• Forum - Levure, Mutation, Synthèse

[Biologie Cellulaire] Levure et protéine GFP

Dans la levure BY4709 qui présente une mutation dans la chaîne de synthèse de l'uracile, on introduit un plasmide qui contient le gène de la GFP (et un gène codant pour l'uracile).  [...] Ensuite on met les levures dans un milieu complet YPG et dans un milieu sans uracile. La protéine GFP ne sera synthétisée que dans le milieu dans uracile.  [...]

[Biologie Moléculaire] complémentation de mutation chez la levure

quelqu'un voudrai bien m'expliquer le pricipe de la technique, j'ai vraiment du mal à m'ensortir. on dit que le principe est d'isoler un mutant de la levure puis de le modifier avec la séquence cible... si il porte déjà une mutation qu'elle est l'interet de le modifier.  [...] On intègre un gène d'intérêt par transformation génétique chez une levure mutée ayant par exemple perdue une de ses fonctions. Puis, on va regarder au niveau du phénotype de la levure si l'introduction du gène a permis la récupération de la fonction c'est à dire la restitution du phénotype ou encore la complémentation de la mutation initiale ayant entraînée la perte de fonction.  [...]

[Biochimie] Thiamine pyrophosphate

chez une souche de levure qui possède une mutation qui ne lui permet pas de synthétiser la thiamine pyrophosphate et le milieu de culture contient du glucose, quel composé sera excrété par les cellules et s'accumuleront dans le milieu.  [...] Seulement du pyruvate car il n'y aura pas de decarboxylation.   [...]

[Biologie Cellulaire] synchroniser cerevisiea en G2/M

Je veux bloquer des levures S.cerevisiae en G2/M et les maintenir ainsi pendant 10h environs. Le nocodazole et le benomyl ne sont efficaces que 4 à 5H. Je sais qu'il existe aussi des mutant température sensitive de cdc14 ou cdc20 qui peuvent arrêter les cellules en G2/M mais je ne sais pas combien de temps. Quelqu'un les a t il déjà testé.  [...] Le principe des mutants thermosensible c'est de reveler la mutation lorsque la levure pousse a plus haute température (souvent 37 au lieu de 30). donc normalement si ton mutant bloque ta levure en phase G2/M à température permissive, ta levure devrait y rester jusqu'a ce que tu baisses la température.  [...]

[Biologie Cellulaire] Fréquence des mutations

Jusque là, j'ai compris, mais le probleme est qu'après, ils affirment. il y a donc en moyenne, lors de la réplication de l'adn chez la levure, une mutation pour 370*1,4*10 7 = 518*10 7 nucléotides répliqués.  [...] il y a donc en moyenne, lors de la réplication de l'adn chez la levure, une mutation pour 370*1,4*10 7 = 518*10 7 nucléotides répliqués.  [...]

[Biotechnologie] conception de bioétahnol à l'aide de levures

[Biotechnologie] conception de bioétahnol à l'aide de levures.  [...] Etudiants en deuxième année d'IUT nous avons pour projet. la conception de bioethanol. Nous connaissons toutes les étapes de synthèse mais nous souhaitons fabriquer un levain dans le but d'activer notre levure (pour qu'elle soit dans des conditions optimales).  [...]

marqueurs de sélection

Ce gène est appelé marqueur de sélection. Deux types de marquer de sélection sont utilisés chez les levures. des gènes permettant de complémenter une mutation auxotrophique ou des gènes conférant la résistance à un antibiotique ou à un agent toxique.  [...] Dans cette approche, il est nécessaire d'utiliser une souche de levure mutée au niveau d'un gène codant pour une enzyme impliquée dans la synthèse d'un métabolite essentiel. Cette levure est maintenue en vie en lui fournissant ce métabolite dans le milieu de culture.  [...]

[Génétique] Experience temoin gene delete

Voila je travaille sur la fonction d'une proteine chez la levure. J'ai suivi la croissance de deux souches (sauvage et mutee*, la mutation correspondant a la deletion de la proteine etudiee) et observe une difference du taux de croissance. Bref.  [...] Pour me constituer un temoin, mon tuteur de stage m'a demande d'apporter via un plasmide le gene de la proteine etudiee dans la souche deletee (et donc normalement retablir le phenotype sauvage. Et ainsi s'assurer que la difference observee entre ces deux souches est bien due a la deletion de la proteine et non pas a un effet que pourrait avoir le fait d'enlever simplement le gene (pour exemple deregler un autre gene).   [...]

La levure S.cerevisiae

Si on fournit à une mutante le précurseur qu'elle ne peut pas synthétiser à cause de sa mutation elle pourra synthétiser l'adénine.  [...] Si l'enzyme qui transforme le précurseur b en précurseur c est défectueuse mais que l'on fournit c dans le milieu alors la levure va pouvoir continuer la chaîne de biosynthèse qui aboutit à l'adénine.  [...]

[Génétique] Génétique de la levure

j'ai une souche de levure mutée(j'ai remarqué la mutation d'après le phénotype) et je veux s'assurer que cette mutation est dans l'ADN génomique et non dans l'ADN mitochondriale.(je sais que c'est très rare d'avoir une mutation dans l'ADN mitochondriale qui s'apparait sur le phénotype mais il faut s'assurer).  [...] je pense de croiser 2 souches (mutée et WT) mais je ne sais pas le ratio que je doit attendre c.à.d est ce que j'aurai 4/0 ou 2/2, 3/1(comme phénotype)... car la mutation est récessive et je propose qu'elle est mitochodriale.  [...]