• Forum - Manipulation, Cellules, Labo

la chimiothérapie

Nous avons eu l'idée d'appliquer une molécule composante de la chimiothérapie (ou une bactérie ressemblant) sur une cellule cancéreuse et sur une cellule saine. Le problème est que nous avons aucune idée des composants de la chimiothérapie ni comment avoir une cellule cancéreuse a observer.  [...] La manipulation des cellules cancéreuses se fait dans un labo de niveau P2 normalement, donc dans un lycée je doute que vous soyez autorisé à en manipuler. Je n'ai pas d'idée accessible à un projet lycéen, sinon montrer la toxicité d'un agent chimiothérapeutique sur des cellules saines immortalisées par exemple comme les COS-7 ou les HEK293, ou des cultures primaires.  [...]

Muc1

au final,, en considerant que toute mes manipulations sont possibles,, il me faut que je teste l'adhesion des cellules CHO-K1 entre elle par rapport au taux de MUC1,,, et des Cellules normales entre elles par rapport au taux de MUC1,,, et également entre les cellules CHO-K1 et les cellules normales.  [...] on m'a pas preciser le budget,,,, et je n'ai que 50h dans le labo pour faire mes manipulations,,,,, j'ai dans les 1 mois et demi pour préparer théoriquement mes manipulations,,et mes protocoles,,, et c'est vraie que la pluparts des methodes utilisée sont Nouvelles pour moi,,, je sais que ça parrait irréalisable,, dailleurs j'ai des doutes a propos de mon projet,, c'est pour cela que je vous demande de l'aide,,, afin de changer un petit peu l'idée des manipulation,, j'ai une autre idée plus basique en tete,,, qui serais de travailler sur des cellules épitheliales et des Escherichia Coli,,, toujours au niveau de MUC1,,, je n'aurais pas besoin de faire les transfections,,, et je pense que j'aurais le tps de voir un petit peu l'adhesion de ces cellules par rapport a MUC1.  [...]

Différence SVF décomplémenté/SVFi

actuellement technicien de laboratoire dans un laboratoire de développement de vaccins je suis amené à travailler sur des cellules et les mettre en présence de virus. J'ai été désigné pour mettre en avant une détérioration de profils d'une manipulation (Séroneutralisation) au cours du temps.  [...] Quel est véritablement la différence qu'il existe entre du SVF décomplémenté et du SVFi Peut il y avoir une conséquence sur le comportement de cellules vis-à-vis de virus.  [...]

[Biochimie] Problème de migration de gel

Est ce que ca ne pourrait pas être du à la manipulation des échantillons Méthode d'extraction, dégradation (température du labo ), contamination Avez vous essayé avec des échantillons standards, ou provenant d'autre labos.  [...] En fait on remarque surtout que la réduction empêche les traînées protéiques et les transforment en bandes bien définies, l'alkylation permet d'affiner cette résolution (mais je n'ai pas retrouvé d'image vraiment en rapport) mais elle est d'abord faite pour ne pas avoir a re-réduire les échantillons que l'on conserve pour une utilisation ultérieure.   [...]

Virus et carottage dans les poles

Par exemple lors de l'extraction d'une carotte, est ce que cela se fait sous atmosphère contrôlée ou non Leur manipulation est elle aussi méticuleuse que dans un labo P4, leur acheminement etc.  [...] Tu trouveras, sur ce site, des détails sur les extractions du lac Vostok, un forage des plus intéressant en paléoclimatologie. Les chambres dans lesquelles ont entasse les carottes sont, en moyenne, à une température de -23 celsius. Pour les labo p4 on repassera, mais il est vrai qu'un minimum de sécurité, de rigueur dans les manipulations est requise pour éviter la contamination des échantillons.  [...]

BET/GelRed et Gestion des déchets

La ou je suis en Angleterre on vide les liquides contenant du BET dans les lavabos et les gels dans la poubelle biologique... Les gens utilisent quand même des gants en nitrile pour manipuler le BET mais bon ça change pas mal par rapport a mon labo de M2 ou c'était largement plus strict qu'ici.  [...] Nous avions pris cette habitude dans mon labo, quelque soit la marque on estimait nitrile = manipulation du BET, mais au final un fournisseur nous a envoyé une liste d'essais et ils n'étaient en fait pas résistant à ça.  [...]

[Biochimie] [Biologie moléculaire] commande de primers

je mets au point une manipulation de PCR au labo de mon école et j'ai régulièrement besoin de commander des primers. Le problème est qu'en passant par l'école ça met du temps et il faut à chaque fois justifier pour l 'administration, etc.  [...] J'ai donc voulu commander et payer les primers moi-même, en tant que particulier, mais chez tous les fournisseurs que j'ai contactés on me répond qu'il leur est impossible de fournir aux particuliers.   [...]

[Biologie Moléculaire] Plasmide

Normalement oui tu mettre des plasmides dans des cellules eucaryotes puisque quand j'étais en stage on avait transplanté des plasmide à l'intérieur de cellules cancéreuse. Il s'uffit de faire une électroporation ou autre manipulation du genre pour qu'il soit intégré.  [...] la transfection de cellules eucaryotes est possible. Par lipofection, éléctro, microbalistique etc...Par contre contrairement au bactérie va se poser le problème de réplication. Car le plasmide n'est pas au réplicome dans les cellules eucaryotes supérieur.  [...]

[Biologie Cellulaire] poly-ADP-ribosylation de protéines

j'étudie les modifications post-traductionnelles d'une protéine exprimée dans les cellules HeLa. Je n'ai pas vu de phosphorylation de la protéine immunoprécipitatée. Je voudrais voir maintenant si elle est poly-ADP-Ribosylée mais je ne dispose pas d'anticorps anti-PAR.  [...] Merci pour ta réponse. C'est sans doute une bonne idée mais notre labo n'est pas habilité pour la manipulation de radioactivité. Est ce qu'en inhibant les PARP, je peux induire un changement de poids moléculaire de ma protéine Ce serait déjà une indication.  [...]

[Biochimie] Différence entre les LPS et utilisation

Je me pose depuis quelques temps la question suivante. J'ai fais deux manipulation en culture cellulaire sur des cellules différentes (CACO2 et CCD18). Mais sur ces deux cellules, j'ai mis deux types de LPS différents. un était le O155.B5 et l'autre le O111.  [...] B4. Pour le O j'ai vu ce qui était différent mais à quoi correspond le B et pourquoi prendre deux LPS différents.   [...]