• Forum - Longueur, Concentration, Protéines, échantillon

[Biochimie] Question protéine

Pour moi les notions de valeur biologique des protéines et de grandeur d'une absorption n'ont aucun sens. Ni l'une ni l'autre. Je ne comprends donc même pas comment vous avez pu répondre à votre première question.  [...] L'absorbance mesurée par spectrophotométrie à la longueur d'onde adéquat permet de déterminer la concentration de protéines dans un échantillon donnée.  [...]

[Biochimie] Spectrophotomètrie : Les différentes technologies...

spectrophotometre. il émet sur une plage de longueurs d'ondes (ou sur une LO spécifique) et détermine l'absorbance de l'échantillon en fonction de la longueur d'onde. Tu obtiens un spectre d'absorption de ton échantillon. renseigne sur la pureté, la concentration d'une substance.  [...] la longueur d'onde d'émission). Cela permet de quantifier un échantillon capable d'émettre en fluorescence. EX. tu veux quantifier une protéine genre GFP. Tu programmes ton fluo pour qu'il excite a 488nm et tu mesures les photons émis en fluorescence par la GFP a 505nm, proportionnels à la quantité de GFP.  [...]

calcul de concentration

je souhaiterai savoir comment calculer la concentration en protéine (mitochondries) à partir d'une courbe étalon avec la BSA.  [...] une courbe-étalon c'est l'absorbance en fonction de la concentration. Donc tu mesures l'absorbance de ta solution de protéine et tu détermines la concentration en reportant ta valeur sur la courbe-étalon. Donc tu la détermines graphiquement. Mais attention de faire ta mesure d'absorbance à la même longueur d'onde que ta courbe-étalon a été déterminée.  [...]

spectrophotométrie

Donc, si tu sais que ton échantillon est de la protéine pure, et que tu a le coeficient d'absorption des protéines à 280nm tu en déduis la concentration de ton échantillon en protéines (enfin, l'ordinateur la calcule pour toi, en l'occurence).  [...] Attention si tu as dans ton échantillon des produits qui absorbent aussi la lumière à 280 nm ta mesure en sera faussée, tu sur-estimera la concentration, car le spectrophotomètre ne différencie pas les produits entre eux, c'est juste une mesure globale.  [...]

adn et arn

formule qui permet à partir de la densité optique de trouver la quantité d adn ou d arn dans un tube. merci de me donner une idee que je vais suivre.   [...] Pour connaitre ta concentration d'ADN, la longueur d'onde du spectrophotomètre doit réglé à 260 nm.  [...]

[Biologie Moléculaire] Dosage methtrexate au spectrophotometre

[Biologie Moléculaire] Dosage methtrexate au spectrophotometre.   [...] A quelle longueur d'onde et jusqu'a quelle concentration molaire.  [...]

[Biologie Moléculaire] structure des protéines

En fait les anti-corps se fixent sur les protéines et après centrifugation on peut extraire les protéines. C'est bien ça l'utilité de l'immunoprécipitation.  [...] Le Sds est un détergent ionique qui donne aux polypeptides une charge négative uniforme par unité de longueur. Les charges propres de la protéines n'interviennent alors plus. La charge de l'ensemble molécule dénaturée/SDS (et donc sa vitesse de migration) dépend alors uniquement de la longueur de la chaine protéique.  [...]

[Biologie Moléculaire] Séquençage et métabarcoding

Soit il y a une seule plante dans l'échantillon. après amplification par PCR, vient le séquençage. J'ai vu qu'il existait plusieurs types de séquençage. pyroséquençage, séquençage par synthèse,... qui diffèrent par le nombre de fragments obtenus, la longueur des fragments, le taux d'erreur, le coût d'analyse par séquence.  [...] Cela signifie que, en ne connaissant pas notre échantillon, les amorces vont quand même matcher (puisqu'universelle) et permettre une amplification. Le but étant de séquencer la zone d'intérêt (avec les même amorces). L'identification de l'espèce se fait après le séquençage, non pas selon la longueur du fragment amplifié, mais bien selon sa séquence.  [...]

[Biochimie] enzymologie

J'ai fait les manip pour déterminer les paramètres cinétiques de l'enzyme. J'ai réussi à déterminer le Km et Vm, mais j'ai Vm en delta DO par minute et il me la faudrait en micromoles par seconde.   [...] d'où avec l'absorbance (ou DO), la concentration la longueur de la cuve et le coeff. d'extinction molaire (à chercher pour ton espèce chimique).  [...]

[Biologie Cellulaire] Centriole, Actine...

Et concernant l'actine, j'aimerais juste savoir si la taille des microfilament est directement propartionnel à la concentration de protéines d'actine, ou alors si il y'a d'autre protéines qui interviennent dans la polymérisation/dépolymérisation des microfilament, comme pour les microtubules.  [...] La concentration en actine est importante pour déterminer si il peut y avoir polymérisation, mais ce n'est pas le seul facteur, il y a beaucoup de protéines liant l'actine qui vont contribuer à stabiliser les filaments (en se fixant à leur extrémité surtout) ou à les déstabiliser.  [...]