• Forum - Fragment, ADN, Bactéries

[2nde] L'ADN...

Moi j'ai pensé. La fonction initiale du fragment d'ADN est de multiplier le nombre de bactérie. Non elle n'est pas la même après transfert puisque ça a permis la multiplication de ces bactéries.  [...] Le fragment d'ADN code pour la protéine transformée, il rend les bactéries fluorescentes (vertes) sous les UV et permet de reconnaitre les bactéries transformées des autres non transformées.  [...]

[Génétique] Génétique des procaryotes L1 exercice transformation/distance génétique

On prépare à partir de la souche donneuse un fragment d'ADN contenant les 3 gènes à partir de la souche donneuse et on suppose que 100/100 des bactéries receveuses ont reçu l'ADN de la souche donneuse.  [...] Nos simples recombinants sont leu+/met+ ( ils ont acquis le marqueur leu de l'adn exogène mais pas le marqueur met) donc pour les séléctionner, il suffit de mettre nos bactéries transformées sur MM+glucose+tous les a.a sauf leu et sauf met. On arrive alors grace a ce milieu a ne conserver que les met+leu+.  [...]

PCR sur colonie après insertion chromosomique... ?

Aujourd'hui en TP, j'ai fais une électroporation d'un fragment d'ADN linéaire dans des bactéries (DY330, ayant un système RED augmentant l'activité de recombinaison homologue).  [...] Mais on nous demande ensuite de réaliser une PCR sur colonie pour analyser les transformants. Le primer direct s'hybridera sur la séquence codante de la protéine (côté génome bactérien), tandis que le primer reverse s'hybridera sur la séquence TAP (fragment inséré).  [...]

[Biologie Moléculaire] Clonage avec plasmide

Ainsi, en ajoutant de l'ampicilline au milieu, seules celles avec un vecteur survivent. Vous sélectionnez les bactéries transformées, pas nécessairement celles qui contiennent votre fragment d'ADN d'intérêt.  [...] Ce sont les mêmes. Si vous souhaitez cloner dans le site BamHI d'un vecteur et que votre fragment d'ADN ne porte pas de site BamHI, vous allez créer des amorces PCR contenant NNNNNN-BamHI-extrémité5'dufragment et NNNNNN-BamHI-extrémité3'dufragment (antisens) Votre fragment amplifié sera NNNNNN-BamHI-fragment-BamHI-NNNNNN et vous pourrez générer votre fragment avec des extrémités BamHI libres qui pourront liguer avec celles de votre vecteur.  [...]

[Biochimie] Gateway technologies

Pour commencer tu réalise une première recombibaison avec ton entry vector et ton fragment d'ADN d'intérêt flanqué des attb1/2.  [...] TU places ton fragment dans l'entry clone et tu étale ça sur LB-kanamycin. La réaction provoque l'xcision du gène ccdb, léthal pour tes bactéries, donc les colonies que tu vois pousser ont forcément eu le ccdb excisé, donc ton ADN à la place -. Proficiat.  [...]

[Biochimie] Question sur la biotechnologie

Mais... si ces milliers de clones dérivent tous du même gène, on aura juste ce fragment de gène en milliers d'exemplaires, non pas tous les gènes. A moins d'avoir des milliers de clones différents, et ceux en plusieurs exemplaires pour pouvoir réaliser la méthode de séquençage de Sanger (nécessité de pleins de clones identiques) pour pouvoir reconstituer les séquences au nucléotide près. Est-ce exact.  [...] Dans une banque tu as de nombreux clones différents. Ceux identiques sont ceux qui forment une colonie (=un clone) sur ta boîte (car il faut des millions de bactéries pour former quelque chose de visible à l'oeil nu). Sur une boîte de Petri tu peux avoir des centaines de colonies qui correspondent à un fragment d'ADN unique au sein de la banque.  [...]

Pb sur un exercice sur l'ADN

Par des méthodes chimiques, on extraits des souris S un acide nucléique,l'ADN. Cet ADN est mis en contact in vitro, avec des bactéries R.Ces dernières sont injectés à des souris. chaque souris meurt de pneumonie et on retrouve dans son corps des bactéries S.  [...] La bactérie transformée a trouvé dans son environnement un fragment d'ADN provenant d'une autre bactérie, l'a internaliséet ntégré a son propre ADN.  [...]

Expériences en génétique…

J'ai donc un peu repondu de travers à la question en expliquant comment recuperer un gène introduit dans une bactérie grace à un plasmide. Dans ce cas là, comme on connait le plasmide, il n'y a pas à chercher à identifier le gène. On connait la taille du fragment de restriction, c'est tres simple.  [...] Les gènes de résistance aux antibiotiques portés par ces plasmides naturels ont été caractérisés il y a un bout de temps, et on les utilise maintenant pour sélectionner les bactéries ayant reçu le fragment d'ADN voulu.  [...]

[Biologie Moléculaire] Transformation chez la bactérie ?

Je voudrais savoir après qu'une bactérie ait été rendue compétente, comment le fragment d'ADN est intégré dans le chromosome bactérien.  [...] Mais pour être sûr d'avoir bien compris, quand il s'intègre par hasard (donc pas de recombinaison homologue) cela signifie que si le chromosome bactérien a une taille de 100 bp (je sais que c'est beaucoup trop petit mais cela n'a pas d'importance ici) et que le fragment d'ADN à incorporer possède une taille de 10 bp, alors la taille finale sera de 110 bp (et non de 100 bp comme cela serait le cas s'il y avait recombinaison homologue).  [...]

[Evolution] Evolution de la reproduction aséxuée

Bien que ne disposant pas de la reproduction sexuée, les bactéries disposent de moyen d'echanger des fragments de gènes et donc de propager leurs évolutions. Trois mécanismes interviennent principalement.  [...] je me suis toujours demandé si toutes les bactéries agissent comme tu l'as cité. Existe t il des formes n'échangeant jamais de matériel génétique Selon Herman Muller une espèce purement asexuée devrait accumuler des muations le plus souvent délèteres jusqu'à son extinction.  [...]