• Forum - Fixation, Molécules, ADN, Fusion

[Biologie Moléculaire] qPCR

Ce phénomène serait-il dû à une saturation du milieu réactionnel en Sybr Green, qui inhiberait la fixation correcte des molécules de Sybr Green sur les doubles brins d'ADN pendant l'établissement de la courbe de fusion.  [...] La fixation du SybrGreen sur la molécule d'ADN est en fait encore à l'heure actuelle assez peu connue, il y a des effets qu'on ne soupçonnait pas comme une préférence de site de fixation (S. Giglio, P.T. Monis, C.P. Saint, Demonstration of preferential binding of SYBR Green I to speciWc DNA fragments in real-time multiplex PCR, Nucleic Acids Res. 31 (2003) e136.).  [...]

[Biologie Moléculaire] Température de fusion de l'ADN (Tm)

Voilà en fait je dois savoir expliquer selon quoi varie la Tm d'une molécule d'ADN... Je sais que ça dépend de la molécule elle même (% nucléotides), et du milieu dans lequel elle se trouve (concentration en ions, etc.).  [...] Il suffit de voir les derniers articles sur cette question. la plupart des molécularistes mettent 55 ou 57°C en température d'hybridation même si leurs amorces devraient beaucoup plus haut.  [...]

[Biologie Moléculaire] extractiobn d'ADN plasmidique

J'ai eu un question dans le TP de biologie moléculaire dans ce qui conserne la méthode d'éxtraction de l'ADN plasmidique et la détermination de la température de fusion c'est que c'est quoi le rôle du sel dans la solution.  [...] La soude est ensuite neutralisée par de l'acétate de potassium (KAc) 1M en concentration finale (ajout de 1.5V d'une solution de KAc 3M.). Ceci induit la renaturation des macromolécules. L'ADN génomique et la plupart des protéines sont des molécules trop grosses pour retrouver leur conformation native et toutes ces molécules établissent des liaisons les unes avec les autres, formant un précipité blanchâtre Le plasmide étant petit il retrouve sa conformation native, est exclu du précipité et reste en solution.  [...]

[Biologie Moléculaire] PCR maîtrise de la Tm

De plus il dit qu'il ya moins de 5°C de différence de Tm entre les 2 amorces. C'est pas plutôt 5°C de différence entre la température de fusion de l'amorce et celle de l'ADN à amplifier.  [...] Sinon pour la température de fusion de l'amorce c'est ce que notre tuteur de chimie a écrit, il doit vouloir dire par là, la Tm de l'amorce qui doit être à 5°C près de la T° de l'ADN à amplifier.  [...]

[Biologie Moléculaire] Utilisation du PCR Rotor-Gene 6000

Il semble pouvoir faire ce qu'on appelle une High Resolution Melt, j'ai l'impression que cela sert au génotypage. Quelqu'un peut m'expliquer en quoi cela consiste.   [...] Cela permet en effet de détecter des mutations de quelques bases (et même de les localiser, si l'on a un témoin) dans une large molécule ADN, en se basant sur le fait que la molécule sera légèrement différente et donc la courbe de fusion en sera modifiée.  [...]

biochimie

A- Classer les molécules de DNA bicaténaire a, b et c par ordre croissant en fonction de leur température de fusion. Il s'agit de molécules constituées de la répétition des séquences suivantes.  [...] C- Donner le profil électrophorétique qui serait obtenu si on fait agir une autre endonucléase de restriction pour laquelle chacune des molécules (A et B) possède deux sites de coupure distants de 4000 pb.  [...]

Guerir les malades du SIDA? voici ce que je propose...

J'ai lu récement qu'une molécule trouvée aux Samoa forçait l'expression cellulaire du VIH et le rendait donc accessible aux Ac et traitements. Par contre je ne sais pas ou en est le dévellopement. (prostratine).  [...] Le ribozyme OZ I a la mission de protéger de la réplication virale les lymphocytes qui seront issus de ces cellules CD 34 +, en coupant l'ADN du VIH qui les infecterait, dans un endroit précis (situé dans les gènes vpr et tat). Une perfusion unique permet de coloniser la moelle osseuse du patient avec un pool de cellules souches qui empêcheront le virus de se multiplier.  [...]

[Biochimie] fecondation

D'après ce que j'ai compris, l'oeuf fécondée ou zygote est constituée de 2 pro noyaux haploïdes juste après la fécondation. Environ 12 après le début d'activation ovocytaire il y a réplication de l'ADN des 2 pro noyaux. Puis ce sont les mitoses qui s'enchainent.  [...] Un seul spermatozoïde féconde l'ovule. Le spermatozoïde fécondant pénètre dans le cytoplasme de l'ovule après fixation sur celui-ci, puis fusion des membranes plasmiques.  [...]

[Biologie Cellulaire] Transport sans mouvement de la membrane

j'ai pas bien compris comment se fait le transport passif sans perméase de la membrane plasmique..est-ce que les molécules qui viennent du milieu extracellulaire fusionnent avec la membrane plasmique pour passer au cytoplasme..dans ce cas le transport va consommer de l'energie alors que ce phénoméne se fait par simple diffusion sans consommation de l'energie.  [...] pour ce qui est de ta deuxieme question fusion des molec extracellulaire avec la membrane pour passer au cytoplasme alors que les conditions sont reunies pour que les molecules passent librement je ne te suis pas très bien qu'entends tu par fusion des molec avec la membrane pour passer au cytoplasme.  [...]

Trouver un vaccin

On a vu ce le mode d'attaque du virus, et sur quoi on pouvait le contrer (ie soit avant fixation sur l'acide cyalique, soit post-fusion, en empêchant les virions de ressortir).  [...] On inactive un virus en enlevant certains gènes important, ou en créant des mutations qui décalent le cadre, en insérant une séquence dans un exon, etc... tout ça dans le but d'inhiber sa multiplication (on peut agir à n'importe quel moment du cycle viral).   [...]