leurs résidus hydrophobes, les exhibent à leur surface, créant l'aggrégation par interactions hydrophobes. Autant que je sache, ces agrégats sont, généralement, détruit par la cellule qui les stock dans des agrésomes.  [...]

[Biologie Moléculaire] Expression hétérologue de protéine : vecteur baculoviral

Un possiblité en revanche est que tes protéines soient toxiques pour tes bactéries. Du coup seules celles qui expriment faiblement la produisent, les autres meurent. Dans ce cas le rendement est moisi. Une autre possibilité est que tes bactéries rejetent ta protéine dans des corps d'inclusions.  [...] Un possiblité en revanche est que tes protéines soient toxiques pour tes bactéries. Du coup seules celles qui expriment faiblement la produisent, les autres meurent. Dans ce cas le rendement est moisi.  [...]

calcul d'une quantité d'ADN- PCR

Dans un échantillon de 1 microg d'ADN, on a 1pg de fragment à amplifier. Quelle quantité d'ADN amplifié obtiendra-t-on après 30 cycles de PCR, en admettant un rendement de 10puisssance 6.  [...] Du coup pour obtenir la quantité d'ADN à la fin du protocole d'amplification, il suffirait de multiplier par le rendement. On obtient ainsi 1 µg du fragment choisi amplifié dans le mélange final.  [...]

[Immunologie] Immunoprecpitation: liaison de la resine protG avec l'anticorps qui marche pas

Bonjour tous le monde. Je suis entrain de faire la mise au point d'une IP. pour se faire j'ai voulu juste tester le rendement de la résine protG avec l'anticorps sans rajouter la protéine d'intérêt. la résine ne capte même pas le 1/10 de la quantité de l'anticorps de départ qui est de 1µg dans 500µl de PBS avec 50µl de la résine.  [...] Je laisse la résine en contacte avec l'anticorps toute la nuit puis après je lave 3 fois avec du PBS et j'élue finalement dans 50µl de glycine 2.5.   [...]

[Biologie Moléculaire] Petites questions autour de l'extraction d'ADN plasmidique !

On nous fait ensuite calculer la pureté de notre adn... On nous rappelle que si le rapport est. 2 alors c'est qu'il reste trop de solvant... Et si il est. 1.8 c'est qu'il y a des protéines.  [...] Tes calculs pourront etre utilisés pour déterminer la quantité d'ADN a utiliser dans tes manip, et expliquer leur rendement.  [...]

[Biochimie] Chromatgraphie d'exclusion

Pour les quantités déposés, a priori c'est les quantités théoriques, parce que ce que tu as récupéré à la fin en correspond certainement pas a la totalité de ton dépot ( tout n'est pas retenu la première fois ).  [...] Mieux encore, je suis presque sur qu'on te demande des calculs de rendement, auquel cas j'espère que tu as une quantité déposée supérieure a celle récupérée.  [...]