• Forum - Fonction protocoles saturation membrane bsa

Saturation BSA pour purif de protéine His-tagged

Donc je me demande si on ne pourrai pas enlever ce bruit de fond (qui ne doit pas partir totalement car les protéines sont surexprimées mais qui doit quand même fortement diminuer) en saturant la résine avec 1% BSA avant l'incubation avec les échantillons.  [...] Salut, donc apparement en suivant sans intervenir (n'étant pas encore familier avec les protocols) ce serai un probleme de liaison aspécifique entre ta protéine et ta colonne que tu as globalement réglé en saturant à la BSA.  [...]

Problème de traduction publication.

Microbial cDNAs are then selectively captured by hybridization to biotinylated microbial genomic DNA that has been prehybridized with blocking microbial ribosomal DNA (rDNA) fragments.   [...] On parle ici d'ARNr bloquants car, comme dans toute hybridation (ELISA, Western, Southern...) on previent toute liaison non specifique en saturant les sites de fixation aspecifiques avec des generiques (proteines de lait ou BSA pour ELISA et Western, ARNr ici).  [...]

[Biotechnologie] Ogm

Il y a belles lurettes que je n'ai plus fais d'elisa à la main donc là je n'ai plus de protocole précis. Pour les PCR c'est assez simple. Un mix 10 mM dNTP, BSA 1µg/µl, une paire d'oligos nucléotides dirigés contre votre gène d'intérêt (un sens et un anti sens), pour des 20 mer on mets 5 ng/µl.  [...] Vous mettez tout cela ensemble dans un tube et en route pour le thermocycler pour entre 25 et 40 cycles. Le réglage dépend de vos oligos et de vos attentes. Classiquement on a un préchauffage à 95°C durant 2-5 minutes. Puis les cycles (dénaturation 95°C 30 secondes, hybridation 60°C 30 secondes, et élongation 72°C 30 secondes).   [...]

[Biochimie] Dilution en cascade

Je doit réaliser une gamme étalon de la protéine standard BSA (Bovin Serum Albumin) pour doser les protéines de mes échantillons avec la méthode.  [...] Ben dans ce cas là tu prends ta solution solution mère à partir du tube précédent. C'est à dire que tu commences tout d'abord par créer ton tube 5 puis pour faire ton tube 4 tu prélèves dans le tube en l'utilisant comme solution mère puis tu complètes avec du PBS jusqu'à avoir un volume final de 100 uL.   [...]

Lait, hormone de croissance et cancer

Et de toute façon les protéines en question sont intéressantes pour leurs acides aminés, par pour leur fonction en elles mêmes (il n'y a pas de transporteurs à l'IGF dans le système digestif et elle ne passe pas par diffusion passive).  [...] Vous ne pensez quand même pas que le système digestif n'a aucun effet sur ces protéines ingérées (sachant que sa fonction principale est justement de dégrader les protéines).  [...]