• Forum - Hybride, Enzyme, Restriction, ADN

[Biologie Moléculaire] Pcr

Je ne comprend pas vraiment...une sonde est complémentaire et antiparallèle de la séquence à étudier donc comment rajouter une séquence à l'extrémité 5' Celle-ci ne s'hybride pas Et puis une enzyme de restriction ne coupe que sur un ADN double brin donc je ne vois vraiment pas comment tout cel s'organise.  [...] Mais d'aprés ce que j'ai compris, c'est sur cette partie de l'amorce en trop ou qui ne s'hybride pas qu'on insère un site de restriction. Donc à cet endroit là, comment l'enzyme de restriction va t'elle couper si elle ne peut le faire que sur une région double brin et que le site de restriction correspond justement à une zone non hybridée ou simple brin.  [...]

[Biologie Moléculaire] test de paternité

Mes cours de biologie moléculaire sur le sujet étant enfouis dans les tréfonds de mon cerveau, quelqu'un pourrait-il me rappeler la différence (s'il y en a une) entre micro et minisatellite.   [...] Bonsoir. Si hybridation avec la sonde se fait avec fragment clivée par l'enzyme de restriction, au moment de la détection, la position des traits indiquera que le père ou la mère ( selon le brin avec lequel la sonde s'est hybridé) à donné ce chromosome a l'enfant.  [...]

Polymerase Chain Reaction

L'objectif d'une PCR est d'augmenter la quantité d'ADN pour la rendre plus facilement détectable expérimentalement. Pour ce qui est de la méthode. les brins d'ADN sont chauffé a 95°C, a cette température ils se dénaturent, on se retrouve donc avec deux brins monocaténaires.  [...] Ensuite a 60°C on hybride des amorces sur nos deux brins et a 72°C on introduit une enzyme -la taq polymerase- qui a partir des amorces va synthétiser les brins complémentaires. On se retrouve donc avec deux ADN bicaténaire donc 4 brins au total, on a doublé notre quantité d'ADN et on est prêt pour un nouveau cycle. Souvent on fait une petite trentaine de cycle.  [...]

[Biologie Moléculaire] technique d'hybridation moléculaire

Pour hybrider des sondes, il a fallu que tu mette un produit pour perforer les membranes afin de laisser passer ta sonde non Si tel est le cas, peut être que cette étape n'a pas fonctionné et que ta sonde à hybridé un bout d'ADN d'une bactérie lysée.  [...] .En fait y'a pas eu de conjugaison,j'ai réalisé une digestion d'ADN avec cette enzyme et une migration PFGE,ensuite j'ai hybridé mes fragments avec les sondes.  [...]

Plasmide recombinant

J'ai un petit problème en génétique, alors dans plusieurs exercices on me demande de faire la carte de restriction d'un plasmide, suite une simple et ensuite une double digestion, là c'est bon, mais après quand on me dit qu'on hybride le plasmide recombiné après la double digestion avec une sonde formée par l'ADN copie, alors ici j'arrive même pas à comprendre d'ou provient cet ADN copie, autrement dit il est la copie de quel ARNm au juste et puis on me donne la taille des fragments obtenus (après hybridation) et on demande de trouver la taille du fragment et ou il est placé.  [...] Ton plasmide a été coupé par deux enzymes de restriction différentes, on ligue ensuite un insert. S'il s'agit d'une rétrotranscription d'un ARNm, on parle d'ADN complémentaire et pas d'ADN copie. Pour la compréhension de ton exercice, je pense qu'on s'en fiche de savoir d'où vient cet ADN à liguer.  [...]

[Biochimie] La Replication de l'ADN durant l'Interphase

- Après le temps de deux cycles cellulaires, la bande d'ADN c'est divisé en deux. une bande de densitée égale à 1.710, et une autre bande de densitée égale à 1.717. on observe donc la présence d'ADN hybride et léger, l'ADN lourd à disparu.  [...] Confus. Ce résultat signifie que les deux brins d'ADN hybride se sont séparés. Le brin lourd s'est adjoint un nouveau brin constitué d'azote léger (donc ADN hybride) et le brin léger s'est adjoint un nouveau brin d'ADN léger. La moitié des molécules sont donc hybrides et l'autre moitié est représentée par de l'ADN léger.  [...]

[Génétique] Experience de meselson et sthal

normalement au début les 2brins d'adn n'était pas radioactif aprés les avoir mis dans un milieu radioactif chaque brin parental va servir de matric à la synthése de nouveau brin fils normalement on obtient moitié moitié alors qu'on a obtenu 100pour cen.  [...] Bon, c'est vrai que l'ADN hybride est constitué d'un brin normale et d'un autre radiactif, mais ça constitue une seule hélice d'ADN et le brin radioactif rend toute cette hélice radiactive, et comme l'ADN de la génération 1 est 100 % hybride donc il est 100 % radioactive.  [...]

methode meselson et stahl

la 2eme génération composé a 100% d'adn hybride. Ca ne peut donc pas etre une replication conservatrice puisque l'on obtient qu'une subtance unis, non dissociable.  [...] la 2eme génération composé a 100% d'adn hybride. Ca ne peut donc pas etre une replication conservatrice puisque l'on obtient qu'un seul type d'adn, chaque brin parentaux (N15) est soit lié via laison hydrogene a du N14 (semi-conservatif) soit lié par liaison nucléotidique/phosphodiester (dispersif).  [...]

Synthèse du brin retardé d'ADN

A quel moment intervient la ligase Avant on après le remplacement des amorces ARN par de l'ADN Obtient-on d'abord un brin hybride ADN/ARN pour ensuite faire intervenir l'ARN polymérase I et obtenir un brin d'ADN.  [...] La pol I est un exo nucléase, si tu fais ta ligation avant son intervention elle ne peut plus remplacer ta partie ARN en ADN (il faudrait une endonucléase).  [...]

[Biologie Moléculaire] transcription ADN en ARN

La bulle de transcription a une taille d'une quinzaine de paires de bases. Il y a bien formation d'un hybride ADN/ARN d'environ 8 paires de bases entre l'ARN transcrit et le brin d'ADN complémentaire.  [...] Au fur et à mesure que l'ARN pol transcrit, il y a ouverture de la double hélice d'ADN à l'avant, fermeture de la double hélice à l'arrière et séparation de l'hybride ADN/ARN.  [...]