• Forum - éthanol, Molécule, ADN

[Biologie Moléculaire] Rôle des réactifs de la PCR

Je suis donc en trin de réviser ma biologie moléculaire et j'aimerais savoir à quoi servent tout les réactifs utilisés, à savoir.  [...] Les alcools éthanol et isopropanol vont te permettre de précipiter la molécule d'ADN afin de la purifier ensuite en filtrant ou sur colonne... Cela mérite d'approfondir mais tu as les fonctions des produits dans les grandes lignes.  [...]

Biochimie : Pourquoi a-t'on besoin d'éthanol pour extraire le fructose du citron?

En fait l'ajout d'éthanol va changer/déséquilibrer la charge en électrolytes du mélange. Comme il y a moins de liaisons ioniques avec les phosphates de la molécules d'ADN, cela va changer la solvatation de l'ADN. S'ajoute par-dessus la polarité inférieur de la molécule d'éthanol qui modifie les liaisons hydrogènes et polaires du mélange, ce qui change encore la solvatation de l'ADN.  [...] J'ai compris ça. en ajoutant de l'éthanol en excès, on fait disparaître les molécules d'eau qui établissaient des liaisons hydrogènes avec l'ADN, donc dans un premier temps, c'est l'éthanol qui fait office de solvant à présent. Et dans un milieu sans électrolytes, l'ADN reste soluble dans l'alcool.  [...]

[Biochimie] Types d'éthanol

Alors le nettoyage des paillasses, c'est de l'éthanol à 70%, et pour précipiter mes ADN, j'utilisais de l'éthanol 99,8% et ça fonctionnait bien. D'ailleurs les fournisseurs l'indiquent souvent comme qualité biologie moléculaire ou pour biologie moléculaire, utiliser un produit pour le diluer à 70% je trouve ça un peu ruineux quand même.  [...] Pas besoin d'un éthanol d'aussi grande qualité chimique pour manipuler les acides nucléiques en biologie moléculaire. C'est même déconseillé si tu t'intéresses à la topologie précise de certaines molécules ADN. De plus, l'ether sulfurique, même s'il permet de mieux déshydrater l'alcool est toxique. De l'éthanol 96% convient mieux.  [...]

[Identification] Extraction d'ADN

Pour la question 3, je ne saurai pas décrire exactement le rôle de chaque produit. Par contre je pense que l'éthanol permet de cristaliser une fois mélanger avec le contenue afin de faire apparaitre l'ADN.().  [...] Puis, j'avais pensé aussi à la paroi de la cellule végétale. il devrait y avoir plasmolyse (la paroi éclate et donc les molécules, dont l'ADN sont libérées en-dehors de la cellule).  [...]

[Génétique] Précipitation de l'ADN dans l'éthanol, pourquoi une T° basse?

[Génétique] Précipitation de l'ADN dans l'éthanol, pourquoi une T° basse.  [...] J'aimerais savoir pourquoi le rendement de la précipitation de l'ADN dans de l'éthanol augmente lorsque l'on baisse la t°.  [...]

[Biologie Moléculaire] precipitation ADN

de ce que je sais le lavage à l'ethanol 70% permet de dissoudre les sels présents dans ton culot. Mais je ne sais pas si il y a une autre utilité.  [...] Ce qui doit être écrit dans votre protocole c'est que l'on reprend un volume V d'ADN dans 2V d'éthanol absolu non Si l'on fait le calcul, la concentration finale en ethanol est ~70%.  [...]

demande d'infos!!! extraction de l'ADN

- Après avoir placé le melange contenu cellulaire/phenol, il faut agiter afin que l'ADN puisse se retrouver dans la phase aqueuse que l'on recupère après avoir centrifugé. 2 phases sont visibles. la phase aqueuse au dessus contenant l'ADN, la phase organique contenant l'ARN et l'interphase contenant les protéines.  [...] En bref, il faut precipiter l'ADN avec de l'Acetate de Sodium et de l'Ethanol 70% par agitation puis centrifugation. Il faut eliminer tout l'ethanol puis nettoyer le culot avec de l'Ethanol 100%. Apres une nouvelle centrifugation, l'Ethanol est eliminé et le culot d'ADN seché puis remis en suspension dans un tampon.  [...]

[Génétique] meilleur conservateur d'ADN

Je dois conserver des tissus de différentes espèces d'octopodes afin de faire des analyses d'ADN ultérieurement. Et j'aimerais savoir quel est le meilleur conservateur tissulaire afin que l ADN que je veut prélever plus tard ne soit pas abîmé. (Ex alcool, paraffine, -80ºC).  [...] L'ethanol 70% à -20°C est très bien pour conserver l'ADN. Ceci dit, si tu ne conserves les tissus que pour en extraire l'ADN, à ta place, je ferais deja une extraction, je pelotterais l'ADN et je le conserverais ainsi à -20°C, flottant dans l'ethanol.  [...]

extraction ADN

je fait de l'extraction d'ADN avec TE, lysozyme, SDS, isopropanol et éthanol mais j'obtiens un ADN pas très propre (. 1 au spectro). on m'a dit de rajouter une étape avec le chloroforme mais celui nécessite une hotte chimique ce qu'on a pas. je voulais donc savoir par quoi on pourrai le remplacer.  [...] par contre tu as un autre protocole, pas cher et inspiré des kits. la lyse alcaline, l'idée étant de récupérer du tampon P1 en trop dans les kits de midiprep ou maxiprep.   [...]

[Biologie Moléculaire] Dilution d'ADN "contaminante"?

Pour MaliciaR. ADN visqueux = culot après précipitation à l'Ethanol mal resuspendu, ou présence d'ADN génomique (volontaire ou non.). Pour aider, il est possible d'incuber @ 50°C pendant 10min pour aider à la resuspension. Dans le cas d'ADN génomique, on peut soniquer (tout dépend des applications que l'on veut faire après, mais 10-30s suffit largement).  [...] Sinon, j'ai extrait mes ADN à partir de tissus animaux lysés 3h à 55° au bain-marie, puis phénol/chloroforme avec des tubes contenant un gel bloquant la phase P/chlo (très pratique) et Éthanol précipitation avant de reprendre mon culot dans de l'eau.  [...]