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[Biologie Moléculaire] Marqueurs dominants et codominants

Prenons un exemple simple, une enzyme de restriction qui coupe au site de restriction A.  [...] l'enzyme de restriction coupe au niveu du site de restriction et doit générer 2 fragments de restrictions pour le homozygotes et les hétérozygotes.  [...]

[Biologie Moléculaire] comment crée un site de restriction pour une enzyme

s'il vous plait aidez moi à crée un site de restriction de l'enzyme DraI qui coupe dans la région palindromique TTTAAA.  [...] Tu veux mettre le site en 5' ou 3' de ton amplicon D'ailleurs tu peux mettre l'amplicon en gras, c'est hyper chiant à visualiser comme ça. Ah et vire les exons 1-6 et 9, on s'en fou.  [...]

[Biologie Moléculaire] Site de restriction

1- ecrit un site de restriction sur le papier enzyme regarde ou l'enzyme va couper, et essaye de trouver tous les moyens de couper. tu vas vite t'appercevoir qu'il y a deux grandes familles de coupures.  [...] Une coupure de l'ADN peut être engendré soit mécaniquement ou par des agents chimiques mais dans ce cas là on coupera l'ADN de façon aléatoire on ne pourra pas prédire l'endroit où ça va se casser tandis qu'avec une enzyme de restriction on coupe l'ADN à l'endroit où sera son site de restriction.  [...]

[Génétique] marche sur chromosome

En pratique, tu sais quelle est la couleur du marqueur des bords. On cherche donc à faire apparaître un site, par hybridation (et reconnaissance par fluorescence par exemple). Si ce site n'a pas été coupé par une enzyme de restriction, il doit apparaître 10 fois (puisque tu as 10 banques).  [...] Puis tu cherches à allumer un second site. Ce site s'allume sur de nouveaux segments mais aussi sur des segments déjà allumés par le précédent marqueur. Ce sont des segments qui se chevauchent (car ils n'ont pas été coupés aux mêmes endroits à cause des différentes enzymes de restriction).  [...]

[Biologie Moléculaire] activite enzymes de restrictions

afin de réaliser une banque de fragments d'ADNg double brin, on dispose de 20 µg d'ADNg que l'on digère par les enzymes de restrictions BaeGl ou Alul. Chacune de ces enzymes possède une activité de 10U/µL (1U coupe totalement 1µg de plasmide de 3000pb possèdant un site unique de restriction pour l'enzyme de restriction considéré en 1h à 37°C).  [...] 1) si la présence de site de restriction est aléatoire, expliquer en détaillant les calculs, combien de site de restrictions sont théoriquement présent sur ces 20µg d'ADN pour chacune de ces enzymes.  [...]

[Biologie Moléculaire] Comment ajouter un petide signal à une proteine?

Mais deux seulement suffisent. La premiere, qui amplifie le peptide signal, avec sur une des amorces un site de restriction (cohesif), que tu rajouteras egalement sur le sequence de la CFP de la meme maniere (sauf bien sur si c'est une CFP commercial, avec deja un bon choix d'enzyme qui coupe ou il faut).  [...] Tu peux ensuite purifier tes fragments, les digerer, les repurifier puis faire le clonage (transformation, amplification, verification) et hop, le tour est joue. Durer moyenne pour un tel clonage. une semaine max, sans compter le temps necessaire pour commander les amorces.   [...]

Position des bases

En fait lorsqu'on nous dit par exemple on a un site de restriction BamHI = G/GATCC en position, cela veut-il dire que pour le G/G, le deuxième G est en position 1 ou le premier G.  [...] GGATCC est appelé site de restriction. On peut numéroter les positions, même si cela a assez peu d'intérêt (ici de 1 à 6). le trait vertical de césure correspond au site de coupure de l'enzyme (BamHI coupe entre le premier et le second G).  [...]

[Biologie Moléculaire] ensyme de restriction

SVP je cherche à savoir les enzyme de restriction qui peuvent dégrader mes microsatellites déjà connu.  [...] est ce qu'il existe un site ou une méthode qui nous permettre de connaitre les enzyme de restriction qui coupe une séquence connu.  [...]

[Microbiologie] ligation clonage

Pour savoir si les bouts sont cohésifs, regarde le site de restriction de l'enzyme, mais si tu as tout coupé avec EcoRI, tout peut se coller ensemble.  [...] Ensuite tu dois faire une restriction diagnostique (EcoRI par exemple, tu dois pouvoir ressortir l'insert) pour savoir quels clones portent ton insert.  [...]

Southern blot et séquençage - Interprétation

Et on remarque que la mutation (transversion) qui a transformé le A en C, a fait apparaitre le site de restriction de l'enzyme (CTCGAG) chez l'individu 2.  [...] Donc on peut en déduire que cette mutation a coupé au niveau de ce site le fragment d'ADN de l'individu 2, ce qui explique le mauvais fonctionnement de son activité enzymatique.  [...]