• Forum - Fixation, Phénomène, Cellules, Expérience

fixation des cellules

La fixation par l'alcool entraine un phénomène de coagulation due a une déshydratation Le problème rencontré dans ce cas est que les lipides et les petites molécules sont extraites et que la déshydratation va modifier la morphologie des cellules et donc cette méthode de fixation es peut propice a l'utilisation pour les colocalisation ou les analyse au confocal.  [...] Je voulais savoir si la fixation au PFA pouvait entrainer un phénomène de nécrose cellulaire ou du moins l'amplifier J'utilise des cellules légèrement fragilisées avant l'expérience, mais j'observe ensuite une nécrose importante et quasi totale au confocal.  [...]

[Biologie Moléculaire] Fixation au Zinc

salut, j'ai une question. quel type de fixation tu as demandé fixation des cellules sur un Bio-support à la présence de zinc ou l'adjonction entre ces cellules à la présence de zinc.  [...] Désolé je n'ai pris ta question que dans le sens de la fixation des cellules sur un support et non à leur fixation telle qu'on l'entend habituellement (figer les cellules)... Je n'ai aucune hypothèse pour ce cas.  [...]

[Divers] [Pharmaco] Transformation de Scatchard

L'expérience consiste à mélanger 100µL de cytosol d'une préparation de cellules avec 50µl d'hormone radiomarquée (à une concentration variable selon les tubes) et 50µL de tampon (fixation totale) ou d'hormone hyperconcentrée (fixation non spécifique).  [...] Autre question au passage. en cherchant des exercices corrigés sur le net, j'ai vu de nombreux sites qui décriaient cette transformation en disant qu'elle décuplait les erreurs expérimentales et n'était donc pas fiables pour déterminer les Kd. Y a-t-il d'autres moyens de procéder pour les calculer, en évitant Scatchard.  [...]

[Biologie Cellulaire] Problème de reconnaissance de photos

Ce déplacement est révélé sous la forme de filament, ce qui est très logique finalement. Une personne de mon labo a déjà fait cette expérience, l'exposition ne durait pas moins de...6 mois. On peut donc en déduire que le déplacement de la molécule est extrêmement lent, mais il existe bien dans ces conditions cellules fixées, fixation toute relative.  [...] C'est en sachant ce qui a été marqué qu'on pourra passer aux interprétations. en l'état actuel, impossible de relier ces clichés à une étape de la vie cellulaire donc il faudrait que tu apportes des précisions supplémentaires qui sont certainement écrites dans l'énoncé.  [...]

[Immunologie] utilisation du paraformaldéhyde

Pour moi, il n'y a pas de différence entre les 2 techniques tant que le formaldéhyde est à la même concentration. Et la seule différence est la présence de méthanol pour la stabilisation du formol... or le méthanol est également utilisé pour la fixation de cellules (donc même application que le formaldéhyde).  [...] d'apres mon expérience le résultat sur la fixation de cellules en vue d'immunomarquage est très différent entre la préparation poudre qui je te l'accorde est pénible et la pfa 37%. c'est en général bien mieux à partir de la poudre surtout pour les cellules humaines.  [...]

[Biologie Moléculaire] Deux bandes en PCR

Sinon le but de l'expérience est purement de l'apprentissege technique pour qu'on soit capable de faire un southern.. A partir d'un plasmide ou d'ADNgénomique on fabrique les sondes..(Dans le reste du TP on transfecte des cellules avec PPAR, RXR un plasmide raporteur qui contient les séquences de liaison au PPAR, ou avec une séquence que l'on veut tester quant à la fixation de PPAR.  [...] Sinon le prof n'est pas d'accord avec la théorie d'une migration foireuse...Mais comme je vous le dis moi je n'ai vraiment pas assez d'expérience pour en dire quoi que ce soit.  [...]

[Physiologie] Propriétés électriques des membranes

La technique de mesure de l'exocytose par suivi de la capacité membranaire (Cm) a notamment été menée intensivement dans des cellules neuroendocrines (cellules béta du pancréas ou cellules chromaffines de la médullosurrénale) ou du système immunitaire (mastocyte) qui présentent par rapport aux neurones l'avantage de présenter des géométries simples (sensiblement sphériques et de taille réduite), qui favorisent une fixation spatialement homogène de la tension expérimentalement appliquée ( space-clamp ).  [...] à l'inverse, des cellules aux géométries complexes (ex. certains neurones très ramifiés) ou de grandes dimensions (ex. certaines cellules musculaires) rendent la fixation spatiale de la tension difficile (effet de câble) qui expliquent la difficulté d'y mesurer précisément les variations de Cm.  [...]

Osmose (Biologie/chimie)

D'après votre expérience, n'observerait-on pas plutôt des désordres dans la morphologie des cellules à l'observation des coupes colorées plutôt que des fissures extracellulaires (si le fixateur a provoqué des contractions au moment de la fixation).  [...] Désordre dans la morphologie cellulaire, probablement. Les fissures pourraient être dues au fait que les contractions mettent le tissu sous tension et que le passage dans les divers alcools puis le paraplast accentuent le phénomène. Les fissures se formeraient secondairement dans le tissu sous tension au moment où il est devenu cassant.  [...]

[Biochimie] Action du formol dans la conservation

Lors d'expériences in vitro, sur des lysats cellules fixées au formaldehyde, pour obtenir un pontage ADN-protéines, apres purification des protéines, la fixation est réversée en chauffant les echantillons 5h (ou O/N) à 65°C.  [...] Ensuite, pour l'action du formol sur les cellules, cherche sous google avec des mots clé comme formaldehyde fixation, ou formaldehyde crosslinking.  [...]

Les questions fondamentales en biologie - Page 2

Pour le coup, il vaudrait peut-être mieux parler de hasard que de nécessité, non Et que vient faire la gestion interne de l'assemblée cellulaire alors que la fixation est un phénomène qui concerne des populations d'individus, pas l'individu lui-même.  [...] Quetzal, sorry de rectifier ton propos. D'abord, il faut savoir ce qu'on entend par propriété de la MQ. Il existe les propriétés formelles, les propriétés théoriques servant à interpréter les expériences et le domaine empirique de la mesure quantique. En fait tout est imbriqué mais si tu fais allusion à l'expérience, alors celle-ci inclut le dispositif de mesure (interprétation canonique de 1927).  [...]