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[Biochimie] Gamme étalon BSA

je te conseille de diluer ton échantillon protéique (dans le tp avec lequel tu fais ton 0/blanc) pour que ta Do de l'échantillon rentre dans ta gamme BSA. Après tu trouves la valeur/concentration de ton [B][B] échantillon dilué et tu fais ton calcul pour la concentration finale de ton échantillon en tenant compte de la dilution que tu as effectué.  [...] En connaissant le coefficient directeur de ta droite, tu peux alors déduire théoriquement n'importe quelle concentration à partir de n'importe quelle absorbance. Mais en pratique, il vaut mieux avoir une gamme qui couvre l'ensemble des concentrations que tu as dans tes échantillons.  [...]

[Biologie Cellulaire] Extraction protéique pour western blot

o Préparer le mélange des réactifs (1 volume de B pour 50 volumes de A) – 1ml nécessaire pour chaque échantillon à tester + 1 pour le blanc + 9 pour la gamme BSA.  [...] o Dans un tube eppendorff 1,5ml, ajouter 1ml de réactif (A+B) et 5ul d'extrait protéique ou de gamme BSA. Ne pas oublier de faire un blanc pour les protéines (5ul de RIPA-N base + additifs ).  [...]

[Biochimie] Dilution en cascade

Je doit réaliser une gamme étalon de la protéine standard BSA (Bovin Serum Albumin) pour doser les protéines de mes échantillons avec la méthode.  [...] Ben dans ce cas là tu prends ta solution solution mère à partir du tube précédent. C'est à dire que tu commences tout d'abord par créer ton tube 5 puis pour faire ton tube 4 tu prélèves dans le tube en l'utilisant comme solution mère puis tu complètes avec du PBS jusqu'à avoir un volume final de 100 uL.   [...]

[Biochimie] Mise au point ELISA qui pose probleme

Je suis parti sur ELISA par compétition, en coatant le peptide recombinant sur une plaque polysorp, puis en saturant avec du PBST BSA 3%. La compétition se fait avec échantillons et anticorps dilués dans PBST BSA 1%. Je dilue ma.  [...] gamme dans du PBST BSA 1%. A chaque tentative, j'ai toujours obtenu une belle gamme. En revanche pour les échantillons, je n'ai aucun réplicat correct et je ne retrouve aucune logique dans les échantillons dilués en série.  [...]

[Biochimie] Dosage de protéines par Bradford

J'ai effectué le dosage de protéine du lait. Pour l'extraction des protéines, j'ai peser 4g de l'échantillon et ajouter 20 mL de méthanol. Après centrifugation le volume extrait de surnageant est de 21 mL avec une absorbance de 0.050 nm. La courbe d'étalonnage du BSA en fonction de l'absorbance est. y= 0.0078x.  [...] Non, je répète. vous aviez 4 g d'échantillon dans vos 21 mL, au final vous avez 6.4 µg protéine BSA dans 100µL qui représente 0,019 g donc.  [...]

[Biochimie] Role de la BSA dans une extraction protéique ??

Pour bien faire les choses, tu devrais réaliser ta gamme BSA étalon dans le tampon d'extraction, comme ça plus de problème avec la BSA du tampon.  [...] une solution serait de faire une extraction témoin sans échantillon que tu utiliserais pour faire la gamme, mais je n'ai aucune idée de si la quantité qui sera présente aura un impact sur le dosage.  [...]

[Biochimie] [TP Séparation de molécules par chromatographie d'exclusion sur colonne] Niveau L1S1

Les deux et troisième manip du TP consistent à établir la gamme étalon du cytochrome c par dilution d'une solution-mère à 0,5mg/mL dans différents volumes et mesure d'absorption à 408nm ainsi que la gamme étalon pour le dosage des protéines grâce à une solution de BSA (albumine sérique de boeuf) à 1mg/mL avec du bleu de coomassie (méthode de Marion S. Bradford).  [...] On a ensuite dû prélever 20micro litres des fractions 1 à 11 (la dernière contenant les dernières molécules de cytochrome c) et d'y rajouter 1mL de bleu de Coomassie permettant de mettre en évidence la présence des protéines. Avec la gamme étalon du BSA, on a pu obtenir la quantité de protéine pour ces fractions, en micro g.  [...]

[Biochimie] Chromatographie d'exclusion sur colonne !

L'autre façon de voir les choses c'est que plus une protéine est en grande quantité plus elle va être éluée sur un nombre de fraction importante. Donc cela tu peux le vérifier puisque tu as fait des dosages par bradford. Regarde la concentration de chaque protéine dans chaque tube puis calcule la masse ou la quantité de chaque protéine.   [...] On a fait une gamme étalon de l'absorbance de BSA colorée au réactif de Bradford. mais c'est quoi le BSA quelle est son utilité il est censé représenter une protéine.  [...]

determination de l'activité xanthine oxydase dans le foie

pour calculer la concentration de l'acide urique produite par minute on divisera l'absorbance par le coefficient d'extinction molaire de l'acide urique divisé par 10mn. donc on aura la concentration en mmolaire/l mn multiplié par le volume de l'échantillon.  [...] en parallele je calcul la quantité de protéine présente dans l'échantillon par le bradford (BSA comme standard).  [...]

calcul de concentration

tu fait ta gamme étalon (par ex 0, 5, 10, 20, 30 µg de BSA par tube, volume constant Vx par tube, 100µL en général).  [...] Avec l'équation de la droite de régression, tu peux touver la quantité de protéine dans ta prise d'essai (5 ou 10µL) et donc ta concentration.   [...]