• Forum - étape, Digestion, Protéine

les proteines

est ce que quelqu un peut m expliquer clairement les etape de la digestion d une proteine merci beaucoup.  [...] les protéines (polymères d'acides aminés) sont digérées par des endopeptidases, qui coupent les liaisons peptidiques entre certains acides aminés dans la chaîne polypeptidique (la pepsine, une enzyme gastrique, la trypsine et la chymotrypsine, enzymes pancréatiques qui se déversent dans l'intestin grêle), par des exopeptidases, qui ôtent les acides aminés aux extrémités des polypeptides (amino- et carboxypeptidases), et par des dipeptidases (enzymes de la bordure en brosse) qui scindent les dipeptides.  [...]

MS/MS et Maldi/MS

La réduction des ponts disulfure facilite l'étape de digestion enzymatique de la protéine. Le squelette peptidique est plus accessible.  [...] Si ma bande a été coupé d'un gel Coomassie (SDS-PAGE) ces étapes de réductions et alkylation ont déjà été réalisé avec les produits dénaturants du SDS-PAGE.  [...]

[Biologie Moléculaire] In situ d'oursin et sonde ARN

si quelqu'un ici à une idée je l'a testerai avec joie. Je pensais peut être ajouter une étape de digestion par une protéinase K avant de placer mes embryons dans le tampon d'hybridation. Vous en pensez quoi.  [...] Sinon est ce que vous auriez des articles avec des protocoles d'in situ d'oursin car je n'ai trouvé sur internet que des protocol pour amphioxus.   [...]

[Biologie Moléculaire] mutagènese, transformation, transfection

donc l'objectif du travail est d'étudier des protéines qui interviennent dans la réparation des cassures double brin de l'ADN.  [...] sachant que l'objectif du travail est de transfécter des cellules eucaryotes par un vecteur d'expression pour étudier les fonction d'une protéine par western et immunofluorescence.  [...]

[Biologie Moléculaire] Clonage avec plasmide

pour le protocole de clonage, la première étape est la création d'une banque d'adn (extraction adn, digestion par une enzyme de restriction puis ligation de ces fragments dans des plasmides portant les sites de restrictions de l'enzyme restriction choisie).  [...] Une derniere question piwi je ne comprends pas ce que veut dire. Digestion de restriction de la PCR et du fragment dans l'étape 6.  [...]

[Immunologie] Le mécanisme de rejet d'un corps non organique

Il existe dans le sang, plus précisément dans le plasma des protéines C, le therme de systéme du complément désigne l'ensemble de ces protéines qui participent participent au système immunitaire. Les surfaces lipophile, c'est-à-dire une affinité avec les solvants organiques, tel que le plastique (présent dans le stimulateur rétinien) absorbe et causes la déformation de ces protéines notamment de la C3b.  [...] 3-La digestion (cette dernière étape n'est pas systématique). les corps étranger sont détruit grâce à des enzymes secrété par le macrophage.  [...]

stabilité thermique

J'aurais voulu connaître un peu les paramètres qui peuvent induire des instabilitées thermiques des protéines ou qui peuvent favoriser cette stabilité ou son maintien (comme les protéines de lait par exemple).  [...] Les protéines de structure/maintien sont généralement plus stables que les protéines du métabolisme pour lesquels cette flexibilité est justement la clef de leur fonction de catalyseur biologique.  [...]

[Biochimie] Empreinte à la DNase+ TAMOXIFENE

Si on place une protéine dans le milieu avant digestion et que celle-ci se fixe sur une séquence d'ADN, on observera disparition de certaines bandes. comme l'ADN n'est marqué qu'aux extrémités, on peut savoir grossièrement où la protéine s'est fixée.  [...] Sans tamoxifène, la protéine de fusion cre-dllER est séquestrée dans le cytoplasme par des chaperonnes (HSP70). Lorsque l'on ajoute le tamoxifène, le DLL change de conformation, libère les chaperonnes et la protéine de fusion peut entrer dans le noyau et exciser la portion d'ADN comprise entre les séquences LoxP.  [...]

[Biologie Moléculaire] Protéine de fusion

D'où mon idée de fabriquer une protéine de fusion avec la GFP. Malheureusement je ne sais pas trop comment m'y prendre. Malheureusement je ne trouve aucun site en commun me permettant de simplement digérer puis liguer ma GFP avant le codon stop de la protéine.  [...] C'est malheureusement relativement chpre et donc cela ne passera pas auprès de mon chef. Petite question. la protéine de fusion peut être attachée aussi bien en 5' qu'en 3' ou uniquement en 3'.  [...]

digestion trypsique

quel est le role d'une digestion trypsique sur une protéine et quelle sont les liaisons coupées.  [...] slt la trypsine est une protease gastrique importante elle coupe les liaisons peptidiques apres les acides amines basiques lysine et arginine, in vitro elle tres utilisée pour couper les liaison peptidiques covalentes.  [...]