• Forum - Extraction, ADN, Kit

PCR sur pseudomonas aeruginosa

), extraire l'ADN avec phénol et chloroforme, extraire l'ADN en rajoutant une étape avec du CTAB tout en ayant déjà testé certains kit d'extraction commo le DNeasy tissue kit de QIAGEN...Le problème touche uniquement Pseudomonas aeruginosa dont l'ADN semble se détériorer avec le temps mais on ne parvient pas à trouver un meilleur protocole d'extraction d'ADN.  [...] De plus, mes PCR marchent de temps en temps et j'utilise une taq que l'on fait et que l'on traite nous-même à la DNase pour éviter d'avoir de l'ADN de E.coli, bactérie proche de Pseudomonas pour ces marqueurs. Le soucis, c'est que mes ADN sont très bien amplifiés juste après l'extraction mais, qu'un ou deux mois après, les réactions PCR sont plus faibles voire inexistantes, comme si l'ADN s'était déterioré, alors qu'on le conserve à -20°C. D'où mon désarroi.  [...]

[Biologie Moléculaire] Détection moléculaire des gènes de résistance chez staphylococcus

1-je cherche comment je peut conserver les souches de staphylococcus sur milieu gélose de conservation.. es ce que par pique ou ensemencement en surface.   [...] 2-A votre avis.. j'utilise quoi comme kit d'extraction d'ADN bactérien des staphylococcus kit rapide et fiable.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction d'ADN

je voudrais savoir combien ça coûte le kit d'extraction d'ADN. qiaamp dna blood mini kit (250) de qiagen.  [...] Si tu es dans un labo de recherche, contacte la personne chargée des commandes, elle devrait avoir un catalogue ou alors un contact chez Qiagen. Sinon, contacte Qiagen le département des ventes de Qiagen directement ils t'enverront un devis.   [...]

[Génétique] Réalisation PCR

J'ai un protocole maison pour faire de l'extraction d'ADN à partir de morceaux de queues de souris. Mais si tu as un kit d'extraction d'ADN génomique avec colonnes c'est aussi bien.  [...] Merci pour votre réponse. Je ne suis pas du tout dans ce service en faite je suis animalier à la base et on me demande de réaliser des pcr en complément de mon activité, voilà le pourquoi de ma question.   [...]

[Biochimie] Mecanisme de ligation SOS clonage

D'après ce que tu dis tu purifies ton ADN par extraction sur gel Pour l'avoir aussi utilisé, la perte du matériel est énorme. Il vaut mieux purifier avec un kit de purification comme le PCR extraction kit (Qiagen) où la purif se fait directement sur ton produit de PCR, sans passer par un gel.  [...] Concernant la purification de l'ADN, je purifie tout le temps à partir d'une extraction sur gel et ça ne pose pas de problèmes (en utilisant le kit macherey), cependant tu peux passer ton agarose fondue et produit de PCR 2 fois sur la même colonne c'est à dire que tu reprends ce qui est passé et tu le repasses, tu auras d'avantage d'ADN.  [...]

Extraction d'ADN

Notre laboratoire travaille entre autre sur de l'extraction d'ADN issu de valves cardiaques de patients. Nous utilisons pour ca le kit Qiagen (attention, il existe des kits d'extraction d'ARN et d'ADN). Je crois ne pas me tromper en disant qu'il existe plusieurs kit pour l'ADN.  [...] Pour les kits Qiagen (que j'utilise aussi), je ne suis pas sûre que ce soit approprié pour l'extraction à partir de poils ou fécès.  [...]

[Biologie Moléculaire] Difficulté d'interprétation de gel d'électrophorèse

- donc j'ai extrait l'ADN plasmidique grâce a un kit d'extraction nucleospin Macherey Nagel.  [...] la manip a fonctionnée puisque tu vois ta bande a 400 la ou il faut. Pour les bandes suppérieures je dirais que c'est une aberration de migration car tu as trop de matériel dans ton puit.   [...]

Kit extraction dna

Prière de m'éclaircir les étapes d'extraction d'adn génomique avec le kit commercial Purelink tm genomic DNA mini kit.  [...] Je fais souvent l'extraction avec la méthode classique phénol-chloroform et maintenant je veux utiliser ce kit pour l'extraction.  [...]

[Divers] L'extraction d'ADN

- l'extraction différentielle. il s'agit ici de séparer de l'ADN provenant de deux fractions différentes. Exemple le plus courant. mélange de cellules épithéliales (fraction féminine) et de spermatozoïdes (fraction masculine) que l'on peut retrouver sur des prélèvements de type préservatifs, écouvillons vaginaux.  [...] Petite précision supplémentaire. les extractions réalisées à partir de traces ont toujours un plus faible rendement. En cause. la faible quantité d'ADN et une plus ou moins bonne qualité (dégradation, mélanges, inhibiteurs de PCR, etc).  [...]

Kit d'extraction périmé

Je dispose d'un Kit d'extraction d'ADN dont la dated'expiration est Juin 2012, à votre avis, je l'utilise ou je le jette.  [...] A mon avis il est encore bon si il n'a pas été ouvert. (sauf peut être la RNAse).   [...]