• Forum - Induction, Bactéries, Protocole

[Microbiologie] Induction des bactériophages tempérés

En fait, je cherche à induire des bactériophages tempérés dans les bactéries lactiques du lait, j'ai essayé plusieurs méthodes en utilisant la mitomycine C à une concentration finale de 1µg/mL (agent chimique), les rayons UVs et la chaleur (agents physiques).  [...] Si vous avez des propositions sur des techniques d'induction des bactéries lysogènes ou un protocole que vous avez essayé et qui a réussi (même sur d'autres types de bactéries), votre aide sera très appréciée.  [...]

[Microbiologie] Protocole d'induction d'apoptose par choc thermique

[Microbiologie] Protocole d'induction d'apoptose par choc thermique.  [...] Je cherche un protocole simple et efficace pour induire de l'apoptose chez des levures pour un faire un test caspase.  [...]

Régulation par induction chez les bactéries...

Bonjour bonjour, pour situer un peu le contexte, ma question porte en faite sur l'induction que représente la présence de lactose dans un milieux extérieur pour une bactérie.  [...] Mais ou je ne comprend pas, c'est que le lactose ne peut entrer dans la bactérie sans la galactoside perméase, ce qui signifierai que les répresseurs seraient des enzymes pouvant entrer et sortir de la bactérie.  [...]

[Microbiologie] induction spontané d'un prophage

SVP dans une expérience à induction de bactéries lactique par UV on a obtenue 1.12x108 pfu/ml.  [...] j'aimeri savoir si c'est beaucoup ou pas et qusque réalment veut dire cette quantité.   [...]

[Physiologie] préparation d'un tampon citrate 0,1 M

Je suis étudiant en M2 de biologie et je dois mettre au point un protocole d'induction du diabète à la streptozotocine chez les rats. pour cela je dois préparer la streptozotocine dans un tampon de citrate de sodium (0,1 M), pH 4.5.  [...] pouvez-vous me donner les quantités exactes d'acide citrique et d'acétate de soduim que je dois ajouter pour préparer ce tampon.   [...]

Probleme d'induction de GST dans bacterie

Le protocole est assez classique. transformation de bactéries avec 5ng de plasmide par choc thermique et sélection sur pétrie avec d'ampicilline.  [...] Si on lyse les bactéries après l'induction par IPTG et qu'on fait migrer sur gel de poly-acrylamide suivit d'un marquage au bleu de coomassie on voit rien, ou en tout cas pas les grosses patates attendue.  [...]

surproduction et purification de proteine

je suis entrain de surproduire la topoisomerase topI de campylobacter jejuni grace a une induction a l 'itpg la je vais entamer ma purification j ai quelaue idees pour mon protocole mais est ce que y a des personnes qui ont deja fait de la purif de proteine j aimerai avoir un apercu pour precider ma purification c est par un his tag.  [...] _ Les grandes lignes de mon protocole de purif de ma prot (sachant que je congelais mes culots de bactéries transformées de 500 mL de culture, visuellement c'était un peu moins que le volume de l'extrémité conique d'un Falcon 50). un culot + 25 mL de tampon, reprendre doucement, sonication 7 min à 150 V dans la glace pour casser les cellules, centri 30 min 35000 rpm 4°C, surnageant chargé sur colonne Ni-NTA de 2 mL équilibrée avec le tampon.  [...]

induction IPTG

L'induction à l'IPTG se fait couramment lorsque la DO est entre 0.4 et 0.8 puisque c'est le moment où les bactéries sont en phase exponentielle de croissance. Elles sont donc métaboliquement très actives, ce qui est favorables à la production protéique, et l'IPTG peut entrer dans la bactérie.  [...] Même si celui-ci devenait létal, les bactéries déjà présentes pourraient le synthétiser et ainsi avoir une production, faible, mais minimum.  [...]

Protéine recombinante, promoteurs du vecteur d'expression

pour ce qui est de l'induction, il vaut mieux la faire juste avant la phase stationnaire car une fois passé ce cap, les bactéries s'isole de leur environnement en quelque sorte, en diminuant considérablement le nombre de pores membranaires. Donc la molécule inductrice ne peut plus traverser la membrane (peut-être que des molécules hydrophobes pourrait passer par diffusion passive.  [...] Pour ton gène bactérien, peut-être que c'est une séquence de type IRES, comme on les retrouve chez les eucaryotes, mais je ne sais pas si c'est valable pour les procaryotes... Il me semble mais je n'en suis pas sûr, je ne veux pas t'induire en erreur.  [...]

[Physiologie] induction du diabète de type à la streptozotocine chez la souris

Je suis étudiante en M2 de biologie et actuellement stagiaire dans un laboratoire ou je dois mettre au point un protocole d'induction du diabète de type 1 à la streptozotocine chez la souris.  [...] J'ai injecté 4 souris hier, j'ai mesuré leur glycémie ce matin, et celle-ci avait chuté chez les 4 animaux par rapport aux valeurs mesurées avant injection (0.7 g/L sans avoir été mise à jeun préalablement contre 1.53 g/L la veille à la même heure et dans les mêmes conditions pour la souris ayant atteint la glycémie la plus basse).   [...]