• Forum - Kits, Extraction, ADN, Végétal, ARN

[Biologie Moléculaire] Extraction acides nucléiques totaux

La question que j'ai à poser à la communauté futura science est simple. connaissez-vous une méthodes d'extraction pour les acides nucléiques totaux (extraction ADN + ARN) qui fonctionne chez le végétal.  [...] Je sais que Qiagen offre de bons kits permettant l'extraction d'ADN génomique végétal et d'autres kits permettant l'extraction d'ARN.  [...]

Extraction d'ADN

Notre laboratoire travaille entre autre sur de l'extraction d'ADN issu de valves cardiaques de patients. Nous utilisons pour ca le kit Qiagen (attention, il existe des kits d'extraction d'ARN et d'ADN). Je crois ne pas me tromper en disant qu'il existe plusieurs kit pour l'ADN.  [...] Pour les kits Qiagen (que j'utilise aussi), je ne suis pas sûre que ce soit approprié pour l'extraction à partir de poils ou fécès.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction d'ARN

j'essaye de mettre au point une extraction d'ARN sur des échantillons d'urine. Mon seul soucis, c'est que la quantité récupérée avoisine les 3ng/µl... Travaillant d'habitude sur des cellules, je n'ai pas l'habitude de travailler avec des prélèvements tels que l'urine.  [...] Ca coute un peu cher mais les kits d'extraction spécialement concus pour petite quantité d'arn sont la meilleure solution dans ton cas à mon avis.  [...]

Détection bactériennes

Si c'est bien ça, je ne crois pas que ça existe. Même passer par une étape de culture n'est pas la solution. ça ne vous permet pas de détecter les bactéries v iables n on c ultivables (VNC). La solution que je vois c'est de passer par l'ARN 16S.  [...] Peut importe l'enzyme qui va couper l'ADN ou l'ARN, le but étant de détecter un ADN ou ARN coupé qui trahirait la présence de bactérie.  [...]

[Biologie Moléculaire] biologie moléculaire

Bonsoir, en biologie moléculaire nous avons étudié l'extraction de l'ADN, l'ARN et des plasmides. Bon l'ADN c'est facile mais l'ARN et les plasmides ça n'est pas très claire, j'ai fait des recherches sur le net mais ça ne m'a pas vraiment aidé,si il y en a parmi vous qui aimerait bien m'expliquer comment se font ces 2 extractions, je leur en serais très TRES reconnaissante.  [...] Les deux techniques les plus employées en laboratoire pour extraire de l'ADN plasmidique (je ne sais pas s'il y en a d'autres) sont. l'extraction au phénol-chloroforme et l'extraction à l'aide de kits industriels, type OMEGA, Sigma-Aldrich...etc. La première permet de récupérer une plus grosse quantité d'ADN plasmidique que la seconde, mais est plus délicate à réaliser.  [...]

[Biologie Cellulaire] Méthodes d'étude en histologie

une empreinte, effectivement ça semble compromis. Des techniques enzymatiques, je n'en ai pas l'expérience, mais je pense que ce n'est pas impossible. En ce qui concerne les colorations lipidiques (type Oil Red O ou Sudan), le problème n'est pas la fixation mais le déparaffinage qui dissous les lipides. Pour cela on fera des coupes congelées.   [...] - faire une extraction d'ADN oui, je ne l'ai jamais fait mais il existe des kits et des protocoles pour ça.  [...]

Extraction d'ADN parasitaire à partir de milieu de culture

je veux faire l'extraction de l'ADN parasitaire, Trichomonas vaginalis à partir de son milieu de culture. j'ai essayer deux kits, celui de Qiagen et de Invitrogen mais la concentration de l'ADN et toujours trés faible à l'ordre de 10ng.  [...] je sais pas si cette concentration est fiable pour faire un typage./.   [...]

calibration entre différents run en QPCR

Attention toute fois. Dans cette situation tu dois tout de même faire attention à avoir extrait ton ADN de façon comparable. En effet, certains produits chimiques contenu dans différents kits d' extraction d'ADN peuvent perturber la lecture de fluorescence de l' échantillon.  [...] Je te conseille donc de vérifier la source de tes échantillons si tu n'as pas effectué toi même l'extraction, afin d' être sur de la composition de ceux-ci.  [...]

[Biologie Moléculaire] Kits d'extraction d'ARNm

Salut tt le monde. qq pourrait m'aider à comprendre le principe des kits d'extractions d'ARNm à partir des tissus végétaux, étape par étape svp (en fait je n'ai aucune idée sur les kits et je vais les utiliser bientot lors d'un stage), merci bcp.  [...] 2) passage sur des petites colonnes de purification, qui permettent de séparer l'ARN du reste des contaminants (fibres végétales...). Ces colonnes contiennent une petite membrane de silice auxquelles les ARN se fixent spécifiquement. Les autres composés passent à travers la membrane et sont collectés dans un tube collecteur.  [...]

[Biologie Moléculaire] Amplification par PCR

Oui et non. Trop peut aussi favoriser la fixation des amorces sur des zones non spécifiques, pouvant expliquer cette bande de 100pb. Les amorces sont de toute façon toujours en excès (La réaction perd de son efficacité au fil des cycles, autant que ce ne soit pas pour un truc aussi bête que ça) mais il convient de tester différentes concentrations pour être sur de ne pas avoir ce type de problèmes.   [...] Tu peux aussi purifier la bande à partir du gel, il existe des kits le permettant. faut découper le gel à partir de la photo prise pour situer sa bande puis on élue l'ADN avec des colonnes comme pour une extraction d'ADN à partir de cellules.  [...]