• Forum - Fragments, ADN, Enzymes

[Biologie Moléculaire] activite enzymes de restrictions

1) si la présence de site de restriction est aléatoire, expliquer en détaillant les calculs, combien de site de restrictions sont théoriquement présent sur ces 20µg d'ADN pour chacune de ces enzymes.  [...] 2) si l'on veut générer des fragments de 1000pb lors des 2 digestions indépendantes par ces enzymes, expliquer quel est le pourcentage d'ADN que l'on doit couper.  [...]

[Biologie Moléculaire] enzyme de restriction pourquoi elle ne clive pas tout les ADNs ?

j'ai une question pourquoi les enzymes de restrictions ne clive pas tout les ADNs par exemple HindIII ne clive pas l'ADN d'une cellule du foie humaine alors que pour l'ADN de phage lambda elle le clive en libérant plusieurs fragments comment ce la ce fait il.  [...] _ Ou alors, le motif est bien là mais il est modifié chimiquement et n'est donc pas accessible à l'enzyme. Par exemple l'enzyme ECORI vient de la bactérie E. coli et coupe de cette façon. G/AATTC. Ce motif existe pourtant dans l'ADN de cette bactérie. Pour éviter qu'elle ne coupe son propre ADN, les motifs GAATTC de E.  [...]

[Génétique] Dm sur la myopathie de Duchenne

l'analyse du document 2 permet de voir que les enzymes de restriction coupent l'ADN en reconnaissant une séquence particulière de désoxunucléotides, les fragments n'ont donc pas la même taille. Les fragments obtenus sont plus petit 1,3kb. L'allèle muté est mis en évidence.  [...] Imagine que ton enzyme reconnaissent la séquence. ATTGTT, que l'on trouve dans un allèle 1. Si l'allèle 2 est muté et possède à la place ATTCTT, l'enzyme ne coupera pas à cet endroit, alors l'enzyme permettra d'obtenir des fragments d'ADN de taille différente selon que l'allèle possédé par l'individu.  [...]

[Biochimie] PCR & Southern Blot

Non pas forcément, comme le disait wishangel, tu peux faire migrer ton ADN sur gel d'agarose avec du BEt et visualiser tes fragments sous UV.  [...] Si, si tu le fais migrer en même temps qu'un marqueur de poids moléculaire = mélange de fragments d'ADN de taille connue (cela peut être un ADN de ta collection digéré par des enzymes à ta convenance).  [...]

Carte de restriction d'un plasmide

Des digestions avec une ou 2 enzymes sont réalisées, les produits de la digestion sont soumis à une électrophorèse. On dtermine pour chaque puits le nombre et la taille des fragments de restriction par comparaison avec la migration de fragments d'ADN de taille connue. Les résultats sont dans le tableau suivant.  [...] Puis tu fais de même avec BalI. A force de recoupement, tu devras normalement te rendre compte qu'il ne peut y avoir qu'une position pour BamHI vis-à-vis de BalI et EcoRI. Tu pourras alors passer au trois fragments avec PstI.  [...]

[Biologie Moléculaire] TP digestion ADN par enzymes de restriction par électrophorèse sur gel d'agarose

J'ai fais une extraction d'ADN puis je l'ai mis en présence d'enzyme de restriction ( c'est le TP basique avec les enzymes BamHI, EcoRI, HindIII) c'est de l'ADN de phage lambda cependant comment savoir si l'ADN a été digéré par élélectrophorèse sur gel d'agarose car j'observe plusieurs fragments mais je comprends pas trop si quelqu'un peut m'éclairer merci infiniment.  [...] Bonjour, merci. Oui bien entendu je sais ce qu'est une enzyme de restriction. Une enzyme de restriction reconnait un site de restriction généralement palindromique sur l'ADN une fois reconnu elle clive. Alors j'utilise un ADN de phage lambda c'est de l'ADN circulaire il me semble mais qu'elle est le rapport avec la migration et oui je sais aussi c'est quoi l'électrophorèse sur gel d'agarose c'est la migration de fragments d'ADN ( dans mon cas) du fait qu'on exerce un champs électrique l'ADN étant chargé négativement va migré du coté positive au niveau de la matrice d'agarose les fragments les plus courts migreront plus vite et plus rapidement mais sa m'aide pas pour l'analyse car on a des bandes linéaire et non pas circulaire.  [...]

[Génétique] AFLP Amplified Fragment-Length Polymorphism

J'essaye de comprendre cette technique (AFLP) et d'après ce que j'ai lu. l'ADN génomique est digéré par deux enzymes. Des adaptateurs sont ajoutés aux extrémités des sites de restriction. Les amorces peuvent ensuite se fixer sur les fragments obtenus et ceux-ci sont amplifiés.  [...] La PCR peut être réalisée en plusieurs étapes. une première avec des amorces dont la séquence est identique à celle des adaptateurs et qui amplifie ainsi tous les fragments. la seconde avec des amorces possédant de 1 à 3 nucléotides supplémentaires en 3' sélectionnant ainsi un plus petit nombre de fragments étant donné que ceux ci peuvent être très nombreux.  [...]

[Biologie Moléculaire] Electrophorèse

Il faut déterminer le nombre de fragments de restriction et leurs tailles pour l'hydrolyse des 2 ADN (ADN1 et ADN2) par les deux enzymes (BamHI et XhoI).  [...] Ensuite, ton décalage se situe au niveau des tailles des fragments, c'est ça Ce que tu devrais penser à faire c'est regarder où se situerait un site sur ADN1 en comparaison avec ADN2 (lequel est ta référence ).  [...]

[Biologie Moléculaire] Enzymes de restriction sur plasmides- Digestion complète et incomplète

Par exemple, pour un plasmide ayant 3 sites de coupures, le nombre de fragments attendu (théorique) est de 6 si l'on considère tout les fragments possible et imaginable. Mais dans le cas d'une digestion incomplète, comment savoir s'il y aura 1 seul site ou 2 site qui seront impliqué dans la digestion du plasmide.  [...] dites moi svp comment peut on trouver le nombre de fragments d'ADN produits lors d'une double digestion du plasmide pCR-gai par les enzymes de restriction HindIII et EcoRI et leurs tailles respectives.  [...]

La PCR fragments d’adn

Tu concentres, et tu fais ta PCR. Il peut être bon de couper l'ADN préalablement par une enzyme de restriction pour avoir des fragments plus courts avant la PCR.  [...] Donc la pcr fait intervenir des fragments d'adn Codant ou non codant ou peu importe En effet comme tu l'as dit, il serait plus légitime d'utiliser l'adn Non codant pour authentifier un individu.  [...]