• Forum - Interactions, Anticorps, Antigène

Différences test d'ouchterlony et test ELISA

Je pense confondre un petit peu ces deux tests immunologiques et je ne trouve pas réellement de réponse à mes questions sur le net.   [...] le premier est un test qui permet d'étudier des interactions anticorps-antigène de façon qualitative, à bas débit. L'elisa est une méthode de dosage (quantitatif et qualitatif) qui permet de quantifier ou détecter des anticorps, antigènes ou d'autres substances capables d'interagir avec des anticorps.  [...]

[Biologie Moléculaire] BSA et saturation

Maintenant, dans le cas d'ELISA, elle servirait à empêcher les interactions non-spécifiques des anticorps avec les bords des plaques qui sont très hydrophiles. Donc, durant la première étape, tu laisses ton antigène se fixer au fond des plaques. Puis tu ajoutes la BSA afin de combler les espaces vides.  [...] Et ensuite tu ajoutes les anticorps primaires. Ainsi, les anticorps ne peuvent plus se fixer au fond de la plaque via une interaction non-spécifique.  [...]

[Biologie Cellulaire] cadherines

Je souhaiterai savoir pourquoi la présence d'anticorps anti cadherines rompt le tissu embryonnaireSelon moi les cellules sont censées adhérer entre elles, donc je vois mal comment l'anticorps peut réussir a se fixer sur les cadherines.  [...] parce que certains types d'anticorps peuvent se fixer sur des sites d'intéraction de protéines et ainsi perturber leur fonction. Il faut comprendre que les interactions entre protéines sont souvent assez labiles, et qu'une fois l'anticorps fixé il a le dessus sur d'autres types d'intéractions.  [...]

[Biologie Cellulaire] PBS ou TBS

Tout d'abord à quoi cela sert d'avoir des tampons salins. Pour éviter l'agrégations des protéines et des anticorps sous l'effet des forces électrostatiques. Les ions de petites tailles viennent former un écran autour des protéines chargées. En cas de bruit de fond on peut augmenter la force ionique de la solution en poussant la concentration de NaCl jusqu'a 0,5M.  [...] Maintenant quand utilise t'on le PBS Tout le temps, (surtout en utilisant de Ac monoclonaux ou le TBS est moins bon) sauf quand on veut révéler un anticorps marqué à la phosphatase alcaline (car le PBS apporte une grande quantité de phosphate inorganique).  [...]

Glucose et glycerol en western-blot

Dans mon nouveau labo, un protocol est affiche au dessus de la paillasse, et la personne presente avant moi utilisait 0,4% de tween, probablement pour augmenter la specificite, mais egalement du glucose et du glycerol. Savez-vous a quoi servent ces composes dans ce cas.   [...] Par contre 0,4% de tween permet de mieux se débarrasser des interactions non spécifiques, mais attention si vos anticorps ont une faible affinité pour leur cible ça peut les décrocher.  [...]

[Immunologie] Réseau idiotypique

Le système immunitaire est constitué d'éléments qui interagissent par paires (dualisme). synergie ou antagonie des interactions T/B ou T/T, capacité des molécules d'anticorps de reconnaître mais aussi d'être reconnues.  [...] Cet Ac antianticorps pourra à son tour être reconnu comme se comportant comme un Ag et il va y avoir production d'un Ac anti antianticorps...etc...Il y a donc une réaction en cascade...Mais ce que je ne comprends pas trop c'est que cette régulation n'est pas du tout spécifique.  [...]

Immunohisto

L'anticorps peut +/- bien marcher en western-blot par rapport a l'immunohisto (ou cyto-)-chimie. Les tampons sont differents, les conditions aussi...l'interaction epitope-site anticorps etant conditionne grandement par des interactions ioniques-electrostatiques, les tampon, pH, ions (...) jouent pas mal.  [...] ..2) il est naif de croire qu'en western denaturant on denature completement, on garde certaines interactions proteiques (oligomeres, structures secondaires...etc...) donce le site antigenique peut etre masque en western aussi.  [...]

Structure quaternaire

La plupart du temps, les interactions entre les différentes SU sont de types ioniques ou hydrophobes mais dans certains cas, comme pour les anticorps, il y a création de liaisons covalentes de type disulfure.  [...] On parle souvent en cours de feuillet alpha, bêta, de protomères... Mais je n'ai jamais vu ces notions avant, pourriez-vous m'éclairer SVP.   [...]

Transfusion sanguine et systeme immunitaire

Bonjour, chacun de nous présente dans son plasma des anticorps contre les antigènes de groupes sanguins ABO manquants d'une manière constitutionnelle, c'est à dire par exemple un sujet de groupe A présente dans son sérum des anticorps anti-B sans qu'il y ait contact avec l'antigène B.  [...] je suis revenue à mon cours d'hématologie. les anticorps anti-A apportés lors d'une transfusion O-. A sont rapidement neutralisés par les antigènes A du plasma. et les principales différences entre les anticorps naturels et immuns st. pour les AC immuns leur activité n'est pas augmentée en milieu sérique, n'ont pas de pouvoir hémolysant dans les conditions standards, ne sont pas opsonisants(n'entrainent pas la phagocytose, leurs optimum thermique est à 4°C et ils sont neutralisables par les substances solubles, pour les AC immuns c'est totalement le contraire, d'où leur danger, ces derniers proviennent d'une hétéroimmunisation par des substances d'origine animales ou bactériennes (vaccination/anatoxine diphtérique ou tétanique) ou d'une allo immmunisation interhumaine/grossesse, ou aussi d'une sérothérapie/médicament qui contient N-acétylglucosamine (sucre spécifique de l'antigène A).  [...]

[Biologie Moléculaire] Co-immunoprecipitation

lors de la précipitation de notre protéine cible avec un anticorps, faut il auparavant fixer notre protéine avec les autres protéines qui interagissent avec (je me dis que sans cela les interactions sont peut être trop faible pour permettre de visualiser sur western blot).  [...] Et pour finir, auriez vous d'autres suggestions de techniques éventuellement plus simple permettant de mettre en évidence une interaction.  [...]