• Forum - Extraction, ADN, Mélange

[Biologie végétale] Extraction de l'ADN d'un mélange de plantules

[Biologie végétale] Extraction de l'ADN d'un mélange de plantules.  [...] On fait un mélange de graines préparées à partir de 50 plantes. On les sème et on récolte les plantules avant d'extraire l'ADN du mélange.  [...]

[Biologie Moléculaire] problème de qPCR sur des échantillons de maïs

je cherche à mettre au point une méthode de quantification en Evagreen d'un champignon dans des échantillons de maïs cultivés en serre, et tout a bien marché (dessin d'amorces spécifiques, quantification d'ADN du champignon pur...) mais dès que j'ai voulu passer les échantillons de maïs, j'ai obtenu des résultats non répétables, avec des pics de fluorescence qui ne correspondent pas au champignon et surtout qui changent d'un jour à l'autre.  [...] Etant donné que lorsque l'on mélange de l'ADN du champignon pur et de l'ADN de maïs pur on n'a aucun problème, j'ai pensé qu'il y avait des composés dans mes échantillons qui inhibaient la qPCR, mais j'ai testé plein de méthodes d'extraction et de purification et rien n'y fait.  [...]

rDNA ou rRNA?

L'amplification a partir du rDNA me semble avoir plus d'avantage qu'a partir du rRNA. L'ADN est plus stable, moins degradés, ensuite il n'y a pas de RT necessaire, une etape en moins, sans parler de l'extraction d'ADN qui est souvent plus facile a faire.  [...] Et quand on fait la classique extraction d'ADN à partir de cellules vgales broyées, dans l'ethanol, l'amas floconeux plusoumoins chevelu c'est un mélange n'est-ce pas.  [...]

Extraction de l'ADN

[COLOR= Plum ]Bonjours,je voudrais savroir pour quoi au cours de l'extraction de l'ADN génomique d'Arabidopsis thaliana.aprés broyage du tissu et la mises de la solution de lyse,pour précipitation des protéines,on doit incuber le mélange dans une étuve et pour quoi exactement à 65°C [/COLOR ].  [...] Peut-être est-ce une température suffisante pour dénaturer les protéines partiellement tout en restant inférieur au Tm de ton ADN.  [...]

protocole d'extraction d'ADN

oui j'ai essayé mais ce que je trouve c des these de doctorat et la partie qui m'interesse il parle brievement de l'extraction d'ADN on a utulisé pour l'extraction la methode X... et quand je cherche la methode je n'y trouve rien, je vais ressayer encore une fois si je tombe sur quelque chose.  [...] Tout ce qui s'appelle miniprep midiprep ou maxiprep correspond à une extraction d'ADN plasmidique. Le lien que vous proposez est une méthode de miniprep. Il ne vous intéresse donc pas si vous cherchez à purifier l'ADN génomique.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction de l'ADN et digestion enzymatique

[Biologie Moléculaire] Extraction de l'ADN et digestion enzymatique.  [...] ci-dessous l'électrophorèse obtenue après l'extraction de l'ADN.  [...]

[Biologie Moléculaire] Transfo directe levure vers bactérie

J'essaye depuis quelques semaines de transformer de l'ADN de levure dans des bactéries électrocompétentes, commerciales(E.Coli) sans passer par la case extraction d'ADN levure.  [...] extraction ADN levure= 1h de lyticase + extraction en elle même.  [...]

recherche d'un contact par mail avec un laborantin

.. mais à mon avis le gros problème avec l'extraction d'ADN à la maison c'est les contaminations. Chez nous, malgré les précautions prises, ce n'est pas du tout rare alors dans une cuisine.  [...] Cependant, les méthodes d'aujourd'hui permettent (parfois) de sauter l'étape d'extraction de l'ADN. On passe directement à l'étape de PCR, où les cellules sont lysées et l'ADN libéré lors de la première étape. On peut donc diminuer ce temps à 6H (voir même à 4H en étant -très- pressé).  [...]

[Biologie Moléculaire] reactifs utilisés pour l'éxtraction de l'ADN et la PCR

Le TE c'est du Tampon d'Elution. Une solution saline isotonique qui sert à rediluer et conserver vos ADN une fois que vous les avez extraits. Il est souvent simplement remplacé par de l'eau.  [...] Alors pour les 94° pendant 5 minutes ça a deux fonctions. bien dénaturer tout l'ADN, et activer la Taq polymérase qui est rendue inactive artificiellement. Ca permet qu'elle commence a etre active uniquement au début du programme.  [...]

[Biochimie] TPE sur l'ADN

- l'extraction totale d'ADN. C'est celle que l'on effectue, par exemple, sur des prélèvements de sang ou des cellules de l'épithélium buccal).  [...] Je rajoute une petite précision sur ces extractions. elles sont souvent réalisées à partir de traces et ont donc un plus faible rendement. En cause. la faible quantité d'ADN et une plus ou moins bonne qualité (dégradation, mélanges, inhibiteurs de PCR, etc).  [...]