• Forum - Fixation, échantillons, Observation

Double fixation de l'échantillon pour l'observation en MET

Double fixation de l'échantillon pour l'observation en MET.  [...] Pourquoi fait-on une double fixation lors de la préparation des échantillons pour l'observation en MET.  [...]

comment simuler une cellule ?

Les échantillons doivent être absolument secs et ne comporter aucune trace d'eau. En effet, la pression dans la chambre d'observation est très faible et les molécules d'eau contenues dans l'échantillon risqueraient de détruire les cellules en s'évaporant ou de polluer la chambre d'observation.  [...] Et l'observation topologique ne necessite pas de fixation (pas que je me souvienne, mais si je me souvenais de tout ce que j'ai fait dans tous mes TP sur les 5 ans de fac..., j'ai pu oublier une partie ^^) ducoup si le seul point important est la deshydratation, il en va de même que pour le pollen pour les plantes reviviscentes par exemple (elles perdent toute leur eau mais sont toujours vivante) il serait donc possible de les observer en microscopie electronique aussi (bien sur on reste dans la ME balayage, transmission je ne pense effectivement pas que ca soit possible de conserver un échantillon vivant).  [...]

Vocabulaire (fixation)

Je tiens à apporter un petit supplément à la réponse de Piwi. On peut aussi fixer les cellules avec l'éthanol. Ce type de fixation est surtout utilisé lorsqu'on fait des colorations de Gram pour que les bactéries restent sur la lame lorsqu'on fait les différentes étapes de coloration.  [...] Relis mon message. Je n'ai pas dit qu'on ne pouvait pas fixer à l'alcool. J'ai simplement rapellé qu'il y a d'autres techniques de fixation et que le rôle pricipal de l'éthanol, dans une coloration de gram, ce n'est pas de fixer mais de décolorer la bactos.  [...]

division cellulaire

Donc la division cellulaire commence par la phase S d'interphase, lors de cete phase de réplication, l'adn va se dédoubler pour former un nouvelle molécule d'adn, l'observation au miscroscope electronique de l'interphase à monter qu'il existait des yeux de réplication, ou des fourche en forme de Y qui permet la duplication et la fixation de la molecule ancienne et neoformé par le centromére.  [...] l'observation au miscroscope electronique de l'interphase à monter qu'il existait des yeux de réplication, ou des fourche en forme de Y qui permet la duplication et la fixation de la molecule ancienne et neoformé par le centromére.  [...]

[Biologie Cellulaire] microscopie electronique a transmission

Pourquoi ne peut on pas observer de materiel biologique vivant au MET.   [...] Il y a une fixation au métal avant l'observation, tout trépasse donc... Et en fait c'est l'emprunte métallique qui est visualisée. Pour du vivant il faut faire de la microscopie a force atomique. Le top.  [...]

[Biologie Cellulaire] Milieu de montage Pour discovery

(dans certain cas, je peux utiliser des lames Labtech sur lesquelles les cultures poussent directement mais là n'est pas la question). Cette machine va automatiquement faire tous les bains, rinçages et incubations propre à un protocole d'IHC ou ICC. J'utilise actuellement du milieu de montage Entellan, à base de solvant type toluène, que je laisse secher au moins 24H à t° ambiante avant de mettre le tout dans la machine.   [...] Mon problème réside dans le fait que ce montage n'est pas très fiable d'une lame à l'autre. le milieu se rétracte parfois au séchage, et peut être à l'origine d'un effet de flou à l'observation des échantillons au microscope.  [...]

[Biotechnologie] cytométrie de flux/épifluorescence

la cytometrie de flux est une technique qui permet de détecter la taille, la granulosité d'une cellule ainsi que la fluorescence de protéines cellulaires (protéines fluorescentes comme la GFP ou marquées avec un anticorps couplé à un fluorochrome) ou de l'ADN (ex intercalant fluorescent de l'ADN).   [...] Un microscope à épifluorescence est un microscope muni de faisseaux laser, qui permet l'observation d'échantillons tels que des cellules possédant des protéines fluorescentes comme la GFP ou marquées avec un anticorps couplé à un fluorochrome.  [...]

Osmose (Biologie/chimie)

D'après votre expérience, n'observerait-on pas plutôt des désordres dans la morphologie des cellules à l'observation des coupes colorées plutôt que des fissures extracellulaires (si le fixateur a provoqué des contractions au moment de la fixation).  [...] Encore une toute toute petite question. auriez-vous un avis ou une suggestion à me faire quant aux choix des temps utilisés dans la procédure de fixation-enrobage et inclusion.  [...]

Achat d'un microscope.

J'aimerais faire l'acquisition d'un microscope pour observer et découvrir étant en 1ère STL il m'arrive souvent de faire des observations et préparations cependant j'aimerais aussi apprendre en même temps donc si vous.  [...] Que vous lez observer en amateur il faut avoir conscience que l'observation au microscope requiert des préparations particulières des échantillons rarement accessibles hors d'un laboratoire de recherche. Regardez un peu la fonction rechercher du forum, vous trouverez une myriade de sujets identiques, avec des nombreux conseils déjà.  [...]

Différence de fixation des cellules

Au cours du protocole, on a transfecté un vecteur codant pour GFP-MAP2c. Pour la préparation des lames, on a utilisé deux modes de fixation, un à l'éthanol, et l'autre au PFA. Lors de l'observation au microscope à fluorescence, on ne visualise pas du tout la même chose.  [...] Ca me parait dangereux de formuler cela comme ca. Si on ne voit pas la meme chose entre deux modes de fixation, il convient de reflechir a des methodes pour confirmer ou infirmer l'une ou l'autre des observations. C'est d'ailleurs l'ecueil essentiel de l'immunofluorescence.  [...]