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[Biologie Moléculaire] Extraction ARN bactéries lactiques

On utilise ca pour extraire les ARN totaux de cerveaux de souris et de nos cultures cellulaires (=. et donc pourquoi pas bactéries..).  [...] Le problème principal venait de la quantité initiale de cellules. au lieu de partir de 1 ou 2 ml de culture comme recommandé, je suis parti de 4 à 8 ml de culture en milieu de phase exponentielle de croissance.  [...]

[Biologie Cellulaire] Cytomètre de flux

Est-il possible de déterminer un nombre de cellules sur un tissu au lieu d'un culture cellulaire Si oui, comment se passe la séparation des cellules sur le tissu Le cytomètre peut le faire et existe-t-il une masse minimum ou doit on au préalable les séparer.  [...] Oué j'y ai pensé mais sur un tissu cylindrique c'est assez dur, car faut faire plusieurs coupes... je pensais qu'avec le cytomètre cela aurait été plus simple.   [...]

Mitose, culture in vitro...

J'ai pensé a quelque chose. Au lieu de mettre en culture des cellules indéiffréentiées, et de les faire agir d'une certaine facon avec de certaines hormones, ne peut-on pas tout simplement cloner directement les cellules que l'on veut.  [...] Ton idée n'est pas bête mais malheuresement si tu mets une cellule différencié en culture, elle ne pourra donner que des cellules indifférenciées qui donneront un cal. En effet, dans ta ou tes cellules différenciées, tu n'auras plus production des métabolites nécessaires à la formation de l'organe souhaité (hormones.  [...]

[Biologie Cellulaire] ultracentrifugation et cellules!

je voudrais réaliser des ultracentrifugations différentielles afin de déterminer la localisation d'une protéine spécifique qui m'intéresse. mais au lieu de le faire sur tissu, j'aimerais le faire à partir de culture de HEK. Auriez vous une idée du nombre de cellules dont j'ai besoin pour avoir au final une quantité de proteine suffisante pour faire des western.  [...] Tout dépend du compartiment cellulaire que tu veux isoler, de la représentation de ta protéine dans ce compartiment...Donc c'est par l'expérience que tu sauras quelle quantité de cellule te permet d'avoir une bande convenable en western. Pour commencer tu peux essayer plusieurs conditions où tu auras mis un nombre croissant de cellules.  [...]

[Biologie Moléculaire] Efficacité de transfection

N c'est le nombre de cellules effectivement transfectées (on fait intervenir la beta gal dans notre cas donc le nombre de cellules bleues).  [...] Donc ma question est la suivante. quelqu'un peut-il m'expliciter la formule d'efficacité de transfection qui pourtant devrait revenir au meme qu'une formule d'Efficacité de transformation mais comme on travaille directement sur culture de cellules au lieu de travailler sur gélose comme pour la transfo bactérienn, et bien c'est bête mais on s'y perd.  [...]

[Biologie Cellulaire] HEK et nitrogène

Je maintiens mes stocks à -80°C au lieu du liquid nitrogen, est-ce que ces conditions de stockage peuvent expliquer ces problèmes de pousse (les cellules décongelées ont l'air saines et nombreuses les premières heures de mise en culture puis elles restent en suspension et ne s'attachent que très difficilement à la boite... La majorité finit par mourir).  [...] Ce qui pourrait poser problème c'est votre technique de congélation qui dégraderait les cellules. Ensuite une fois à -80°C ça ne bouge pas mais quand vous souhaitez les remettre en culture ben là, vous avez bien des cellules mais elles sont mortes.  [...]

[Biologie Cellulaire] Aide pour culture en boite de Pétri de cellules type cellules d'oignons.

la culture de cellules est très complexe et nécessite des milieux spécifiques dont le prix est assez élevé ainsi qu'un PSM pour éviter les contaminations. Avec la richesse des milieux, une bactérie se développe à une très grande vitesse comparé à tes cellules et détruit ta culture.  [...] En connaissez vous d'autres Quelle protocole utilisé pour mettre en culture ces cellules (faut il prendre une fine couche d'oignon et la posée sur la gelée ) Es ce que les colorants comme le Rouge neutre, le bleu de Méthylène ou Feulgen peuvent inhiber le cycle cellulaire est donc tués des cellules (si oui, quel colorant utilisé afin de ne pas fausser mes résultats).  [...]

Aide pour comptage cellulaire et interprétations

La première, montre le nmbre de cellules en fct du temps et on voit que les cellules se multplient exponentiellement jusqu'a un plateau de saturation qui dépend de la taille du milieu de culture. Nous savons qu'il y a un rapport ave le cycle cellulaiuer mais on ne trouve pas lequel, et impossible de trouver des infos ou que ce soit.  [...] Tu parles de milieu de culture, il s'agit donc de cellules cultivées en labo, ex vivo. Il faut savoir qu'il existe plusieurs types de cultures cellulaires.  [...]

[Biologie Cellulaire] co-culture les cellules vont-elles interagirent??

Mieux, si l'un d'entre vous fait de la coculture entre cellules adhérentes et non adhérentes comment fait-il en pratique pour faire interagir les cellules, si tant est qu'il veux qu'elles interagissent.  [...] J'ai pensé après coup à diminuer le volume du milieu de sorte qu'il soit le plus petit possible, à peine recouvrant les cellules pour forcer les transitionnelles à toucher les cellules stromales mais je me dis que pour 3 jours de culture sa sera peut-être limite pour la survie de ces cellules assez fragiles.  [...]

[Microbiologie] comment avoir une concentration de 10 6 cellule\ml

svp aidez moi. j'ai un champignon cultivé sur des boites de pétri. afin de lancer une fermentation sur milieu solide il faut avoir une concentration initial de l'inoculum à raison de 10 6 cellule\ml (10 Puissance 6 ) de champignon cultivé,donc comment calculer cette concentration à l'aide d'une cellule Malassez.  [...] Ce n'est pas pour contredire tous tes plans, mais la cellule de Malassez te permet de dénombrer une fois que ta culture a eu lieu (et pendant).  [...]