• Forum - Fonction, Promoteur, Expression

enzymologie microbienne

salut à tous j'ai une petites question à vous posé et si quelqu'un peut me rependre, ça sera un grand plaisir, donc je veux juste savoir quels sont les stimulateurs qui induisent une production efficace des enzymes et qui sont introduits génétiquement dans les micro-organismes.....merci d'avance votre repense.   [...] C'est très variable en fonction du promoteur contrôlant l'expression du gène... En principe c'est un promoteur fort et constitutif, et ce qui joue c'est plutôt de mettre la bactérie dans un milieu optimal.  [...]

Faire suivre une promoteur eucaryote et procaryote

Dans la construction du plasmide il est précédé du promoteur du CaMV 35S. Cependant pour réaliser la selection des bactéries transformé puis des cellules végétales transformé, on a besoin de l'expression de NPTII à la fois dans les bactéries et les cellules eucaryotes.  [...] Ma question est donc a-t'on pu laisser le promoteur procaryote initiale de NPTII, précédé du promoteur eucaryote 35S pour avoir une expression dans les deux situation, cela fonctionnerai t'il d'avoir deux promoteur qui se suivent Où a t'on simplement fait deux copies du gène NPTII, un avec son promoteur initiale l'autre avec le 35S.  [...]

[Biologie Cellulaire] Comment, après transgenèse à l'aide d'un adénovirus, le gène épisomal, non réplicatif est répliqu...

Non. L'intégration est un mécanisme liée au virion. Le promoteur est une séquence non codante d'ADN qui permet de favoriser la transcription du gène, donc son expression, indépendamment de son intégration.  [...] Je dirais que sans promoteur, et ceci est valable pour tout gène (ou presque, comme toujours en biologie), l'expression du gène, donc les niveaux d'ARN sont quasi nuls, et les niveaux protéiques en conséquence encore plus faibles. Un promoteur est indispensable à l'expression d'un gène pour avoir un effet physiologique.  [...]

Différence shARN, miARN et siARN

shARN = transfection stable, ils s'intègrent dans le génome de la cellule hôte (avec possibilité de le mettre sous le contrôle d'un promoteur donné pour réguler son expression).  [...] mais je ne vois pas le lien entre la pol. de l'Aquaporine et celle du sh, a moins que tu parles d'exprimer un sh sous le contrôle du promoteur de l'aquaporine Il n'y a pas de raison que ça ne soit pas possible, j'ai juste eu quelques lectures précisant que l'expression d'un sh est plus performante avec un promoteur polIII que polII (mais ça fonctionne avec un promoteur polII, comme le CMV par exemple, donc pas de raison).  [...]

[Biologie Cellulaire] Plasmide eucaryote/bactérien dans une lignée cellulaire

Tous les promoteurs eucaryotes ne sont pas identiques certains fonctionne chez d'autres espèces (en général ce sont des gènes issus d'organismes pathogènes) mais selon mon expérience la plupart du temps ça ne marche pas. C'est pourquoi on utilise des plasmide dit d'expression qui ont un promoteur et un terminateur plus ou moins fort en fonction de ce que tu veux faire voir même inductible, provenant en général de l'organisme hôte.  [...] Sinon c'est un gène humain, je sais que le promoteur naturel est assez fort mais quand je transforme une lignée cellulaire avec un plasmide bactérien (donc sans origine de réplication eucaryote) contenant ce gène je n'observe aucune expression. Je cherche donc a savoir si le problème vient du vecteur bactérien ou non avant de me lancer dans le clonage du gène dans un vecteur eucaryote.  [...]

[Biologie Moléculaire] mutation génétique

Si l'amplification fonctionne sur l'ADN génomique et bien je remettrais en cause l'expression transcriptionnel de l'ARN et probablement une mutation sur le promoteur et/ou les éléments régulateurs qui contrôle le CDNA mais sa n'expliquerais toujours pas pourquoi une partie de l'ARN est plus transcrite qu'une autre (le segment 11) et est ce que cela est possible dans la nature, transcrire un exon plus qu'un autre sachant que les deux exons sont sous le contrôle d'un même promoteur.  [...] Peut-être que les exons moins transcrits sont les plus éloignés du promoteurs Dans ce cas, il y aurait des structures qui joueraient le rôle d'atténuateur de transcription.  [...]

[Biotechnologie] Composants d'un vecteur d'expression eucaryote

Merci mais je sais comment ça fonctionne. C'est un vecteur d'expression donc pourquoi vouloir un promoteur et pas de site polyA.  [...] Et sinon, on peut parfois trouver un intron dans certains vecteurs d'expression (entre le promoteur et le gène), je crois que ça augmente la capacité d'expression. Mais je ne crois pas que ce soit nécessaire.  [...]

[Microbiologie] Quorum Sensing

J'ai étudié le quorum sensing comme étant un systeme où un promoteur (X) va permettre la transcription d'un signal (gène I) (généralement un ephéromonr) et d'un récepteur (gène R). Quand le signal est en concentration suffisante (car suffisament de cellules dans le milieu) il se fixe au récepteur, ce qui a pour effet d'induire une forte transcription du promoteur X.  [...] Un promoteur permet l'expression d'un gène. le produit de ce gène peut être une molécule ayant des fonctions de régulateur, inducteur, etc. Mais un promoteur ne permet pas la transcription d'un signal. ce sont des raccourcis peu rigoureux.  [...]

[Génétique] Qu'est-ce qu'un clone provenant d'un YAC?

Je te rassure, je n'ai pas plus compris que toi le principe du YAC, je crois que l'essentiel est de le voir comme un plasmide ( attention, je n'ai pas dit que c'était un plasmide, je dis juste que pour la compréhension, c'est plus simple ) qui apporte l'insert en question, le gene que tu souhaites cloner.   [...] Oui exactement, les Yacs fournissent une alternative aux systèmes bactériens pour le clonage ou l'expression de gènes eucaryotes. Ils peuvent véhiculer de grands gènes eucaryotes, avec promoteur(s) et séquences de contrôle, et conviennent donc pour étudier les fonctions des gènes.  [...]

[Biologie Moléculaire] Questions sur clonage

2/Comment peut-on obtenir une forte expression des gènes insérés dans un vecteur de clonage est ce en insérant plusieurs fragments.  [...] 2/si vous voulez obtenir une forte expression du gène il suffit de mettre un promoteur a forte expression (pCMV (promoteur du cytomegalo virus) par exemple).  [...]