• Forum - Extraction, ADN, Protéines

Na-bisulfite (NAHSO3) , rôle ???

Je ne l'ai jamais utilise dans le cas d'extraction d'ADN, mais dans le cas de purification/extraction de proteines. Il agirait comme anti-oxydant.  [...] Merci beaucoup pour votre réponse rapide... En effet, c'était bien pour l'extraction et la purification de proteines et non de l'ADN, désolé pour l'erreur.  [...]

[Divers] Intérêts du NaDOC, SS DNA, chelex, Tris Cl dans plusieurs expériences

Je réalise des ChIP (chromatin immunoprecipitation), et après extraction de l'ADN sur lequel les protéines ont été crosslinkées au formaldehyde, l'ADN est dans un tampon dit d'immunoprécipitation. celui-ci contient du NaDOC... à quoi cela sert-il.  [...] Je ne connais pas suffisement les protocoles que vous utilisez, cependant l'utilisation de Tris Cl sert milieu tampon. Il permet de conserver un ph régulier durant toutes vos expériences. Ainsi, travaillant avec de l'adn et des protéines, tous deux très semsibles aux changements de ph, vous évitez des dénaturations.  [...]

Immunoprécipitation de la chromatine

Le protocole donné est. extraction de l'ADN depuis la cellule puis isolation de la chromatine que l'on souhaite- on retire les protéines fixées dessus puis on séquence l'adn.  [...] Tu isoles les complexes formés Ac/protéine/ADN. Séquençage de l'ADN = tu peux identifier le site de liaison de ta protéine dans le génome.  [...]

Extraction d'ADN

Lors de l'extraction de l'ADN on a utilisé de la protéinase K afin d'éliminer les protéines contaminantes, ma question est. est-ce que protéinase K = protéine kinase.  [...] protéine kinase catalyse le transfert d'un groupe phosphate d'ATP sur l'hydroxyle (groupe -OH) des chaînes latérales des acides aminés. tandis que la protéinase K est une protéase végétale très active Elle hydrolyse les protéines de toutes origines en quelques heures.  [...]

[Microbiologie] extraction d'ADN

j'ai fait l'extraction d'ADN au phénol chloroforme je me suis rendue compte à la fin de la manipulation que le culot est chargé également en protéines pourrais je me rattraper.  [...] pour extraire t adn t peux faire une chromatographie avec une hydorxyapatite avec la forme minerale de phosphate en partant au depart par une cncentration faible puis pr eluer tn adn au augmente la concentration mais bon ça depnde aussi de la charge des autre proteines.  [...]

expérience Meselson et Sthal

dans cette expérience le suivi d'ADN après centrifugation sur gradient de ClCs,par spéctrophotmétrie d'absoption dans l'uv.  [...] Mais souvent on mesure également la DO à 280 également pour pouvoir estimer la contamination par les protéines (c'est valable lorsque l'on fait une extraction d'ADN par exemple).  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction ADN, ARN et protéines

Je voudrai savoir si quelqu'un connait une téchnique pour réaliser une triple extraction ADN ARN protéines.  [...] je souhaite réaliser une extraction ADN génomique sans kit. Je voudrais savoir si quelqu'un a un protocole qui marche avec une quantité de l'ordre de 50 à 100 ng d'ADN extrait pour faire une PCR ensuite.  [...]

[Microbiologie] extraction d'ADN

J'ai effectué une extraction d'ADN au phénol chloroforme après je m'aperçois que l'ADN n'est pas pur, autrement dit il y'a des restes des protéines et des lipides j'ai repris l'extraction à partir de phénol qui me permet de se débarrasser des protéines et le chloroforme pour éliminer les lipides, en mettant 2µL SUR GEL D'AGAROSE je n'ai pas obtenu de bande j'ai dilué le culot dans 50µl d'eau que dois je faire dois je prendre 6 µl de l'ADN sur gel ou bien dois je refaire la manipulation je n'ai pas envie de tout refaire je suis pressée mon encadreur m'a demandé de lui donner un compte rendu dans les plus brefs délais.  [...] Mais est-ce que tu as fais un dosage de ton ADN quelle est ta concentration il est possible que tu aies perdu ton ADN en refaisant ton extraction d'ADN.  [...]

Extraction ADN phenol : température de centri

Je pratique des extractions d'ADN méthode phénol-chloroforme sur des produits alimentaires (bien gras et bien protéinés. C'est d'ailleurs pour cela que je ne prends pas des systèmes de kits et colonnes).  [...] Mais si quelqu'un pouvais m'éclairer sur le rôle de la température (par exemple sur la séparation d'avec les protéines, mais aussi l'extraction préférentielle de l'ADN vs ARN peut-être) ce serai super.  [...]

extraction phénol chloroforme

L'extraction phenol/chloroforme (ou old school ) ne permet pas à elle seule de faire une extraction d'ADN. Il faut faire une lyse des cellules (lyse alcaline ou pk ou...) et d'autres étapes d'extraction/purification/précipitation/lavages peuvent être ajoutées.  [...] L'extraction phénol ne permet que de laver ton ADN préparé en le débarassant des protéines (jusqu'à un certain point)... reste plus qu'a faire une extraction chloroforme pour enlever le phenol qui est dissout dans la phase acqueuse.  [...]