• Forum - Expression, Protéine, Cible

microRNA

Les chercheurs commencent à mieux comprendre ce phénomène et l'utilise comme moyen d'atténuer (silencer, en anglais) l'expression protéique. Un insert dans la cellule une séquence complémentaire à un ARNmessager qu'on désire atténué la transcription en protéine.  [...] Et si, les microRNA inhibent aussi l'expression des protéines endogènes, soit en inhibant la traduction soit en provoquant la destruction du mRNA cible, c'est un moyen de contrôle de l'expression des gènes (au niveau de la protéine) autrement qu'au niveau transcriptionel.  [...]

[Biologie Moléculaire] délai de temps entre la transcription et la traduction

en termes d'ARN, j'observe une augmentation d'expression de mon gène cible de manière significative aprés 3 heures de traitement. à quelle moment environ verrais-je une augmentation au niveau protéique.  [...] ce que j'ai constaté après mon WB c'est que l'augmentation d'expression de la protéine cible se fait à 14 h.. légèrement à 6h (trés léger) et plus rien à 24h.  [...]

[biologie moléculaire] Opéron lactose

salut,je suis désolée mais quelqu'un peut m'expliquer tout ça.je ne connait pas un gene qui s'appelle lacZ',et je demonde pourquoi on doit utuliser IPTG pour provoquer_ meme experimentalement- l'expression du gene lacZ qui vas donner une protéine inactif qui sera besoin d'un complimentair.  [...] L'IPTG est utilisée notement en biotechnologie dans les cas de productions de protéines recombinantes par un vecteur d'expression que l'on fabriquera avec un gène d'une protéine fusion (le gène lacZ ds ce cas ci) qui permettra une lecture du gène controlée et donc une production controlée de la protéine cible.  [...]

[Biologie Moléculaire] siRNA

Normalement si le siRNA est correctement conçu, à ma connaissance, un seul est suffisant. Je pense qu'il est même préférable d'en utiliser un seul. En revanche lors de la commande de SiRNA il arrive que le fabriquant fournissent 4 siRNA à tester peut être est ceux à quoi tu fait allusion.   [...] Pour tester l'efficacité tu peux réaliser une qPCR sur le gène cible du SiRNA l'ARN étant dégradé si le siRNA est éfficace. Tu peux aussi faire un Western Blot pour observé que l'expression de ta protéine est bien éteinte.  [...]

au secours ... cycline, Rb et e2F cycle cellulaire...

Ce que je ne comprends pas c'est que si Rb ne se fixe pas a e2F... e2F peut se fixer a l'adn et donc faire son role de facteur de transcription pour les genes qui codent pour des éléments pour la pahse S...et il me semble que la ca me dit le contraire dans le cours, que si la proteine chapeau Rb ne se fixe pas il y a blocage.  [...] Ok, alors...Le complexe cdK2/Cycline E est impliqué dans la transition G1/S et a pour cible la protéine Rb. Rb est effectivement un piegeur de E2F. si Rb est phosphorillé par cdK2/Cycline E, alors il y a relarguage de E2F qui va, comme tu l'as dit, active la réplication de l'ADN (car E2F va activer l'expression d'une polymérase).  [...]

technique du double hybride

On dispose d'une protéine cible couplée au domaine de liaison à l'ADN et de protéines pouvant potentiellement interagir avec la cible couplées au domaine de transactivation de l'ADN.  [...] En utilisant une séquence d'ADN codant pour un gène rapporteur sous le controle d'un promoteur activé par le facteur de transcription, on peut fixer la cible sur l'ADN via le domaine de liaison de l'ADN du facteur de transcription. Comme le système ne possède pas le domaine de transactivation, il n'y a pas d'activation de l'expression du gène.  [...]

[Biologie Moléculaire] Transduction lentivirale

J'ai eu une bonne efficacité de transduction sur mes lymphos par contre je n'ai pas augmenté l'expression du gène mais je l'ai diminué. Avez-vous une explication à ça Serait-ce parce que quelque chose dans la cellule down-régule le gène.  [...] Je crois que je n'ai pas été clair. En fait je veux augmenter l'expression du gène en utilisant le système CRISPRa délivré dans mes cellules d'intérêt (des lymphocytes T CD8) par une transduction lentivirale.  [...]

Criblage virtuel et "docking"

Pour l'alignement j'arrive a le faire sur Pymol donc pas de probleme, mais merci quand meme. Le docking c'est la modelisation des interactions entre de petites molecules et une proteine cible. ca permet par exemple de trouver des drogues pouvant potentiellement bloquer l'activité d'une proteine car cette molecule se fixerait au site actif de la proteine.  [...] Le docking c'est la modelisation des interactions entre de petites molecules et une proteine cible. ca permet par exemple de trouver des drogues pouvant potentiellement bloquer l'activité d'une proteine car cette molecule se fixerait au site actif de la proteine.  [...]

ubiquitine et protéasome

si apres inhibition du proteasome, le niveau d'expression cellulaire de ta proteine est plus grand, tu pourras passer a l'etape suivant (ubiquitinylee où comment).  [...] Ensuite il faut que tu mettes en place un protocolle qui permette d emontrer que sans cette intéraction ta protéine cible n'ets pas dégrader. Pour ce faire tu vas utiliser des mutants, des siRNA, etc.  [...]

[Immunologie] Vih

Et donc autant de versions différentes des protéines membranaires, apparu sur la membrane suite à l'ajout de la séquence viral dans le génome de la cellule hôte. Pourtant ça aurai pu être des cibles pharmacologiques de choix (détruire la cellule infecté avant que celle ci de libère d'autres virus), mais tu vois bien que trouver une cible médicamenteuse est pratiquement impossible puisque l'expression change tout le temps.  [...] Mais les rares cas de guérison avérée passionnent les chercheurs, sans qu'il y ait d'explication convaincante pour l'expliquer. Le Sida est à ce jour incurable, c'est un fait. Il tue encore beaucoup, mais surtout dans les environnement où les traitements précoces -sinon les traitements tout court -, ne sont pas, ou mal (pour des raisons trés variées), accessibles à l'ensemble des populations. en Afrique avant tout, bien sûr.   [...]