• Forum - Hybridation, ADN, Concentration, Excès

[Biologie Moléculaire] Hybridation ADN/ARN

Pourquoi dit-on que, lors d'une hybridation ADN/ARN, si la concentration d'ARN est en excès, la vitesse d'hybridation est identique à celle d'une hybridation ADN/ADN alors que si la concentration d'ADN est en excès la vitesse est 5 fois moins que celle d'une hybridation entre ADN /ADN.  [...]

[Biologie Moléculaire] Explications rapides sur la PCR

A haute température, dénaturation de l'ADN comme des protéines, il y a séparation des 2 brins. On descend la température, processus inverse.  [...] Je dirais plutôt que les amorces en excès augmentent la probabilité que celles ci s'hybrident avec l'ADN simple brin, et évite ainsi la renaturation de l'ADN en double brin. On met pas l'ADN en excès.  [...]

Hybridation, ADN, Stringence, Concentration en sel

-l'hybridation est d'autant plus spécifique lorsque la stringence est forte et que la concentration en sel est faible.  [...] Mon problème. Je ne comprend pas pourquoi l'hybridation est d'autant plus spécifique lorsque la stringence est forte et que la concentration en sel est faible (c'est peut être un problème de définition, à vrai dire, je ne vois pas trop ce que veut dire le mot stringence.  [...]

Température d'hybridation et PCR

Maintenant pourquoi on se place 5°c en dessous du Tm pour avoir la température d'hybridation J'y pense maintenant ça doit être un compromis entre une dénaturation suffisante de l'ADN (ou plutôt une renaturation pas trop rapide de l'ADN après l'étape de dénaturation pour permettre l'hybridation aux amorces) et une température suffisamment basse pour permettre l'hybridation (d'où 5° en dessous du Tm). Non.  [...] La denaturation s'effectue a 94°C pour séparer les deux brins d'ADN. Les amorces etant en large exces par rapport a la matrice lors de l'hybridation (a un Tm bas pour etre certains qu'elles s'apparieront) leur hybridation avec la matrice est favorisée.  [...]

[Génétique] Hybridation Génomique Comparative (CGH)

Ma deuxième question.Je ne comprend rien au marquage par fluorescence, déja, comment peut n'y avoir une hybridation égal et donc absence de fluorescence Et ensuite pourquoi fluorescence rouge =Excès d'ADN tests et délétion, Et pourquoi fluorescence rouge=Excès d'ADN Test et amplification(amplification de quoi d'ailleurs).  [...] Ensuite, quand il y a hybridation égale, on n'a pas absence de signal, je crois que c'est orange pour la CGH sur métaphases, par contre c'est jaune pour la CGH-array (enfin...c'est jaune sur l'écran en tout cas). Je suppose qu'il n'y a pas forcément un brin du patient et un brin du témoin hybridés pour toutes les sondes, mais sur toute la longueur d'un chromosome, il y en a autant provenant de l'un comme de l'autre.  [...]

[Biologie Moléculaire] Notion de stringence d'hybridation

Une solution stringente est bien, par exemple, une solution à faible concentration en sels. Ce qui fait augmenter le Tm, d'où l'hybridation plus difficile (mais plus spécifique).  [...] Pour résumer, en conditions stingentes (température élevée, faible concentration en sels), il est plus difficile d'hybrider deux brins d'ADN. Mais utiliser des conditions plus stringentes permet, comme le disait Enjoys, d'augmenter la spécificité de l'hybridation.  [...]

[Génétique] hybridation adn/adn : technique de southern blot

Ensuite, j'ai effectué une électrophorèse en gel d'agarose à 1%. la migration à duré 1heure environ, à 120volts. Le problème qui se pose est qu'à l'issue de la migration, les fragments des différents puits ont très peu migrés, puisqu'à peine 3 ou 4 bandes sont visibles en haut du gel.   [...] - contaminaton des échantillons (je précise que les cones n'ont pas été changés), mais je ne vois pas en quoi cela expliquerait la faible migration. A moins que dans ce cas là, la présence simultanée de plusieurs enzymes aurait engendré des fragments vraiments minuscules, ce qui expliquerait que ceux ci soit sortis du gel.   [...]

[Biologie Moléculaire] l'hybridation ADN/ADN "les différent méthodes???"

[Biologie Moléculaire] l'hybridation ADN/ADN les différent méthodes.  [...] Il y a aussi la technique du RFLP. il s'agit de comparer des profils de restrictions par une enzyme à faible fréquence de coupures suivi d'une électrophorèse particulière car il s'agit de distinguer de très gros fragments d'ADN génomiques (électrophorèse en champ pulsé).  [...]

[Génétique] CGH hybridation génomique comparative

Après l'hybridation compétitive sur chromosomes normaux, on fait une analyse des taux d'hybridation de chacun des deux ADN sondes, au niveau de chaque chromosome.  [...] Pense aux duplications Si j'ai une duplication segmentale ou un nombre de copies de micro-/minisats, je vais me retrouver avec une séquence gagnée.   [...]

[Microbiologie] la microbiologie alimentaire

La brucellose est une maladie infectieuse grave liée à la consommation d'aliments bien particuliers, le fromage de chèvre étant souvent mis en cause. Elle ne poserait aucun problème si le lait destiné à leur fabrication était pasteurisé. La recherche de cette bactérie se fera par hybridation ADN-ADN, alors que la recherche des anticorps anti-Brucella dans les produits laitiers se fait par le ring test.  [...] La recherche du germe par les méthodes traditionnelles est fastidieuse et longue. La recherche par hybridation ADN-ADN, les méthodes immuno-enzymatiques réalisées après enrichissement sont des techniques de recherche actuelles et dont la modernisation est continue.  [...]