• Forum - Enzyme, Extraction, ADN

[Biochimie] Pré-incubation ribonucléase

Il m'arrive d'en utiliser régulièrement, sans avoir besoin de cette pré-incubation. Je pense que l'enzyme que vous avez utilisée était couplée avec un anticorps ou un autre nanosupport qui bloque son activité. L'incubation à 85°C permet alors de libérer l'activité au moment où on en a besoin et non pas avant.  [...] oui c'est peut-être à cause d'un anticorps. On a utilisé cette enzyme lors d'un laboratoire sur l'extraction de l'ADN.  [...]

[Biologie Moléculaire] TP digestion ADN par enzymes de restriction par électrophorèse sur gel d'agarose

J'ai fais une extraction d'ADN puis je l'ai mis en présence d'enzyme de restriction ( c'est le TP basique avec les enzymes BamHI, EcoRI, HindIII) c'est de l'ADN de phage lambda cependant comment savoir si l'ADN a été digéré par élélectrophorèse sur gel d'agarose car j'observe plusieurs fragments mais je comprends pas trop si quelqu'un peut m'éclairer merci infiniment.  [...] Et ensuite en comparant les profils de restrictions de chaque enzyme et des combinaisons de plusieurs enzyme tu peux déduire comment les sites de restrictions se trouvent les uns par rapport aux autres sur ton ADN de phage du départ.  [...]

TPE sur les oignons

Je suis en 1ère S et je réalise un TPE sur les oignons. Ma problématique serait certainement. Peut-on produire des oignons qui ne font pas pleurer. J'ai découvert qu'une enzyme nommée alliinase est à l'origine d'une réaction chimique permettant la production d'un gaz ensuite transformé en acide sulfurique au contact avec nos yeux.  [...] Cela entraîne par la suite le larmoiement. Je me suis dit que si on extrait le gène codant cette enzyme de l'ADN de l'oignon cela permettrait d'empêcher cette réaction chimique. Pour l'instant, je n'ai pas trouvé de protocole d'OGM modifié par l'extraction d'un gène et je me demande si cela est possible.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction de l'ADN et digestion enzymatique

Je suis actuellement en train de rédiger mon compte rendu de TP concernant une extraction d'ADN et une digestion enzymatique par 3 enzymes (EcoRI, BamHI et HindIII), en faisant le TP, notre professeur ne nous a pas vraiment expliqué, je dirais même qu'il n'a donner aucune information.  [...] Le but de ce TP est faire une carte de restriction et sur une pGlo carte j'ai pu identifier les sites de restrictions de chaque enzyme et faire la carte de restriction mais la chose qui me pose problème, c'est de tracer la courbe étalon à partir des deux électrophorèses.  [...]

recherche d'un contact par mail avec un laborantin

j'ai l'impression que tu n'as pas bien compris à quoi servait l'électrophorèse. Si tu essaies de faire migrer ton ADN brut d'extraction tu n'obtiendras rien d'intéressant. Il te faut d'abord le découper en morceaux (enfin, c'est une des méthodes possibles) à l'aire d'enzymes qui coupent en certains sites bien particuliers.  [...] Le plus long est l'étape d'extraction de l'ADN, car il faut un temps d'attente d'une nuit (environ 16h). Puis l'extraction en elle même n'est pas spécialement longue (2-3h). Dans mon ancien labo, on préférait que l'ADN se re-suspendre après purification sur la nuit également, à 4°C, mais cela n'est pas obligatoire.  [...]

demande d'infos!!! extraction de l'ADN

j'ai pas une question. plutot une demande... je ne sait pas si quelqu'un pourra m'envoyer un document complet concernant l'extraction de l'ADN, avec le principe de chaque étape, pourquoi chloroforme pourquoi phenol.  [...] Tout dépend pour quoi tu veux réaliser une extraction d'ADN. Je vais essayer de l'expliquer dans le cadre d'une extraction d'ADN pour les bactéries.  [...]

protocole d'extraction d'ADN

Tout ce qui s'appelle miniprep midiprep ou maxiprep correspond à une extraction d'ADN plasmidique. Le lien que vous proposez est une méthode de miniprep. Il ne vous intéresse donc pas si vous cherchez à purifier l'ADN génomique.  [...] voila la protocole que mon prof ma demande de faire avec mais le problème c que je ne trouve pas tous les donnée il faut que je le complète mais je ne sais pas comment vu que c la 1er fois que je fait une extraction d'ADN pour une bactérie et aussi le prof ne m'as pas donner la source de ce protocole.s.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction d'ADN

En ce qui concerne l'extraction d'ADN, sous quelle forme on obtient notre ADN vers la fin du protocole d'extraction (precipitation à l'éthanol).Autrement dit, est-ce qu'on est obligé d'obtenir de l'ADN sous forme de pelote ou bien ce n'est pas toujours le cas.  [...] Si c'est une extraction d'ADN plasmidique, la présence d'une pelote ou de longs filaments témoignent d'une contamination des plasmides par de l'ADN génomique bactérien. Quel est ton type d'extraction d'ADN. ADN total ou ADN plasmidique.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction de l'ADN de cellules eucaryotes, lyse

le phénol et le chlorophorme permettent de solubiliser d'une part les protéines et les lipides d'autre part, cela fait partie de l'extration à part entière ou bien ces produits interviennent-ils également dans la lyse des cellules.   [...] pour la suite du protocole d'extraction d'ADN, on utilise le phénol et le chlorophorme à partir de notre lysat cellulaire c'est bien ça ou bien doit-on préalablement centrifuger pour éliminer l'eau.  [...]

rDNA ou rRNA?

Et quand on fait la classique extraction d'ADN à partir de cellules vgales broyées, dans l'ethanol, l'amas floconeux plusoumoins chevelu c'est un mélange n'est-ce pas.  [...] Pour la classique extraction, l'amas floconneux est bien un melange des ADN totaux. D'ailleurs c'est marrant les extractions fait maison, avec que des produits que l'on trouve chez Mr tout le monde. Pour la fete de la science il y avait pas mal d'endroit ou ils faisaient ca.  [...]