• Forum - Expression, Plasmide, Induction

[Biologie Cellulaire] Expression des protéines

PArles-tu d'une expression après transfection d'un plasmide codant un ADNc ou d'une expression après une induction par un stimulus.  [...] Tu m'aurais parlé d'une simple transfection d'un plasmide codant un ADNc dans une cellule de mammifère, on pouvait avoir un ordre d'idée mais là c'est beaucoup trop compliqué pour avoir un a priori. Il faut que tu testes plusieurs conditions.  [...]

[Biologie Moléculaire] Expression de protéines grâce au pGEX. DH5alpha ou BL21?

J'ai transformé des bactéries DH5alpha avec mon plasmide GST et mon plasmide GST-prot d'intérêt. Pour chaque transformation j'ai effectué un contrôle non induit. J'ai testé deux stragégies d'induction avec 1 mM IPTG. 2h à 37°C ou toute la nuit à 30°C.  [...] Par rapport à mon vecteur pGEX5x1 on peut aussi voir qu'il y a de l'expression de protéines même sans induction (contrôle. DH5alpha non transfectées). Au bout de 2h l'induction n'a pas franchement dépassé la production endogène. Au bout de 12h la différence est très nette montrant que l'induction active bien le plasmide.  [...]

[Biotechnologie] Induction vs. expression

oui l'expression que je fait est dans des lignees bl 21, au depart contenant uniquement le plasmide recombinee, puis comme il y a eut une fuite dans l'expression, on a rajoute un plasmide Lysozyme.  [...] Donc, si je comprends, tu as un plasmide recombiné provenant de pET. Le mieux ce serait que tu regardes les différentes cartes de plasmides et que tu dessines une carte de ton plasmide recombiné avec les promoteurs et que tu schématises les différentes interactions dans ta bactos d'expression.  [...]

[Biotechnologie] Biotechnologies....

Si je ne dis pas de bêtises, ça va des utilisations du génie génétique (empreintes ADN, OGM, tests génétiques...) en passant par des aspect plus biochimiques (production et extraction de composés d'intérêt par des bactéries, levures, plantes, etc...), mais aussi par la culture cellulaire, l'utilisation d'anticorps pour révéler la présence de pathogènes ou de composés donnés.   [...] Mardi. Préparation des cultures pour l'expression. induction. L'expression se fait la nuit, pendant que je dors peinard (ou autres options plus câlines).  [...]

Biologie cellulaire et E2F

Et y a t-il un mot pour décrire l'expression d'un gène qui était inhibée et qui devient transcrit (je ne connais que l'expression constitutive d'un gène, l'induction et la répression comme terme).  [...] En général, les facteurs généraux de la transcription se fixent dans le promoteur, et les facteurs accessoires dans des régions distales. Mais en fait c'est rarement aussi simple. Les facteurs accessoires peuvent se fixer un peu n'importe où, y compris dans les premiers exons/introns, du moment que la séquence reconnue s'y trouve.   [...]

[Biologie Moléculaire] Vecteurs intégratif+inductible

ce qui m'étonne un peu, c'est que souvent en transitoire, il y a plusieurs copie du vecteur par cellule, donc l'expression est plus forte qu'en stable. Dans mon cas, j'observais souvent une réduction de l'expression apres etre passé en stable.  [...] Ce que je ne comprends pas non plus, c'est que si c'est un vecteur inductible, normalement, il ne devrait pas y avoir d'expression en absence d'induction, et donc aucune raison qu'il y ait une sélection négative des transformants exprimant trop fortement, car la sélection se fait en absence d'induction.  [...]

[Microbiologie] génétique bactérienne et enzymes inductibles

c'est une idée, et j'ai soupçonné aussi les gènes qui contrôlent les enzymes inductibles d'être les mêmes gènes à l'origine de l'apparition de résistances aux insecticides chez les insectes, je sais par exemple que le DDT l'insecticide phare du milieu des années 40 a sélectionné des populations d'insectes qui ont trouvé la parade pour l'éviter en rajoutant une ou deux mues supplémentaire à leur cycle de développement, et le DDT était un tueur non spécialisé qui broyait tout ce qu'il trouvait sur son passage, même les abeilles n'y échappait pas, mais finalement absolument tout les insectes sont devenus résistant au DDT cet insecticide est neurotoxique pas seulement pour les insectes mais aussi les mammifères comme l'Homme il a été interdit depuis mais certains pays d'Afrique noire continue à l'utiliser.  [...] ..et si la seule chose capable de faire émerger une enzyme digestive du plastique est une mutation, donc tu nies l'existence d'enzymes inductibles. c'est une fausse information ou c'est moi qui a mal compris et qu'est ce que je devrais comprendre à la place.  [...]

Correction devoir - Le monde microbien , biotechnologie, antibiotiques …

Des micro-organismes par sélection et après mutations successives, isolé et utilisé dans la fabrication industrielle de l'hormone de croissance.   [...] Il fait peut être référence au colonie blanc/bleu et au système d'induction à l'IPTG pour savoir si le fragment cloné est bien intégré dans le plasmide.  [...]

[Biochimie] Empreinte à la DNase+ TAMOXIFENE

Pour la deuxième question, le tamoxifène ne sert pas à faire rentrer la CRE dans le noyau mais à induire l'expression de cette CRE soit de permettre son expression au moment voulu dans le temps.  [...] par rapport a la cre inductible par le tamoxifène, il s'agit bien de déclencher la translocation nucléaire de la recombinase et non une induction de son expression.  [...]

Promoteur Gal

je voudrais savoir à quelle concentration faut il mettre du galactose dans un milieu de culture de levures pour induire une surexpression d'un gène sous promoteur GAL.  [...] Pour induire l'expression de ton promoteur GAl il te faut aucune trace de glucose. Car ce n'est pas une induction sous gal mais une repression par le glucose.  [...]