• Forum - Fragments, ADN, Intérêt

Composition d'une cellule souche

L'interet d'une telle souche est de permettre d'inserer des fragments d'ADN sans se soucier de la méthylation. On peut donc insérer des framgents d'origine divserses sans qu'ils ne soient dégrader.  [...] L'interet d'une telle souche est de permettre d'inserer des fragments d'ADN sans se soucier de la méthylation. On peut donc insérer des framgents d'origine divserses sans qu'ils ne soient dégradés.  [...]

[Biologie Moléculaire] Pcr

Je ne comprend pas bien ta question. Pour construire un plasmide recombiannt tu as besoin de ta séquence d'intêret c'est à dire celle que tu veux intégrer dans le plasmide. Tu l'obtiens en l'amplifiant par PCR ou en digerant directement ton ADN par une enzyme de restriction.  [...] Ton fragement d'intêret peut possèder plusieurs sites de restriction spécifiques à l'enzyme utilisée. on obtient alors plusieurs fragments d'ADN dont un seul comprend le gène d'intéret. L'ADN plasmidique ne doit contenir qu'un seul site de restriction spécifique, au sein d'un gène de sélection.  [...]

[Biologie Moléculaire] Construction d'une banque d'ADNc

Ta banque ne contient pas des cellules. tu te fiches des cellules en gros. Ta banque contient les fragments de ton ADN d'intérêt insérés dans des vecteurs (plasmides, cosmides, YACs, BACs,...). Donc, non, ta banque n'est pas détruite. les cellules portant les vecteurs sont détruites, mais tu le fais dans le but d'extraire ces vecteurs justement Donc, si tu veux utiliser l'ADN contenu, tu peux.  [...] Beh, tu introduis dans des bactéries pour obtenir une quantité de plasmides élevée et puis tu extraies cet ADN. Mais le truc est que ta banque n'est pas les cellules, ta banque est toutes les copies des fragments d'intérêt que tu souhaites (représenté chacun une 10aine de fois, je crois, pour être certain que tout le génome est couvert).  [...]

Enzymes de restriction

On étudie l'ADN 16s par PCR, puis électrophorèses des fragments d'ADN obtenus grâce aux enzymes. On a alors les résultats de l'électrophorèse (pour une bactérie) avec différentes enzymes de restrictions. Puis on nous demande l'intérêt de la technique puis pourquoi il est intéressant d'en utiliser plusieurs.  [...] J'ai effectué des recherches sur internet mais je ne vois ce que l'on veut nous faire dire... En espérant que ce soit plus clair pour vous, car pour moi, c'est toujours le flou complet.  [...]

[Biologie Moléculaire] Southern blot !!!

je ne crois pas que l'adn de saumon soit en quantité saturante. Il ne faut pas oublier que ton fragment d'intérêt a migré sur un gel, et est donc concentré sur une petite surface, ce qui n'est pas le cas de l'adn de sperme. Je seche un peu quand même parce que c'est plus vraiment une technique d'actualité.  [...] le but de la sonde est de detecter l'adn d'interet, alors pourquoi la préhybridation vu qu'elle va s'hybrider avec notre adn recherché.  [...]

La PCR fragments d’adn

Bonsoir, j'aimerais savoir de quelle origine provient les fragments d'adn utilisés pour la pcr comme je sais que la police s'intéresse à l'adn non codant pour authentifier un individu. Ça serait paradoxal d'utiliser des fragments dadn codants.  [...] Mais lorsque que l'on dit que la police s'intéresse à l'adn Non codant, logiquement ce sont les des fragments d'adn Non codant qu'ils utilisent pour la méthode de la pcr (en suit l'electrophorèse).. sinon a quoi cela servirait de dire qu'ils s'intéressent uniquement à ce type d'adn.  [...]

Mutagénèse insertionelle : gene-trapping

Dans quelques jours j'ai une présentation à faire sur les souris KO et donc je vais parler des techniques de mutation par insertion de fragments d'ADN exogènes dans un gène d'intérêt dans les cellules ES.  [...] Mais quand on utilise un vecteur plasmidique, comment peut se faire l'intégration Car pour les transfections stables classiques, on flanque notre séquence à insérer par des séquences homologues et le tour est joué, mais là, il n'y en a pas, et il ne peut pas y en avoir, donc.   [...]

[Biologie Moléculaire] Vecteurs d'expression

Je voudrais savoir quel est l'intérêt de cloner des fragments d'ADN dans une orientation inverse de celle des promoteurs présents ou dans la même orientation Je ne sais pas si c'est très clair.  [...] l'autre cas ou l'on met la séquence sans promoteur ou dans le sens inverse permet d'amplifier seulement le fragment d'ADN si l'on ne souhaite étudier que ça, ( la protéine pouvant être toxique pour l'organisme transformé).  [...]

Random priming

En cours, notre prof nous a présenté ça comme étant une technique de sélection par hybridation de gènes d'intérêts à partir d'une banque d'ADN (par exemple).  [...] Ok, mais quand bien même, comment sais-t-on que nos amorces vont s'hybrider spécifiquement sur le gène que l'on cherche à sélectionner et pas ailleurs Le but étant, si j'ai bien compris, d'utiliser d'utiliser des marqueurs radioactifs ou fluorescents pour distinguer le gène d'intérêt des autres fragments d'ADN.  [...]

[Biologie Moléculaire] révélation RFLP

SI c'est une simple RFLP, je ne vois pas l'intérêt de la sonde. Une fois la digestion par l'enzyme effectuée, une simple migration sur gel d'agarose avec un argent marquant l'ADN devrait suffire à visualiser les fragments et à donner une bonne idée de leur taille.  [...] En fait, tout dépend de ce que tu veux faire avec ta RFLP, si c'est visualiser une différence de nombre de fragments ou de taille de fragment (différence de taille de l'ordre de quelques dizaines de paires de base, en-dessous ça devient peut-être plus délicat) ce que j'énonce doit fonctionner.  [...]