• Forum - Membrane, Protéine, Solution

[Biochimie] dot plot et overlay

Dans le but d'étudier les interactions entre 2 protéines, je voudrais faire un dot plot pour immobiliser ma première protéine sur la membrane de nitrocellulose, par la suite je voudrais faire un overlay ou j'incube ma membrane de nitrocellulose dans la solution de la deuxième protéine et je révèle les interactions par l'anticorps de la deuxième protéine.  [...] Si tu es riche en matériel, tu peux commencer par faire des tests par toi même, par exemple en faisant une gamme de quantité a déposer, puis une gamme de concentration de ta solution de protéine, sans oublier les contrôles adéquats.  [...]

Solubilité des protéines et role d'un acide biliaire

Ca a quelque chose a voir avec le fait que les détergent détruisent les membranes biologiques Car dans ce cas l'utilisation de détergent permet de séparer la protéine de la membrane dans laquelle elle se trouve pour la mettre en solution.  [...] En fait, l'ajout de détergents non dénaturants à une membrane biologique en solution provoque l'insertion de molécules de détergents (amphiphiles) dans la membrane, et le départ de constituants membranaires, qui s'assemblent en micelles (phospholipides + détergents), jusquà un équilibre membrane saturée en détergent - micelles saturés en phospholipides ou protéines.  [...]

additifs pour la cristallisation des proteines membranaires

En effet on utilise des détergents pour extraire la protéine membranaire, car ils solubilisent la membrane et rend la protéine soluble en protègeant la ceinture hydrophobe de la protéine (les détergents sont chimiquement très proches des lipides), et il y en a de toutes sortes.  [...] Oui effectivement, la GlpG est une proteine membranaire, son extraction de la membrane necessite un détergent, et dans l'article on parle de la solution tampon Hepes, NaCl, Glycerol,... je pense que c'est le detergent en question si on se réfère à http.//biochimiedesproteines.espacew...oke.ca/5d.html.  [...]

[Biologie Moléculaire] Technique du Western Blot

C'est pour ca que pour bloquer la membrane on utilise une solution très riche en protéine (BSA, ou tout simplement du lait dilué dans ton tampon de marquage).  [...] Le blocage des sites de fixation non spécifique des anticorps aux protéines que tu as transféré sur la membrane peut aussi se faire si nécessaire mais c'est différent.  [...]

[Biologie Cellulaire] Protéines

a part ce qui a été dit je vois un début d'autre solution qui consiste à essayer de repérer un peptide signal. Certain de ces peptides signaux interviennent lors de la synthèse de la protéine et d'après leur environnement proche (charge et/ou hydrophobicité) on peut avoir une idée de l'orientation dans la membrane.  [...] Le plus simple, mais il y aura à mon avis toujours des exceptions (vivant oblige), c'est de caracteriser qu'une proteine est membranaire ou transmembranaire (et donc pas libres) selon la caracterisation des zones hydrophiles et hydrophobes une fois repliée en 3D (ce qui est loin d'être évident à faire manuellement).  [...]

western-blot

tu peux couper ton gel en deux. Une partie de ton gel va être colorée au bleu de Coomassie et l'autre partie va être transférée sur membrane. tu peux grâce à la coloration au bleu déterminer si tu as déposé une quantité équivalente de protéines sur gel.  [...] L'autre solution est d'hybrider ta membrane avec un second anticorps. qui va reconnaitre une protéine témoin (style l'actine si bien sur la taille de ta protéine témoin n'est pas la même que celle de ta protéine d'intérêt).  [...]

[Biologie Cellulaire] Qui à déjà utilisé le système SNAP i.d. de Millipore pour ses Western Blot?

En fait apparement c'est un systéme qui optimise le contact entre l'anticorps et la proteine, en faisant passer la solution d'AC à travers la membrane.  [...] Je ne le ferais peut etre pas pour un western dans une optique de quantification, ou avec des Ac dont le titre est tres faible ou des proteines tres faiblements produite.  [...]

[Biochimie] Quantite de proteine dans les membranes.

Aussi on remarque aussi que la quantité de protéine de la membrane des organites d'une cellule est plus élevée que dans sur sa membrane plasmique.  [...] Dernière question pourquoi il y a plus de molécule de lipide que de protéine au niveau de la membrane plasmiqueIl y a une seule molécule de protéine pour cinquante de lipide.  [...]

[Biologie Cellulaire] orientation dans la membrane d'une proteine transmembranaire

je dois orienter une proteine transmembranaire par rapport a la membrane. au niveau du RE, le peptide signal a été clivé, si je deroule la proteine il y a 3 domaine hydrophobe de 20 acide aminé.  [...] T'as pas plus d'infos Ta protéine est pas glycosylée sur la thréonine dont tu parles Parce que thréonine + RE... ça sent les glycosylations.  [...]

protéine extrinsèque

une protéine extrinsèque, je me souviens de cette planche dans le module de bio-cell elle stipulait que ces protéine sont à la surface externe de la membrane cellulaire leur rôle est de provoquer la reconnaissance du type cellulaire par un agent de sécurité qui peut être un macrophage, un lymphocyte T ou B ou autre cellule immunitaire.  [...] Une protéine extrinsèque est une protéine qui intéragit faiblement avec la membrane (liaisons faibles, une liaison covalente avec un lipide,...), contrairement aux protéines transmembranaires ou intrinsèques qui sont insérées dans la membrane.  [...]