• Forum - Hybridation, ARNm, ADN

[Biologie Moléculaire] Technique d'hybridation

Quel est le nom svp de la technique qui utilise l'hybridation d'une sonde d'ADN monocaténaire sur des ARNm séparés par électrophorèse.  [...] Je pense qu'il pourrait s'agir de la transcription inverse cependant un détail m'intrigue. l'hybridation de la sonde d'ADN monocaténaire sur des ARNm séparés par électrophorèse. La transcription inverse s'effectue dans un tube sans que les ARN aient été séparés auparavant.  [...]

[Divers] Epissage

Or, si tu connais le polypeptide correspondant à ce gène (supposons une protéine entière pour se faciliter la vie), tu remarques que si tu essayes de retrouver la séquence de l'ARN messager mature à partir de sa séquence en acides aminés, tu trouveras un ARN mature différent (plus court) que l'ARN messager immature dont on avait parlé plus haut.   [...] L'hybridation de l'ARNm avec l'ADN génomique correspondant suivi de l'action d'exonucléase permet d'obtenir les fragments d'ADN génomique correspondant aux exons. Si l'ADN génomique reste entier après digestion, c'est que l'ARNm n'est pas épissé.  [...]

[Biologie Cellulaire] La cellule mystère.... - Page 3

Je ne comprend pas l'interet d'utiliser un ADNc avec un ARN pré-messager. Pourquoi on ne se contente pas de faire une hybridation entre ADN normal et ARN normal (maturé) (éventuellement après avoir isolé l'ADN pour effectivement avoir le morceau qui nous intéresse) Ca serait plus simple, plutot que de se taper une rétrotranscription à partir d'un ARNm.  [...] En fait on voit très nettement que le gène (ADN) est beaucoup plus long que son ARNm. Les boucles sont présentes au niveau du brin d'ADN et correspondent effectivement aux introns car les 2 brins sont hybridés sauf au niveau de ces boucles ce qui montre que l'ADN possède des séquences que l'ARNm n'a pas.  [...]

[Génétique] Puce à ADN

Je voulais savoir pourquoi nous devons passer par l'ADNc pour effectuer l'hybridation Un ORF est bien supposé être un gène codant dans ce cas là pourquoi ne pas directement travailler avec des ADN au lieu d'ADNc.  [...] Parce que l'ARNm est très fragile contrairement à l'ADN qui lui résiste à toutes les étapes de l'hybridation sur puce + lecture par le scaner, etc.  [...]

Plasmide recombinant

J'ai un petit problème en génétique, alors dans plusieurs exercices on me demande de faire la carte de restriction d'un plasmide, suite une simple et ensuite une double digestion, là c'est bon, mais après quand on me dit qu'on hybride le plasmide recombiné après la double digestion avec une sonde formée par l'ADN copie, alors ici j'arrive même pas à comprendre d'ou provient cet ADN copie, autrement dit il est la copie de quel ARNm au juste et puis on me donne la taille des fragments obtenus (après hybridation) et on demande de trouver la taille du fragment et ou il est placé.  [...] Ton plasmide a été coupé par deux enzymes de restriction différentes, on ligue ensuite un insert. S'il s'agit d'une rétrotranscription d'un ARNm, on parle d'ADN complémentaire et pas d'ADN copie. Pour la compréhension de ton exercice, je pense qu'on s'en fiche de savoir d'où vient cet ADN à liguer.  [...]

[Biologie Moléculaire] Hybridation ADNdb - ARNm

D'après ce que j'ai lu il est possible d'avoir hybridation ARN-ADN(matrice) entre les bases correspondantes aux exons, les introns se retrouvant en forme de boucles non hybridées à l'ARN.  [...] Ni, et là je me trompe surement, etant donné que l'ARNm correspond qu'à une petite séquence de l'ADN, pourquoi ne pourrait t-il pas y avoir hybridation d'ARNm-ADN brin matrice, puis ADNbrin matrice-ADNbrin codant en les bases qui ne sont pas déjà liées à l'ARN.  [...]

[Génétique] hybridation adn/adn : technique de southern blot

j'ai réalisé récemment une hybridation adn/adn par la technique de Southern blot. Lors de la digestion enzymatique, il à été utilisé de l'ADN provenant de phage lambda. Les différents tubes comportaient également de l'eau stérile, du tampon 10X, Ainsi que les enzymes de restriction, (EcoRI et/ou HindIII selon le tube).  [...] - contaminaton des échantillons (je précise que les cones n'ont pas été changés), mais je ne vois pas en quoi cela expliquerait la faible migration. A moins que dans ce cas là, la présence simultanée de plusieurs enzymes aurait engendré des fragments vraiments minuscules, ce qui expliquerait que ceux ci soit sortis du gel.   [...]

[Biologie Moléculaire] l'hybridation ADN/ADN "les différent méthodes???"

[Biologie Moléculaire] l'hybridation ADN/ADN les différent méthodes.  [...] Il y a aussi la technique du RFLP. il s'agit de comparer des profils de restrictions par une enzyme à faible fréquence de coupures suivi d'une électrophorèse particulière car il s'agit de distinguer de très gros fragments d'ADN génomiques (électrophorèse en champ pulsé).  [...]

[Génétique] CGH hybridation génomique comparative

Après l'hybridation compétitive sur chromosomes normaux, on fait une analyse des taux d'hybridation de chacun des deux ADN sondes, au niveau de chaque chromosome.  [...] L'ADN sur lequel vont s'hybrider les deux types de sondes est normal. Dans ce cas, comment se fait il qu'il possède les séquences gagnées par le génome muté.  [...]

[Microbiologie] la microbiologie alimentaire

La brucellose est une maladie infectieuse grave liée à la consommation d'aliments bien particuliers, le fromage de chèvre étant souvent mis en cause. Elle ne poserait aucun problème si le lait destiné à leur fabrication était pasteurisé. La recherche de cette bactérie se fera par hybridation ADN-ADN, alors que la recherche des anticorps anti-Brucella dans les produits laitiers se fait par le ring test.  [...] La recherche du germe par les méthodes traditionnelles est fastidieuse et longue. La recherche par hybridation ADN-ADN, les méthodes immuno-enzymatiques réalisées après enrichissement sont des techniques de recherche actuelles et dont la modernisation est continue.  [...]