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[Biologie Moléculaire] SOS-protocol d'extraction d'Adn

je suis etudiant en master et je bosse sur un sujet de recherche. typage des HPV qui cause le cancer du col de l'uteris et dans ce cadre j'utilise un kit de typage, ben jaimerais bien comparer ce kit avec l'extraction classique...pcr...hybridati on.  [...] Tu devrais te renseigner sur des adaptations du protocole HIRT, qui fonctionne très bien avec le CMV et existe aussi pour les HIV.   [...]

Kit extraction dna

Prière de m'éclaircir les étapes d'extraction d'adn génomique avec le kit commercial Purelink tm genomic DNA mini kit.  [...] Je fais souvent l'extraction avec la méthode classique phénol-chloroform et maintenant je veux utiliser ce kit pour l'extraction.  [...]

Extraction ARN totaux

Pour extraire les ARN totaux d'une culture cellulaire ou bien de tissu j'utilise la méthode classique phénol-guanidine isothiocyanate-chloroforme. J'obtiens des ARN de bonne qualité or lors du dosage spectrophotométrique j'ai une absorption assez importante à 230nm qui est légèrement inférieur voire identique à l'absorbance à 260nm.  [...] Yep, je pense d'ailleurs que l'extraction se fait normalement en milieu alcoolique (qui va précipiter tes ARN) et que les reactifs du kit Qiagen ont pour objectif de nettoyer cet alcool à travers plusieurs étapes.  [...]

[Biologie Moléculaire] Electrophorèse en gel d'agarose pGFP

J'ai réalisé sur un plasmide pGFP une extraction classique puis un traitement à la Rnase et parallèlement une digestion avec BamHI.  [...] Pour la piste après le marqueur de taille, c'est l'extraction avec kit, (+Rnase) je m'attendais à avoir plusieurs fragments d'une intensité supérieure à la méthode classique.  [...]

[Biologie Moléculaire] Micro ARN

Du coup, si j'utilise la méthode classique au TRizol je n'ai pas grand espoir rien que pour récupérer les micro ARN d'où l'utilisation de Kit spécifique en RT PCR mais d'abord en extraction.  [...] merci pour ton protocole. J'ai réalisé le même pour l'extraction d'ARN dans le plasma sauf que je précipitais 30 min à -80°C et non o/n à.  [...]

[Biologie Moléculaire] Question purification QIAprep

Je ne sais pas si c'est ca, mais de mon côté quand les extractions de plasmides sont pas très jolies c'est souvent du au fait que les cultures sont trop vieilles. Essaye de faire l'extraction avec une DO plus basse (1.0 par exemple) et le même volume de culture.  [...] Il y a aussi la quantité de plasmides qui entre en compte. Je ne sais pas comment tu fais tes preps, nous, nous utilisons le kit Xtra midi. Le principe est une colonne et un filtre (classique pour ce genre de kit). Le truc c'est que si tu charges trop de bactéries tu satures la colonne et ton extraction n'est pas terrible.  [...]

[Biologie Moléculaire] Clone sans ADN

Lors de l'extraction d'ADN, (j'ai tenter le mini-prep maison et le kit mini-prep biobasic) je n'obiens aucun ADN lors de la migration sur gel d'agarose. J'ai répété l'expérience plusieurs fois, à partir du début, ma superviseur a testé également les clones et à chaque fois, il n'y a pas d'ADN.  [...] Vous avez fais une transformation des mêmes cellules avec un autre vecteur Vous avez réussi à le récupérer avec le même protocole d'extraction et les mêmes solutions.  [...]

[Génétique] PCR sur bactérie E.coli, recherche d'un kit pour son extraction

Je chercherai un fournisseur pour un kit d'extraction sur E.coli pour la PCR.  [...] Peut etre avez vous des suggestions à me faire... J'ai un budget très petit alors si vous connaissez un fournisseur qui pourrai me fournir ce kit en plus à un prix non excessif ce serai génial.  [...]

[Biologie Moléculaire] protocole extraction ARN (pas de kit, ni trizol)

Ah mais on peut fabriquer son Trizol. Et tu le devras si tu veux faire une extraction phénol Chloroforme.  [...] J'ai fait des extractions d'ARN dans ma jeunesse avec du phénol Chloroforme-alcool isoamylique mélange 1/1 et ça marchait très bien. Problème c'est long, assez lourd et les quantités récupérées sont certes impressionnantes mais pas reproductibles.  [...]

Extraction d'ADN

Renseigne toi sur le site de Qiagen a savoir s'ils ont un kit micro. Si tu es limité sur la quantité d'échantillon, il vaut mieux opter pour le kit d'extraction le plus petit possible (donc kit mini si le kit micro n'existe pas).  [...] Pour les kits Qiagen (que j'utilise aussi), je ne suis pas sûre que ce soit approprié pour l'extraction à partir de poils ou fécès.  [...]