• Forum - Explication, Méthode, Mesure, Activite enzymatique

mesure activité enzymatique bacterienne

J'ai beaucoup chercher sur internet une explication de la méthode de SOMOGY et NELSON pour la mesure de l'activité enzymatique d'une suspenion bactérienne, et j'ai rien trouvé.Est ce que quelqu'un connait le principe ou le protocole ou un site où la méthode est détaillée Merci.  [...] Il s'agit d'une vielle méthode que plus personne n'utilise pour mesurer la présence de sucre réducteurs dans une suspension.  [...]

enrichissement de fractions

A mesure que l'on purifie, la concentration du produit d'intérêt devrait augmenter. En enzymologie, une méthode pour suivre cela est de suivre l'activité enzymatique (en gros la quantité de substrat consommé [ou de réactif formé]/unité de temps/quantité de protéine [ou volume]).  [...] L'enrichissement c'est le ratio de l'activité spécifique à l'étape suivie sur celle de l'étape précédente. et comme je sens que la question va finir par venir, le rendement, c'est le nombre d'unité enzymatique à l'étape présente sur celles de la précédente.  [...]

[Biologie Cellulaire] l'activité enzymatique

pour commencer il faut savoir que les enzymes sont des protéines et on sait très bien que les protéines sont issues de l'expression des gènes alors tu voit maintenant la relation étroite entre activité enzymatique et génotype,  [...] Pour revenir à ta question (dans quelle mesure l'activité enzymatique dépend-elle du génotype), trouve le lien entre une enzyme et le génotype (transcription =. traduction notamment) puis le lien entre une activité enzymatique et l'enzyme elle-même (cette activité dépend de l'enzyme, sa forme etc).  [...]

[Biochimie] Activité enzymatique

J'ai eu un TP sur l'activité enzymatique de la phosphatase alcaline. Il y a eu plusieurs manipulations (avec et sans inhibiteur), et avec les résultats d'absorbance qu'on a mesuré, on doit déterminer le Km et le Vmax à partir de différentes méthodes de linéarisation (Lineweaver & Burk, Eadie & Hofstee et Hanes).  [...] Focalisons-nous par exemple sur la méthode de Lineweaver & Burk (ordonnée en min/dA et abscisse en 1/millimolaire) pour une réaction sans inhibiteur.  [...]

[Biochimie] Etude de la reconnaissance enzyme, substrat

Pour faire bref, on dit que les protéines sont amphotères(sont à la fois acide et basique). La charge qu'elle porte dépend du pH(concentration en H+). Et effectivement celà peut avoir une importance sur leur structure qui est maintenue, effectivement, grâce à des liaisons faibles.   [...] Je vais etre un peu répétitif par rapport à novocaïne qui a bien résumé l'implication du PH. La charge des groupements latéraux acides et basiques est particulièrement importante pour la catalyse, ainsi, un carboxylate (cas de l'aspartate) n'aura pas le meme effet que la forme acide.   [...]

[Biochimie] Préparation tampon phosphate

4. Mesure du pH et ajustement du pH s'il n'est pas ok. Pour ajuster, il faut ajouter un acide (ou une base) ne contenant QUE les espèces en solution.  [...] mais je veux savoire si la concentration du tampon phosphate finale est de 50mM et comment je met un pH 7,4.   [...]

[Biochimie] Comparaison entre deux méthodes de mesure enzymatique

tandis que pour la méthode avec le test ELISA AE de l'orde de 200 µmol.min-1 Soit une activité enzymatique 2millions de fois plus élevée.  [...] en fait non c'est le contraire pour la manipulation au test ELISA je trouve des valeurs d'activité enzymatique inferieure (de 3 fois).  [...]

[Biochimie] Dtt

Bonjour, à quoi sert le DTT lorsqu'on mesure l'activité d'une réaction enzymatique.  [...] Ce que je connais du DTT c'est qu'il permet de stabiliser les protéines possédantes des groupements soufrés, son pouvoir réducteur sur les thiols en fait un réactif très utilisé en biochimie pour empêcher l'oxydation des cystéines dans les protéines.   [...]

Activité enzymatique du lysozyme purifié

Je suis en plein rapport de T.P. et j'ai pas mal de doute sur la méthode que j'ai employé puisque c'est la première fois qu'on calcule une activité enzymatique.  [...] Mes doutes sont plus sur la méthode, surtout si il ne faut pas non plus multiplier par le facteur de dilution la quantité de protéine, comme pour trouver l'activité enzymatique de Fo non diluée, afin de trouver le reste.  [...]

cinétiques atypiques

lorsque je mesure l'activité enzymatique d'un substrat avec des enzymes recombinantes j'obtiens ceci.  [...] donc forcément l'équation de MM ne convient pas. J'ai essayé avec une équation (inhibiteur non compétitif) comme conseillé pour les inhibitions par excès de substrat. Mais j'obtiens des valeurs abhérantes de km et vm (même si j'ai un R correct).   [...]