• Forum - Estimation, Quantité, ADN

[Biologie Moléculaire] Principe de la technique d'estimation des quantité d'ADN

bon soir tous. je suis un étudient en génie biologie et j'ai tombé devant une technique sert à la quantification d'ADN. c'est l' estimation des quantités de DNA par lecture au spectrophotomètre à 260 nm. si quelqu'un peut m'aider à trouver l'astuce de principe de cette technique et merci.  [...] Nous sommes désolés, nos robots à répondre aux questions étaient en maintenance toute la nuit. On essaie de réparer cela pour répondre au plus vite à votre question dont on ne trouve la réponse dans aucun livre ni nul part ailleurs qu'ici.   [...]

Détermination des durées des phases du cycle cellulaire

L'estimation des phases G1 et G2 est difficile car il n'existe pas de marqueurs physiologiques qui permettent de les caractériser en dehors de la quantité d'ADN. Donc on considère que les cellules qui ont une faible quantité d'ADN sont en G1, celles qui ont une grande quantité d'ADN sont en phase G2 ou M.  [...] Arf, oui c'est ça, désolé pour la question/réponse ^^ je mets souvent un peu de temps à percuter pour les choses les plus évidentes.   [...]

[Biologie Moléculaire] RT-qrt-PCR : courbe de fusion et autres contrôles

Qu'est-ce que cela changerait qu'il y en ait eu. une plus faible probabilité de fixation des amorces sur l'ADN à amplifier, donc une diminution de la vitesse d'amplification, donc une mauvaise estimation de la quantité d'ADN initiale.  [...] Et maintenant la question qui t'aidera, quel peuvent être les facteurs pouvant affecter ce nombre de cycles (à part bien sur la quantité d'ADN initiale).  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction d'ADN par les sels (salting out)

-dernière question il est dit à la fin du protocole qu'une fois l'ADN séché resuspendre avec de l'eau distillée ou le tampon TE, mais on ne donne pas la quantité. Est ce que ce n'est pas forcément précis, et ne fausse pas l'estimation de la concentration de l'ADN par la suite.  [...] Tu ressuspends au feeling. Plus ton volume est grand, plus ton ADN sera dilue. Dans tous les cas si tu veux etre precis tu dois quantifier. Perso j'utilise ni de l'eau ni du TE, mais du tris 10mM pH 8.0. L'EDTA du TE peut inhiber pas mal de reaction, c'est souvent un peu chiant.  [...]

[Biochimie] estimation de le concentration d'ADN aprés spectrophotometrie

Bonsoir, au cours de mon stage à la faculté, j'ai fais des extractions d'ADN à partir de sang humain, et aujourd'hui j'ai dosé mes echantillon par spectrophotometrie (ADN dilué au 1/100 dans du TE). Je voudrais calculer la concentration de mon ADN dans chaque echantillon, comment puis je faire à part la regle de. 1 DO correspond à 50 µg/ml.  [...] Je voudrais appliquer la formule de yumyum (plus haut) sur 2 µl d'ADN dilué dans 998µl d'eau distillé (le tout donne 1000µl), comment doit-je appliquer la règle précédemment cité si je veux trouver la concentration de ma solution en ADN.  [...]

[Biologie Moléculaire] estimation de la taille d'une séquence d'adn

[Biologie Moléculaire] estimation de la taille d'une séquence d'adn.  [...] pouvez vous donner la formule qui me permettrait d'estimer la taille de cette séquence en pb et vos sources s'il vous plait je n'ai pas trouvé ça dans des articles.   [...]

[Identification] Marquage fluorescent --> semi-quantification

Je cherche donc un programme informatique qui me permettrait d'avoir une estimation plus rapide et plus objective de la quantité de vert sur fond noir.  [...] ImageJ est plus adapté que photoshop puisqu'il prévoit un nombre impressionnant de plugins pour aider le biologiste notamment dans la quantification. Je t'invite a regarder sur le site, ce logiciel est quand même très bien documenté.  [...]

interpretation electrophorese d'un plasmide purifié

Si il fait 5000bp alors le marqueur pourrait être un supercoiled ladder. mais c'est pas la question, si tu connais la taille du plasmide que tu as fait migrer et que tu ne connais pas le ladder utiliser la seule interprétation que tu peux faire de ce gel c'est sur la quantité d'ADN par puit.  [...] Malheureusement sans connaitre le ladder tu ne peux pas faire une estimation de cette quantité. Tu peux juste dire qu'il y a dans un puit plus que dans l'autre.  [...]

[Biologie Moléculaire] Dilution d'ADN "contaminante"?

Sinon, au labo, pour avoir une meilleure estimation de la concentration d'ADN, on mesure l'absorbance également à 320 nm. A cette longueur d'onde l'ADN n'absorbe pas donc la valeur devrait être nulle. On fait donc la soustraction A 260 -A 320 pour obtenir la vraie absorbance à 260 nm.  [...] P.S. Au fait, je suis plutôt curieuse de savoir quelle technique tu utilises pour obtenir une telle quantité d'ADN que ta solution en soit visqueuse.  [...]

Problème de rendement kit Maxiprep

Comment la séquence de mon insert peut-elle jouer sur la quantité de plasmide présente dans mes bactéries (j'ai conscience que plus l'insert est gros, plus la réplication est lente, mais encore D'autres paramètres influencent-ils la réplication ).  [...] Petit point informatif. je n'ai pas noté de différence de rendement entre une culture sans et avec chloramphénicol (après, je fais une estimation de la quantité uniquement sur gel donc si cela se joue à quelques ng/µL, je ne peux pas le visualiser).  [...]