• Forum - Marque, Antigène, Anticorps, Couple

[Biochimie] Ihc

pouvez-vous m'expliquer ce qu'est un bruit de fond en IHC et l'effet fond noir, s'il vous plaît. on dit que lorsqu'on marque un antigène avec un anticorps couplé à un fluorochrome, il y a peu de bruit de fond, mais qu'il peut y avoir un effet fond noir au microscope. De plus à quoi est dû ce bruit de fond.  [...] Il me reste maintenant à comprendre ce qu'on veut dire par fond noir.   [...]

Marquage anticorps secondaire

j'ai pas compris la difference entre la methode directe et indirecte et surtout l'objectif de notre experience est d'identifier le complexe anticorps-antigéne par contre dans l'extrait que j'ai copié il nous parle sur le couple marqueur anticorps.. à quoi sert ce couple anticorps marqueur.  [...] Le principe à retenir est qu'on marque un anticorps avec une molécule détectable. un fluorophore, une enzyme possèdant une activité visible et/ou mesurable. Soit cet anticorps reconnait directement l'antigène, c'est la méthode directe, soit l'anticorps reconnait un autre anticorps qui quant à lui reconnait l'antigène, c'est la méthode indirecte.  [...]

[Microbiologie] Elisa

Salut, il existe plusieurs types de test par ELISA,soit plus précis...Sinon,ça marche sur le principe d'anticorps ou antigènes marqués.  [...] Le test ELISA classique consiste à déposer des anticorps dans le fond d'un puits, tu ajoutes l'antigène (qui est complémentaire de ton anticorps préalablement fixé), tu laves (pour éliminer les antigènes non fixés), ensuite tu ajoutes un second anticorps couplé à une enzyme et complémentaire à ton antigène, qui en présence d'un substrat va colorer ton milieu, après il suffit de mesurer l'intensité lumineuse émise.  [...]

[Immunologie] Marquage immunofluorescence

pour moi ce n'est pas obligatoire dès le moment ou on a des anticorps et des anti anti corps marqués. Le problème c'est ya t'il des anti anti corps de meme espece Il faut ptetre que les anti anti corps soient d'une espece différente.  [...] le seul cas où tu peux utiliser 2 anticorps primaires de la meme espece, c'est quand l'un des 2 est directement couplé (fluorochrome ou biotine). Dans ce cas ca marche, à condition de respecter un ordre précis. primaire non marqué, secondaire, saturation, primaire couplé.  [...]

[Génétique] Anticorps = nouvelle protéine; comment?

Seuls les anticorps ainsi formés qui ne reconnaissent pas le soi passeront le filtre de sélection et seront libérés dans le sang. C'est donc l'oeuvre du couple hasard / sélection qui crée cette diversité.  [...] Les plasmocytes formés par la différenciation sécrètent des anticorps (càd des immunoglobulines sécrétées) Ces anticorps ont la même spécificité que l'immunoglobuline qui a induit l'activation des LB.  [...]

[Immunologie] Protocole ELISA

La détection des anticorps se fait par test ELISA. Le sang des poissons est récupéré par la veine caudale et mis à coaguler une nuit à 4°C. Le sérum est ensuite récupéré et dilué. Les antigènes proviennent des parasites. L'anticorps de détection est une immunoglobuline anti-loup obtenue en injectant des antigènes de loup dans un lapin.  [...] De la même façon, l'anticorps secondaire est une immunoglobine anti-lapin obtenue en injectant des antigènes de lapin dans une chèvre (anticorps disponibles dans le commerce). Cet anticorps secondaire est couplé à une enzyme peroxydas e obtenue chez le radis ou le raifort. test elisa.png.  [...]

[Immunologie] Différenciation plasmocytaire

Ces cellules sont productrices d'anticorps, et elles sont le stade final de différenciation des lymphocytes B. A la différence d'autres Lymphocytes B, qui présentent leurs anticorps au niveau de leur surface membranaire, les plasmocytes sont capables de produire des anticorps solubles.  [...] A mon avis le marquage avec les anticorps ne pose généralement pas de problème. Tu peux soit utiliser un secondaire couplé à un fluorochrome, soit un secondaire couplé à la peroxydase que tu colores par réaction chimique(grâce à la diaminobenzidine(DAB) et l'eau oxygénée à 3 %).  [...]

Marquage de l'ADN in vivo

Je m'intéresse à cette méthode pour différents types de manips. déterminer l'importance de la spermatogénèse (technique permettant de doser l'importance des divisions cellulaires), et aussi pouvoir différencier les spermatozoïdes de deux individus (un marqué, l'autre non).  [...] Pour avoir déjà réalisé des marquages au BrdU, je peux te dire que le marquage avec les anticorps ne pose généralement pas de problème. Tu peux soit utiliser un secondaire couplé à un fluorochrome, soit un secondaire couplé à la peroxydase que tu colores par réaction chimique.  [...]

[Immunologie] Immuno-précipitation ou immuno-agglutination ?????

L'immuno-précipitation c'est récupérer l'antigéne spécifique (et éventuellement tout se qui est collé a lui) de l'anticorp utilisé via une centrifugation ( culot ) ou grace à un aimant si l'anticorp et couplé à une bille magnétique.  [...] L'immunoagglutination c'est le fait de former un réseaux tridimentionnelle entre l'antigéne et son anticorp spécifique. Tout les antigénes et les anticorps du milieux forme des liaisons plus ou moins faible se qui abouti a une ultra structure plus ou moins stable.  [...]

schéma moléculaire

je prends pour exemple un anticorps représenté par un Y couplé à un marqueur fluorescent représenté lui par un rond à la base.  [...] dans le cas de molécules simples, l'eau peut être représentée par une tête de Mickey avec des ronds de 2 couleurs différentes correspondant aux molécules d'hydrogène et d'oxygène.   [...]