• Forum - éthanol, Tampon, Lavage

[Biologie Moléculaire] l'extraction d'ADN

protéase / éthanol/ tampon de lyse / tampon de lavage tampon d'elution.  [...] Tampon de lavage. Souvent composé d'éthanol concentré, il permet de nettoyer l'ADN de ses composants sans le solubiliser.  [...]

[Biologie Moléculaire] Probleme purification sur gel d'agarose

Oui j'ai recentrifuger apres le PE et j'ai attendu 1min avant de centrifuger pour l'elution. Le tampon d'elution est celui du kit, j'imagine que c'est du TE a pH8,5.  [...] Par contre, la vitesse de centrifugation ne change rien du tout sur le rendement, et la deuxième étape de 1minute après PE ne sert que pour éviter d'avoir des traces d'éthanol dans l'éluat.  [...]

[Biologie Moléculaire] Il y a quoi dans un kit d'extraction d'ADN?

Le premier est un NucleoSpin plant extract qui fonctionne avec un série de tampon. Lyse, lavage, élution avec éthanol.  [...] Le deuxième procédé fonctionne avec des billes magnétiques qui retiennent l'ADN ce qui permet d'éliminer le milieu et de laver l'ADN.   [...]

[Biologie Moléculaire] échec de révélation sur gel d'agarose des produits d'ADN après purification

normalement, avant d'éluer (EB ou H2O) la colonne est centrifugée pour faire passer le tampon de lavage puis recentrifugée a vide. Normalement plus un poil d'ethanol.  [...] Normalement on lave avec un tampon qui doit contenir de l'éthanol mais l'ADN reste encore sur la silice de la colonne. On centrifuge pour éliminer l'éthanol et on recentrifuge la silice à vide pour finir de sécher (l'éthanol peut sinon faire des interférences lors du traitement de l'ADN pour le dosage ou la migration) On dépose ensuite de l'eau stérile ou alors un tampon d'élution sur la silice de la colonne(perso je préfère l'eau).  [...]

Techniques utilisées en lab de biomol - Page 2

Sinon un problème récurrent est le lavage de la colonne qui se fait avec un tampon contenant plus de 70% d'éthanol, si il n'est pas bien fermé, l'éthanol s'échappe (en quelques heures) et au lieu de laver la colonne, tu élues ton ADN. donc t'en perds une bonne partie. Un bon réflexe est de le conserver à 4 degrés.  [...] Oui QUIAGEN. Pour ce qui est du lavage, je soumettrai cette idée à l'étudiant car c'est fort probable. Notre éthanol est conservé à température ambiante.  [...]

[Biochimie] Fixer des protéines dans un gel

Par contre, dès que j'essaie de les fixer (avec du TCA, par exemple), là, je perds carrément les petites protéines (diffusion dans le tampon de fixation + dans les lavages, probablement), et les grosses sont également plus faibles.  [...] Je vais du coups tenter un peu un mix de ce que vous me proposez, avec une déshydratation/fixation du gel au méthanol suivit d'une pulvérisation du tampon de fixation (formaldéhyde avec éthanol), puis lavage (ou pas, je vais tester)... Je vous tiens au courant, mais ce n'est pas pour tout de suite (une autre expérience en parallèle...).  [...]

[Biologie Cellulaire] Cycle cellulaire - Page 2

Le PI se lie aux cellules qui ont perdu leur integrité, il se lie au noyau des cellules, avant de mettre le PI, on met le tampon de citrate qui casse tout, il n'y a que les noyaux qui restent. Pourquoi fixer les cellules.  [...] Après fixation à l'éthanol il est préférable d'utiliser un perméabilisant comme le tween 20, triton ou Np40 ou saponine (le choix est vaste). Pour la saponine, il faut l'utiliser également dans les tampons de lavage.  [...]

[Immunologie] Composition tampon de lavage ELISA

Je suis à la recherche de la composition d'un tampon de lavage concentré 50x.  [...] J'ai essayé à partir de tampon 10x d'augmenter les doses de sels mais la solution sature et surtout à 4°C tous les sels précipitent. J'ai vu des solutions de lavage concentrées 50x assez visqueuse qui ne cristallise pas.  [...]

utilisation du tween 20

Bonjour, il me semble que c'est un tampon de lavage qui sert à éliminer les Ac non spécifiques lors de tests Elisa par exp.  [...] Le tween est un détergent. Dans un tampon d'ELISA ou de western blot, il est très dilué afin d'éliminer les interactions non spécifiques. Certains ne l'utilisent que dans les tampons de lavage, certains dans tous les tampons avec globalement le même résultat final.  [...]

inhibiteurs de la qPCR

C'est l'ADN génomique d'un insecte (une mouche gallifère ). L'extraction d'ADN avec le CTAB n' a pas marché donc j'ai suivi le protocole du salting out ( precipitation des débris cellulaires avec le NaCl et lavage avec l'ethanol absolu pus l'ethanol 70).  [...] Svppp je veux une réponse a cette question.. comment est ce que avec une pcr ou une rt pcr on peut savoir s'il ya un cancer ou non autrement dit comment on procède pour analyser un échantillon avc une pc ou une rt pcr je veux comprendre le protocol ps. Chuui tres nulle en ce domaine de la bio mol svp j'aimerai bien que la reponse soit très claire et merci d'avance.   [...]