• Forum - Marquage, Cellules, Lecture, Technique

[Biologie Cellulaire] MTT et Cristal violet

Quels mécanismes sont à l'origine de la coloration Interactions du colorant avec un élément précis de la cellule, métabolisation du composé en dérivé coloré, etc... Du coup, il peut y avoir dans certains cas un marquage de toutes les cellules, et dans d'autres cas un marquage uniquement dans les cellules métaboliquement actives Quel temps de manip pour chaque Depuis la préparation jusqu'à la lecture y'a t'il une technique plus longue que l'autre La lecture en question, comment se fait-elle.  [...] même technique ou non Sensibilité de chacune des deux méthodes Y'a t-il dans un cas, ou les deux, une utilisation de substances à risques Le coût de chaque technique.  [...]

Cellules souches

Je me souviens qu'une technique au FACS permet de les différencier parmi d'autres cellules. Un marquage de type Hoest le permettait. Je vais voir si j'ai le temps de rechercher l'information =).  [...] Depuis peu, les cellules souches caractérisées par le marqueur antigénique CD34, peuvent être sélectionnées positivement par un anticorps monoclonal anti CD34 en utilisant une technique dimmunoabsorption biotine avidine.  [...]

[Biochimie] Analyse cycle celluaire cytometrie de flux sur l'automate cyan

Bonjour à tous et à toutes, je suis nouvelle sur ce forum et j'espère que je trouverais des âmes bien veillantes pour m'aider avec ce petit soucis.   [...] J'ai réalisé lors de mon stage plusiurs manipulations de marquage avec Ac fluorescent pour la technique de cytométrie de flux.Seulement j'ai également effectué à la fin de mon stage un cycle cellulaire sur des cellules en utilisant comme intercalant ADN le vybrant violet.  [...]

[Biologie Moléculaire] marquage des cellules par Idu et BR dU

Bonjour, je suis en premiere annee de master biologie sante et je voudrais avoir des renseignements concernants le marquage immunologique des cellules par le I dU et le Br dU... merci pour vos renseignements... bonne soiree.  [...] j'aurais souhaiter avoir des renseignements sur la technique qui consiste a marquer les cellules avec Idu et BrDU... quels sont les etapes de ce marquage, de quel façon il s'effectue, sur quel type de cellule specifiquement,quel est le but d'utiliser IDU et BR dU.  [...]

[Biochimie] Marquage cycle cellulaire et FACS

Je m'interroge egalement sur l'analyse au FACS en elle-meme, j'ai l'habitude d'utiliser le FACS pour l'analyse de cellules GFP ou marquees avec des anticorps PE. APC, PERCP, ou FITC.  [...] il ya des réglages particuliers à faire. Le marquage lui meme est un peu particulier (fixation/perméabilisation à l'ethanol notamment). La lecture se fait en utilisant FL2A, H et W. Tu peux me demander le protocole par MP si tu veux. Enfin, tes cellules seront marquées ne t'inquiète pas.  [...]

Un peu de biologie cellulaire...

Le hasard des evenements fait parfois bien les choses puisque ce matin, je suis alle a un seminaire a propos d'une technique de microscopie encore experimentale (CARS microscopy. Coherent Anti-Stokes Raman Scattering microscopy) qui consiste a essayer d'identifier les composants cellulaires sur cellule vivante sans aucun marquage (ou presque) en utilisant le spectre Raman caracteristique de chaque substance.  [...] Le hasard des evenements fait parfois bien les choses puisque ce matin, je suis alle a un seminaire a propos d'une technique de microscopie encore experimentale (CARS microscopy. Coherent Anti-Stokes Raman Scattering microscopy) qui consiste a essayer d'identifier les composants cellulaires sur cellule vivante sans aucun marquage (ou presque) en utilisant le spectre Raman caracteristique de chaque substance. Le modele utilise. le macrophage.  [...]

[Biologie Moléculaire] Marqueur spéficique apoptose

Le marquage Annexin V en FACS cible l'apotpose. Le problème est qu'après l'apoptose il y a ce qu'on appelle la nécrose post-apoptotique, mais qui se différencie tout de même de la nécrose simple qui elle n'est pas marquée par l'annexin V. On fait toujours un double marquage Annexin V / PI (iodure de propidium), ainsi on peut discriminer 3 types de cellules.  [...] Ben justement, c'est pour ça qu'on fait un double marquage. L'annexine-5 va marquer plus ou moins toutes les cellules mortes, et le deuxième marquage à l'iodure de propidium ne va marquer que les cellules en nécrose. Vu que l'IP est un intercalaire, il ne pourra marquer que les nécrosées, puisque l'ADN des cellules apoptotiques est dégradé.  [...]

[Biologie Cellulaire] Cycle cellulaire

Il y'a une chose que je ne comprends pas.. l'iodure de propidium je crois ne passe pas la membrane plasmique..c'est pourquoi on utilise le double marquage iodure de propidium + annexine V-flurochrome pour détecter l'apoptose en cytométrie de flux. LEs cellules iodure de propidium négative et annexine V positive sont en apoptose, celle en nécrose sont iodure de propidium + et annexine V -, la membrane plasmique étant lésée l'iodure pénetre dans la cellules et intercale l'adn.  [...] Pour le marquage à l'iodure de propidium, dans le cas d'une étude du cycle cellulaire, on fait une fixation dans l'éthanol à 70% ce qui fait office de perméabilisation pour la pénétration de l'iodure de propidium dans la cellule. Dans le cas d'une étude de l'apoptose avec co-marquage à l'annexin V, on ne fai pas cette fixation à l'éthanol, on met directement les cellules en présence d'iodure de propidium, de RNase A (pour augmenter la proportion d'iodure de propidium se fixant à l'ADN) et l'Annexin V.  [...]

[Biologie Cellulaire] La cellule mystère....

Le principe est le même que dans les autres topics. le but est d'analyser les images présentées en d'identifiant le type cellulaire, la technique de microscopie employée, les fluorophores ou le marquage utilisé lors de la prise, si les cellules sont fixées ou vivantes (lorsque l'on peut le voir) et éventuellement en expliquant brièvement le phénomène biologique visualisé.  [...] Mais pour les autres c'est pas parce que Morphine a trouvé qu'il faut abandonner hein Maintenant il faut chercher les marquages, la technique microscopique, etc.  [...]

[Biologie Cellulaire] Microscope fond rouge?

Pour moi l'image E et F sont des témoins, elles montrent que les cellules sont présentes et on en conclu que le marquage est bien spécifique. Les images ont été prises à la lumière blanche contrairement aux images A, B, C et D où les cellules ont été excitées à une certaine longueur d'onde.  [...] Ensuite avec une lumière excitatrice on vient révéler le marquage des cellules (images A, B, C et D). Sans ces témoins, on pourrait se dire qu'il y a aucune cellule sur l'image A or c'est faux, ce qui montre bien la spécificité du marquage et des résultats obtenus.  [...]