• Forum - Expériences, Extraction, Sang, Total

[Biologie Moléculaire] EXTRACTION ARNt

Bonsoir, je viens de me lancer dans des expériences d'extraction d'ARNt à partir du sang total.dans ma première extraction j'ai obtenu un randement de 2,1 (DO260=0,069) avec une concentration de 69ug/ml qui me parrait faible. dans l'étape de rétrotranscription selon le protocol je dois prendre 1ug/ul d'ARN alors que mon échantillon a une concentration faible(0,069ug/ul), je ne sais pas quoi faire dans ce cas, est-ce que je peux doubler de volume pour régler ce probleme.  [...] une autre question me préoccupe, la valeur de 69 est la concentration, alors comment déterminer la quantité de mon ARNt.   [...]

Problème d'extraction d'ADN

Je me permet de vous solliciter pour un problème d'extraction d'ADN que j'ai rencontrer. J'utilise la méthode d'extraction sur colonne de gel de silice à partir de prélèvement de sang total congelé. Le hic, c'est en voulant décongeler mes prélèvement trop vite, j'ai accidentellement coagulé le sang total.  [...] La coagulation étant due à l'albumine je suppose(70°C). Ma question est la suivante. Y'a-t-il un moyen de sauver mes prélèvements Y'at-til un traimtement que je peux leur faire subir pour pouvoir quand même en extraire de l'ADN ( le principal problème du sang coagulé c'est que ça bouche la colonne, ce qui rend la séparation du lysat par centrifugation impossible).  [...]

[Divers] L'extraction d'ADN

Parce que je n'ai rien trouver sur google, les sites ne parlant que d'extraction de fruit, ou d'expérience à réaliser, ce qui ne m'intéresse pas.  [...] Petite précision supplémentaire. les extractions réalisées à partir de traces ont toujours un plus faible rendement. En cause. la faible quantité d'ADN et une plus ou moins bonne qualité (dégradation, mélanges, inhibiteurs de PCR, etc).  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction ADN Plasmodium

Je suis doctorant en parasitologie, une partie de mon travail repose sur la PCR de plasmodium. Le problème c'est que j'ai pas trouvé dans la bibliographie un protocole d'extraction d'ADN parasitaire depuis le sang total, j'ai trouvé seulement des méthodes utilisant des kit d'extraction tel que QUIgen.  [...] extraction de l'ADN totatal par l'un de ces deux protocole puis ensuite PCR avec des amorces spécifiques de Plasmodium, ca devrait faire l'affaire.  [...]

extraction phenol chloroforme

je veux savoir est ce que je peus faire un extraction phenol chloroforme de l'ADN viral à partir du sérum et non pas du sang total.  [...]

[Biologie Moléculaire] conservation sang total et ARNs

[Biologie Moléculaire] conservation sang total et ARNs.  [...] J'aimerai demander si la conservation du sang total à -4 ou -20C affecterait les ARNs circulants et le rendement de l'extraction de ces derniers et si vous pouvez m'indiquer la période et la température optimale de stockage/conservation des prélèvements sanguins qui permet de préserver les ARN.  [...]

[Biologie Moléculaire] Meilleure technique d'extraction ?

Perso, je faisais une extraction phénol-chlo après les étapes de déplétion (je travaillais sur du sang total) et puis, plusieurs amplification de génomes totaux de pathogènes avant d'hybrider sur la puce.  [...] bonjour, j'ai recueillis du sang total humain en présence d'EDTA, j'ai commis une faute en conservant ce sang à -80°C ce qui provoquera une hémolyse, est ce que je peux, comme même, extraire l'ADN à partir ce sang congelé SVP il n'ya pas une solution j'ai besoin d'aide.  [...]

[Biochimie] migration sds page

je fais une extraction de cytosol total sur des plaquettes sanguines et je les dénature en les faisant bouillir avec un tampon glycérol/SDS avant de les faire migrer.  [...] alors voila, je prépare 60 millions de plaquettes (volume de 200-400µl). après traitement je fais une extraction du cytosol total grâce à un kit Active Motif. Ensuite je dénature 5µg de protéines (environ 10µl) par 5µl de tampon de charge (5min à 100°C). je fais ensuite migrer mes échantillons dans un gel 10% pendant environ 2h, grâce à une système Apelex (cuve + générateur).  [...]

[Biochimie] purification ADN thymus de veau

1. Je voudrais savoir quels sont les avantages d'utiliser le thymus de veau comme source d'ADN Pourquoi ne pas utiliser utiliser une autre espèce animale J'ai cherché et j'ai réussis à trouver que ces cellules ont un rapport nucléo cytoplasmique très élevé, mais je ne suis pas certaine de comprendre ce que cela veut dire et quel avantage cela a dans cette expérience.  [...] Le thymus de veau est un abat - une pièce de boucherie courante. S'agissant en plus d'un organe lymphoïde, il est riche en lymphocytes - des cellules ayant le rapport volume du noyau (ADN) sur volume total des plus élevés. Ce qui permet de se fournir à moindre frais (+ dans un supermarché) du matériel biologique (riche en ADN) pour une première expérience d'extraction d'ADN à partir de tissu animal.  [...]

[Immunologie] Conservation d'un échantillon de sang total avant centrifugation en vue de sérologie

Conservation d'un échantillon de sang total avant centrifugation en vue de sérologie.  [...] - Sachant que je compte faire les prélèvements sur tubes secs, combien de temps au minimum je dois laisser l'échantillon sanguin au repos avant de centrifuger afin d'obtenir un sérum de bonne qualité.  [...]