• Forum - Insuline, Protéines, Bactérie

[Biotechnologie] Méthode de purification de l'insuline recombinante

Je vous explique vite fait le contexte, le gène de l'insuline humaine est placé dans un plasmide, ce plasmide dans la bactérie et après sélection de la bonne colonie de bactérie on place la solution bactérienne dans un fermentateur pour obtenir beaucoup d'insuline, etc.  [...] Je sais qu'il y a beaucoup de méthodes de purification mais je ne sais pas laquelle est la plus adapté pour purifier l'insuline une fois que l'on a obtenu l'extrait protéique (insuline + toutes les autres protéines synthétisées par la bactérie).  [...]

[Biotechnologie] Rendement production protéine recombinante

Je cherche un ordre de grandeur du rendement de la production de protéines en système bactérien (protéines recombinantes), et plus particulièrement de l'insuline.  [...] La valeur exacte importe peu (et je me doute qu'elle varie d'une protéine à l'autre), mais j'aimerais savoir si on attend plutôt des mg/L, dizaines de mg/L, g/L, etc.  [...]

[Biologie Moléculaire] Proteines recombinantes

Je ne comprends pas comment on peut utiliser les plasmides pour produire des protéines pour l'utilisation médicale par exemple l'insuline (on tire profit de l'opéron lactose). Comment est-ce qu'on force les bactéries à garder le matériel génétique introduit et comment ça se fait qu'il y a une partie des bactéries qui n'est pas transformé par le plasmide (qu'est-ce qu'on fait avec cette partie).  [...] L'intérêt d'avoir une protéine hybride beta-galactosidase et chaine de l'insuline est d'éviter la dégradation de l'insuline, en effet la bactérie ne connait pas ce gène car elle n'en a pas besoin donc fera tout pour le dégrader. Alors que la beta galactosidase elle le connait bien donc ta chaine d'insuline sera protégée de la dégradation.  [...]

génétique bactérienne

Chez les bactéries il n'y a qu'un seul ADN ( central ) alors pratiquement tous ces gènes vont s'exprimer. on peut dire que le phénotype reflète alors tous le génotype. OK.  [...] C'est pourquoi en insèrant un fragment d'ADN étranger au milieu du filament ADN d'une bactérie, elle le laisse s'exprimer à tous les coup. un gène ( bout d'ADN ) qui commande l'insuline humaine, fixé dans une bactérie permet, par sa culture, de fabriquer l'insuline necessaire aux diabétiques.  [...]

[Biologie Cellulaire] Chaperones

Moi j'ai un souci avec les chaperones. Je suis stagiaire dans un labo de recherche (qui touche a sa fin) et j'aurais quelques questions sur les chaperones. Je travaille sur le changement de conformation de l'insuline lié a l'adsorption des protéines sur les matériaux.  [...] DSans mon cas les chaperones aident le repliement des protéines de l'insuline ou encore remet en place toute anomalie lors de la dénaturation. Comment cela se passe t'il dans la protéine.  [...]

[Biochimie] Bacterie E.Coli

Et je me suis donc demandé pourquoi il etait necessaire d'intégrer ce gene dans cette autre bacterie alors que le bacillus thuringiensis possede lui aussi des plasmides (comme c'est une cellule procaryote).  [...] ...si on a besoin d'insuline pour aider les malades...on va alors fabriquer le d'une maniére rapide, en intervenant une gene (qui a l'information de fabrication de l'insuline)dans le plasmide de E.coli (20mn pour sa division )alors y a plusieur etapes. réplication, traduire les genes en protéines.  [...]

[Biologie Moléculaire] structure des protéines

D'après le lien, l'immunoprécipitation permet donc d'identifier une protéine qui réagit avec l'anticorps qu'on a ajouté. Ici l'anticorps anti-proinsuline va réagir avec les protéines de proinsuline. On va donc par la suite pouvoir examiner la quantité ou les caractéristiques physiques de la protéine.  [...] Ici l'anticorps anti-proinsuline va réagir avec les protéines de proinsuline. On va donc par la suite pouvoir examiner la quantité ou les caractéristiques physiques de la protéine. On élimine ensuite les protéines qui ne sont pas liées à l'anticorps anti-proinsuline pour ne garder que les protéines de proinsuline.  [...]

insuline : protéine ou pas ?

Cela dépends de la définition de protéine. Vu que l'insuline est très petite, il y a des personnes qui l'assimile à un peptide. Mais vu qu'elle possède deux chaines, d'autre voient une protéines.  [...] je crois que pour l'insuline (que je considère comme une protéine), c'est plus compliqué que pour d'autres protéines qui sont juste traduites et foldées. Dans ce cas, il y a différentes étapes de maturation médiées par différentes enzymes, des épissages successifs et des modifications post-traductionnelles (genre pré-pri-insuline donne pré-pro-insuline donne,..., donne insuline).  [...]

[génétique] questionnaire de génétique

- production de protéines ou de substances intéressantes (insuline...) à supposer que les techniques soient bien maîtrisées.  [...] Première partie de la question. oui. Deuxième partie. les aliments qu'on peut cuire car vu que c'est le début des OGM, je préférerais cuire les aliments pour inactiver la protéine qui est surexprimée dans certains cas (car ça peut être une sous-expression d'une protéine).  [...]

[Biologie Moléculaire] Les récépteurs SH2 et SH3

Du coup la liaison de cette protéine à la tyrosine phosphaté du récepteur de l'insuline ne se fait qu'au niveau du SH2 qui n'est pas possesseur d'une activité de type kinase. Les autres protéines adaptatrices (que j'appelle B) vont se fixer sur A par les sites SH3 qui ont par contre une activité de type kinase (phosphorylation des B = activation des B).  [...] J'ai vérifié deux trois petites choses et tout me semble clair sauf peut être une chose. Je prends le cas de la signalisation de l'insuline. Quel est le domaine de fixation entre IRS et P85/P110 un domaine SH2 Comment la protéine IRS (donc toute première protéine qui se fixe à la tyrosine phosphatée dans le cas général) se phosphoryle Est-ce que dès fixation à la tyrosine phosphatée on a un changement de conformation de la protéine qui permet l'activation d'un domaine catalytique de type kinase sur la protéine Cette autophosphorylation permet de réellement activer la protéine qui peut être reconnu par les autres protéines de signalisation.  [...]