• Forum - Enzyme, Protéine, Substrat

Vecteur de clonage, PCR et vecteur d'expression

Je ne voulais pas dire que c'etait specifique d'une enzyme mais qu'on pouvait utiliser l'enzyme comme proteine liée au DB et le substrat lié au AD.  [...] Je pense surtout que tu utilises le mauvait vocabulaire. un substrat est une petite molecule qui est modifiée par l'enzyme. dans quelques cas le substrat peut etre une autre proteine, mais on n'utilise pas le double hybride pour etudier cela.  [...]

[Biologie Moléculaire] La molécule mystère - Page 7

Je suis une protéine de 1247 aa, à deux domaines. le N-term est constitué d'environ 630 aa présentant une bonne ressemblance avec une certaine enzyme d' E.coli. Je suis quelqu'un d'atypique.  [...] Je ne sais pas trop quoi vous donner comme indices sans trop en dire... Cette protéine est un enzyme, ses deux domaines ont une fonction distincte. Cet enzyme a pour substrat l'ADN. Le point important est le mot atypique. autant la fonction que les organismes chez lesquels on la trouve.  [...]

problème avec kit ELISA

- autre problème. Je fais un blanc, sans apport de la protéine à doser. Malgré ça à la dernière étape, lorsque j'apporte le substrat de l'enzyme, j'ai une coloration et pas des moindre.  [...] Etant donnée la faible concentration de la protéine à la dernière dilution (quelques ng/ml) je me demande si elle ne se fixe pas sur les parois du verre car il y a des puits où je ne détecte rien. Donc je me dis qu'il faut peut etre mettre de la BSA.  [...]

Immunoblot

on utilise un AC Iaire marqué qui va fixé la protéine lui mm portant une enzyme qui va catalysé un substrat en un produit qui sera colorée.  [...] Entre la migration sur gel et l'autoradiographie tu as en plus une étape d'électro-transfert qui comme son nom l'indique permet simplement de transférer les protéines du gel vers une membrane (que tu vas ensuite utiliser pour faire l'autoradiographie), encore une fois grace à un champ électrique (car le sprotéine sont toujours chargées négativement).  [...]

Enzyme

Alors une enzyme est une protéine qui catalyse une réaction, transformant un substrat en produit.  [...] Et bien, l'enzyme se lie par liaisons faibles à son substrat, et donc, ce faisant, lui communique de l'énergie, abaissant par conséquent la quantité d'énergie nécessaire à la réaction.  [...]

[Génétique] Groupe sanguin et parentalité

gène 1NF qui donne une enzyme 1 non fonctionnelle ce qui bloque les réactions suivantes même si l'enzyme 2A ou 2B est présente.  [...] J'ai aussi une question à poser à Car52 sur la rareté du syndrome de Bombay. de l'ordre de 0,1 % ou 10 % Il faut en effet bien distinguer la probabilité du génotype 1NF//1NF, de la probabilité de présence de l'allèle 1NF dans le patrimoine génétique de la population.   [...]

[Biochimie] nomenclature

Toutes les enzymes sont classées en groupes, un peu du genre famille, sous-famille, sous-sous-famille et sont repertoriés avec la nomenclature EC.  [...] Il y a probablement un site sur lequel tu peux trouver toute l'arborescence. En général, le premier chiffre correspond au type de réaction catalysée, le deuxième précise le mécanisme de recombinaison, le troisième le substrat de l'enzyme dont il est question et le quatrième l'organisme dont on a isolé la protéine (de souvenirs).  [...]

[Biotechnologie] Test immuno-enzymatique... ELISA

On ajoute un deuxième anticorps qui se lie spécifiquement au premier anticorps. Le deuxième anticorps est marqué par un produit fluorescent, une espèce radioactive,... On peut aussi lui attacher une enzyme qui transforme un substrat (la molécule qu'on lui donne) en un produit détectable.  [...] On met en évidence l'anticorps marqué. Si on le détecte, la protéine est présente. Sinon, elle ne l'est pas. Dans le cas où on a attaché une enzyme au deuxième anticorps, on ajoute le substrat pour voir si la réaction se fait, et ainsi vérifier que l'enzyme est présente.  [...]

Glycolyse et maintien des métabolites

aprés il existe dans certain cas notamment dans le cas des réactions qui se produisent en des lieux précis de la cellule des transporteurs protéiques qui dirige le métabolite ou la protéine vers une zone particulière de la cellule.  [...] peut être veux t'il entendre que parler du problème des concentrations locales de molécule. lorsqu'une enzyme tourne il se crée a proximité une forte concentration locale de son produit. Si tu ajoute à ça le fait de la viscosité du milieu cellulaire et de sa forte concentration en protéine notamment celle de la glycolyse tu peux supposer que ça maintient une concentration locale suffisante pour conserver à proximiter de l'enzyme et de sa suivante les produits et substrat de la glycolyse. sinon je vois pas.  [...]

Protéine dépendante d'ions pour une oxydation chez E.Coli

Un peut compliqué comme cahier des charges. Enzyme je suppose Ou bien peut-il s'agir d'une protéine membranaire type chaine respiratoire Quand vous parlez d'oxydation, s'agit-il d'un substrat organique ou minéral Etc.  [...] Merci pour cette réponse, en effet le domaine est très large, c'était déjà à la base pour savoir si ce type de protéine existait ( enzyme surement d'ailleurs oui ), car mes recherches sont restées infructueuses.  [...]